盐酸沙格雷酯控释微丸的制备及其质量评价

陈 超 1，黄春玉2，谢 俊 2，周建平1*

1中国药科大学药剂学教研室，南京 210009；2南京金陵药业股份有限公司，南京 210009

盐酸沙格雷酯（Sarpogrelate hydrochloride，SARP），是由日本三菱制药株式会社开发的新型5-HT2受体阻滞剂类抗血小板药物[1]。临床上主要用于改善慢性动脉闭塞症引起的溃疡、疼痛及冷感等缺血性症状。其结构见图1。

图1 盐酸沙格雷酯结构式

20世纪九十年代开始SARP在全球范围内上市，其制剂类型包括片剂、颗粒剂等，规格有100 mg、50 mg。1998 年在我国批准进口片剂（100 mg）上市[2]，时至今日国内生产品种仍以其普通片剂为主。由于SARP在人体内消除半衰期较短，患者需一日服药三次。因此为降低峰谷波动，提高生物利用度，减少服药次数，宜将其研制为缓控释制剂。微丸，作为目前应用较为广泛的口服固体缓控释剂型之一，具有释药稳定，载药范围宽（可从1%至95%以上），生物利用度高，血药浓度平稳，有效浓度维持时间长等诸多优点[3]。本文旨在研制具有缓控释作用的SARP微丸，以期能够使其平稳释药，提高患者用药依从性。此外，SARP控释微丸的研究亦可为工业化生产提供一定参考。

1 仪器与试剂

1.1 仪器

E-35A型挤出机、R-250型抛圆机 （重庆英格制药机械有限公司）；流化床（重庆精工制药机械责任有限公司）；TDTF RCZ-8M智能溶出仪 （天津天大天发科技有限公司）；320型pH酸度计（Mettler Toledo公司）；LabTech UV Blue Star紫外可见分光光度计 （北京莱伯泰科仪器有限公司）；显微镜（Novel公司）；BT-1600图像颗粒分析系统、百特粉体学性质测定仪（丹东百特科技有限公司）。

1.2 药品与试剂

SARP（纯度＞95%，南京康然医药科技有限公司，批号：100608）；聚丙烯酸树脂 Eurdragit NE30D（赢创德固赛特种化学有限公司，批号：B111112096）；羟丙基甲基纤维素 HPMC-E5（上海卡乐康公司，批号：PD357580）；聚乙二醇PEG 6000（广东光华科技股份有限公司，批号：20111018）；柠檬酸三乙酯（阿拉丁化学试剂公司，批号：45523）；药用滑石粉 （广西龙胜华美滑石研发有限公司，批号：060821）；微晶纤维素PH-102（安徽山河药用辅料股份有限公司，批号：101001）；药用淀粉（江苏昕宇药业有限公司）；吐温80（上海申宇医药化工有限公司，批号：100518）；柠檬酸（上海荣润化工有限公司）；其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 载药丸芯的制备

将处方量的SARP、微晶纤维素（MCC）、淀粉粉碎、混匀过80目筛，以1%HPMC溶液作为粘合剂制备软材，采用挤出滚圆工艺制备载药丸芯。所制备载药丸芯置于60℃电热鼓风干燥箱内干燥6 h，过筛，取24～30目丸芯备用。

2.2 药丸芯的质量评价

2.2.1 圆整度微丸的圆整度反映了微丸的成球性，对微丸的包衣质量、胶囊填充以及制剂的含药均一性有很大影响。一般多采用投影球形度、长短径比、形态因子等指标评价微丸的圆整度[4]，通常大样本采集操作繁琐，计算工作量庞大，而小样本测量的微丸数量又有限，不具有统计学意义。将图像分析技术用于评价微丸圆整度[5]，操作简便，运算快捷，精确度较高。

本实验即采用图像分析法评价微丸的圆整度，以圆整度值作为评价指标，圆整度值愈趋近于1，认为微丸的圆整度愈好。实验中随机抽取两批微丸，每一批微丸约1000粒，其中一批微丸处方中含有表面活性剂，对微丸进行显微镜观察，采用BT-1600图像分析软件对样本在线分析，以圆整度数值在0.9～1区间的颗粒百分比为计。结果含有表面活性剂的微丸的圆整度值在0.9～1的微丸占96.12%，均值为0.96；未含表面活性剂的微丸圆整度值在0.9～1的微丸占90.25%，均值为0.91。

2.2.2 粒径分布采用筛分法评价微丸的粒径分布，将干燥后所得微丸筛分，收集不同粒径下的微丸，计算不同粒径分布区间的百分比。结果微丸粒径分布以24～30目最多，占92.53%，粒度分布范围窄，粒度较均匀。

2.2.3 流动性与堆密度采用粉体学性质测定仪测定载药微丸的休止角及堆密度评价微丸的流动性。测得载药微丸休止角α=27.5°，堆密度ρ=0.721 g·cm-3。说明微丸流动性较好，有利于包衣和进行胶囊灌装。

