高效液相色谱法测定喜炎平注射液中穿心莲内酯的含量

张玉霖 张又枝 陈 莉

（咸宁学院药学院，湖北 咸宁 437100）

喜炎平注射液可抗病毒且广谱抗菌，在临床上广泛用于治疗支气管炎、病毒性肺炎、扁桃体炎、小儿急性热性疾病以及细菌性痢疾等疾病[1-3]，主要成分是由穿心莲内酯通过磺化反应制得的穿心莲内酯总磺化物[4,5]，磺化反应不完全或者磺化物分解可产生穿心莲内酯，穿心莲内酯也具有穿心莲抗炎、抗菌、抗病毒等功效，但其含量多少可反映喜炎平注射液的整体质量，目前未见喜炎平注射液中穿心莲内酯测定方法的报道，为了进一步完善这类注射液的质量控制标准，我们建立了HPLC法测定穿心莲内酯的含量，现介绍如下。

1 仪器与试药

LC-20AT型高效液相色谱仪（日本岛津），SPD20A 型紫外检测器，N2000型色谱数据工作站，FA2004电子分析天平，SK2200H超声仪。穿心莲内酯对照品（批号：110797-200307，中国药品生物制品检定所），喜炎平注射液（江西青峰药业有限公司），甲醇为色谱纯 ，水为重蒸馏水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱： Eurospher 100～5 C18（250 mm× 4.6 mm，5μm）；流动相：甲醇-水（90:10）；检测波长：225nm；流速：lmL/min；柱温：室温。色谱图见图1。

图1

2.2 线性关系

精密称取穿心莲内酯对照品49.68mg，置于100mL量瓶中，加甲醇溶解适量，超声5min，用甲醇并稀释至刻度，摇匀，作为储备液。精密量取储备液1、2、4、6、8、10mL分别置于 l0mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，按上述色谱件，分别取20μL进样，以峰面积 y对对照品进样量（μg/mL ）作线性回归。结果回归方程（n=6）为：Y=11967.8x+ 324621，r2= 0.9996。

线性范围为：24.84μg/mL～248.4μg/mL。

2.3 重复性实验

精密量取2.00mL同一批号样品（批号：20100531）6份，按样品测定项下的方法，测定穿心莲内酯的含量，RSD为 0.87%。

2.4 稳定性实验

取重复性实验中的第 1份溶液，室温下在 0、0.5、1、2、3h测定，结果表明，本品的供试品溶液在室温 3h内基本稳定，RSD=0.77%，n=5。

2.5 精密度试验

取浓度为124.2μg/mL的穿心莲内酯对照品溶液，重复进样5次，结果 RSD为 0.84%。

2.6 加样回收实验

精密量取喜炎平注射液2.00 mL，分别置10mL量瓶中，再分别精密加入对照品溶液，加甲醇稀释至刻度，摇匀，照样品测定项下的方法测定加样回收率，结果见表1。

2.7 样品测定

精密量取本品2.00mL，于10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，按上述色谱条件，取20μL进样测定，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，结果见表2。

表2 喜炎平注射液测定结果表（n=5）

3 讨 论

本研究采用高效液相色谱法测定，检测波长、流动相的组成均参照《中国药典》[6]穿心莲项下的含量测定方法，采用比较常用的甲醇-水作为流动相。考察了不同流动相配比的分离情况，其中甲醇-水（90∶10）时所得色谱图中峰形和分离度都比较满意。该方法操作简单，结果准确，为药品质量控制提供了一定的参考。有研究[5]表明，以穿心莲内酯为表征性参比物质，通过校正因子，可实现穿心莲内酯磺化物对照品量值的准确传递。在该色谱条件下，能否实现穿心莲内酯磺化物对照品量值的准确传递，从而在穿心莲内酯磺化物对照品不易获得的情况下以穿心莲内酯为对照品间接测定穿心莲内酯磺化物的量，还需要进一步考察。

表1 回收率测定结果表（n=5）

[1]李艳梅,王雪梅.喜炎平治疗病毒性上呼吸道感染等312例[J].实用中医内科杂志,2004,14(4):244-245.

[2]陈银喜,宋宗武,陈银珍,等.喜炎平治疗小儿毛细支气管炎 50例[J].福建中医学院学报,2004,14(5):14.

[3]何永胜.喜炎平注射液治疗小儿急性腹泻病疗效观察[J].实用医技,2007,l4(5):587.

[4]卫生部药品标准.中药成方制剂[S].19册,1998:129.

[5]邹晓丽,于翠翠,许卉,等.喜炎平中穿心莲内酯磺化物 E含量测定对照品量值传递方法研究[J].药物分析杂志,2010,30(1):134-137.

[6]国家药典委员会.中国药典.一部[S].北京:化学工业出版社,2005:189.