2.2.4 脆碎度参照片剂脆碎度测定方法[6]。取6.5 g微丸及10粒直径为7 mm的球形玻璃珠，置于脆碎度仪器中，25 r·min-1旋转10 min，过筛收集细粉并称量。计算微丸脆碎所损失细粉百分率为1.02%，表明微丸脆碎度良好，可用于流化床包衣。

2.2.5 收率收率是评价载药微丸处方和工艺的重要指标。本实验以24～30目微丸为目标产品。通过筛分法，称取目标微丸的重量，计算目标产品的得率，均在80%以上，处方中添加适当比例的淀粉后，微丸收率可进一步提高，达90%以上。

2.3 载药丸芯的包衣

2.3.1 隔离衣采用流化床设备底喷技术进行包衣。包衣液转速 5 r·min-1，喷枪雾化压力为 0.14 MPa，流化床床温45～55℃，隔离衣选用HPMC E5，增塑剂为PEG6000，包衣增重约5%。

2.3.2 控释衣称取处方量滑石粉，加入适量水中，匀化，缓慢倒入搅拌状态下的Eurdragit NE30D中，制得控释包衣液，以转速5 r·min-1，喷枪雾化压力为0.14 MPa，流化床床温25～35℃的条件对SARP隔离衣丸进行流化包衣，包衣结束后于流化床中继续流化干燥15 min。包衣厚度以隔离衣丸增重计。

2.4 药物在释放介质中的稳定性研究

SARP在中性及弱酸性环境中不稳定，易降解。现考察SARP在释放介质中的稳定性。取同一批样品溶出液 1 份，分别于 0 h，1、2、4、6、8、12 h 照紫外分光光度法，在272 nm的波长处测定吸收度，测定结果见表1。

表1 药物溶液稳定性试验结果

结果表明，在室温中放置12 h内，被测溶液的吸收度没有明显变化，说明释放度测定的样品溶液稳定。

2.5 释放度测定

取自制SARP控释微丸样品6份，每份300 mg（约含 SARP 150 mg），按照《中国药典》2010 年版二部附录ⅩD释放度测定法以及ⅩⅨD缓释控释和迟释制剂指导原则等[6-9]进行实验。采用转篮法，转速100 r·min-1，温度为（37±0.5）℃，释放介质为 900 mL的 pH 6.8 磷酸盐缓冲液， 分别于 1、2、3、4、5、6、7、8、12 h时取溶液10 mL，立即经0.45 μm微孔滤膜滤过，自取样至滤过在30 s内完成，同时补充等温等体积介质。滤液在272 nm处测量吸收度，计算药物累积释放度，绘制制剂释放行为曲线。

2.6 包衣增重的筛选

经过反复多次的包衣实验，隔离衣增重为含药丸芯的5%时，隔离层既能很好地将主药和控释衣完全隔离开，避免药物与离子型膜材直接接触而影响药物的稳定性，又不致包衣层过厚影响药物释放。不同控释衣增重的SARP微丸在pH6.8的磷酸盐缓冲液中的累积释放如图2所示。由图2可知，控释衣增重为隔离衣丸重的7%时，控释微丸在溶出介质中可达到良好的释药行为。

图2 不同控释衣增重对微丸释放度影响

当控释衣为隔离衣丸重的3%～5%时，由于不能在隔离衣丸表面形成完整连续的控释衣膜而出现突释。当控释衣增重大于10%时，由于控释衣层较厚，控释微丸在溶出介质中释放较慢，12 h后释药未超过60%。因此，本制剂以控释衣层增重7%为优选处方项目。

2.7 包衣后热处理（膜的老化）

包衣结束后，将包衣微丸置于电热干燥箱中进行热处理，以促进衣膜愈合[6]。

由于采用的是水分散体包衣技术，包衣结束后的热处理（包衣膜老化）对包衣膜的愈合影响较大，进而影响药物的释放行为。本实验对包衣膜热处理的温度（40℃、50℃、60℃）和时间（12 h、24 h、48 h）进行了考察。结果表明40℃老化48 h包衣膜不能完全愈合。50℃及60℃老化24 h可以完成膜的愈合过程，两温度下老化后的微丸释放行为一致，继续老化对膜愈合和释放速率影响不大。因此，确定包衣膜老化工艺参数为50℃、24 h。

2.8 重复验证试验

根据上述实验筛选结果，采用挤出滚圆工艺制备载药丸芯，HPMC为隔离衣，Eurdragit NE30D为控释衣，包衣膜50℃老化24 h，制备SARP控释微丸3批，每批样品6份，进行释放度检测并绘制制剂释药行为曲线。结果如图3所示。

图3 不同批次SARP控释微丸释放行为

由图3可知，SARP控释微丸在释放介质中缓慢释放，达到了12 h缓释的目的。按处方工艺制备的不同批次的微丸释放行为一致，重现性较好。

2.9 释药模型的拟合

对“2.8”项下重复验证试验得到的各释放时间点的实测数据分别与零级释药模型、一级释药模型、Higuchi方程进行累积释放度Mt/M∞（Mt为t时间释放量，M∞为∞时累积释放量）和时间（t）进行拟合[6]，结果见表2。由表2可见释药曲线以零级释药方程拟合时，其拟合度最大，均方误差最小，拟合最佳。因此，零级释药模型为该制剂释放的最佳拟合模型，达到了控释设计要求。

表2 体外释放模型拟合结果

3 讨 论

本实验以挤出滚圆法制备了含药量70%的SARP载药丸芯，丸芯圆整度较好，脆碎度佳，目标粒径收率较高，并以Eurdragit NE30D水分散体作为控释衣膜材料制备了SARP控释微丸。

3.1 载药丸芯制备

挤出滚圆法制备微丸，软材的性质是决定载药丸芯成型好坏的关键因素。MCC有 “分子海绵”之称，被认为是良好的“成球促进剂”[7]，也是本实验处方中微丸主要的赋形剂。处方中MCC所占比例较大时制得的微丸圆整度较好，硬度较大，脆碎度较佳，但对于难溶性药物而言比例较大可能会阻滞药物的释放。处方中添加适当比例的淀粉可提高微丸收率，亦可改善药物的释放速率；表面活性剂可显著改善软材的性质，使软材具有良好的粘弹性，对提高微丸的圆整度有一定作用。

3.2 载药丸芯质量评价

载药丸芯的质量直接影响控释微丸的释放度。丸芯粒径差异大，造成表面积不同，密度不同，含主药比例不同，影响微丸释放度和含量的均匀性。丸芯圆整度，影响控释材料在微丸表面包裹的完整性和厚度差异进而影响控释微丸的释放行为。因此在进行包衣前应对所制备载药丸芯进行质量评价。以丸芯的脆碎度、粒径大小、粒径均匀度和圆整度应作为主要评价指标。

3.3 缓释微丸的制备

对于膜控性缓释微丸，控释膜包衣是影响微丸释放行为的决定性因素。包衣膜材的种类，包衣增重以及包衣膜的热处理温度和时间均对药物释放有影响。

3.3.1 隔离衣主药SARP对溶液pH敏感，遇水易发生水解反应，为提高SARP载药丸芯的稳定性，对丸芯包隔离衣可起到一定的防潮作用，同时可减小微丸的脆碎度，进而有利于控释包衣，防止控释微丸出现突释现象。

3.3.2 控释衣根据Ficks扩散第一定律：-（dc/dt）=D·g·Q·（c1-c2）/d，其中 D 为药物的扩散系数，药物释放速率主要由微丸包衣膜的通透性（g）、衣膜厚度（d）、膜内外的浓度梯度（c1-c2）决定。 包衣膜的通透性主要同增塑剂与致孔剂的用量有关，衣膜的厚度与包衣增重相关。

本实验中选用的控释衣膜材Eurdragit NE30D无需外加增塑剂及致孔剂，因而药物的释放主要与包衣增重有关。由实验结果可知，包衣膜增重越大，药物释放越缓慢。这与Fick扩散第一定律相一致。包衣增重较小时，包衣液不能完全包覆微丸表面或不能在微丸表面形成完整连续的衣膜，因而微丸释放出现突释现象。包衣增重较大时，微丸表面衣膜厚度较大，药物从衣膜内侧向外侧迁移的路径增加，阻滞力增大，药物释放明显变得缓慢。

3.3.3 包衣膜的热处理水性分散体包衣液成膜时必须经过膜愈合过程，使聚合物粒子相互融合形成连续致密的衣膜。虽然包衣过程中伴随着膜的愈合，但并不能完全完成包衣膜的愈合，需在包衣结束后，作进一步的热处理，使衣膜愈合完全[8]。热处理温度与时间直接影响着微丸的释放度，故在工艺研究时需对其进行考察。衣膜的热处理温度因所选膜材而异，对于Eurdragit NE30D而言，温度过高（＞70℃），粘连衣膜软化，反而不利于膜的愈合和完整。温度过低（＜40℃），不能达到衣膜愈合的最低温度，衣膜不易愈合或所需热处理时间较长，人力物力耗费较大。

[1]Gray JA,Roth BL.Paradoxical trafficking and regulation of 5-HT2Areceptors by agonists and antagonists[J].Brain Res Bullet,2001,56(5):441-51.

[2]郑子恢，安步乐克[J]. 中国新药杂志，1999，8（11）：772.

[3]平其能，胡一桥，周建平，等.现代药剂学[M].北京：中国医药科技出版社，1998-10：411-3.

[4]陆 彬，邓英杰，吕万良，等.药物新剂型与新技术[M].第 2版.北京：人民卫生出版社，2005，5：460-1.

[5]方 昀，张钧寿，周建平.应用图像分析优化微丸挤出滚圆工艺参数[J]. 药学与临床研究，2009，17（5）：382-5.

[6]国家药典委员会.中华人民共和国药典：二部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：附录ⅩG、附录ⅣA、ⅩD、ⅩⅨD.

[7]Tunón A,Bo¨rjesson E,Frenning G,et al.Drug release from reservoir pellets compacted with some excipients of different physical properties[J].Eur J Pharm Sci,2003,20(4-5):469-79.

[8]平其能，张 灿，石勇平，等.尤特奇（聚甲基丙烯酸酯）应用技术指南[M].北京：化学工业出版社，2009：13-4.