两种输液器对舒血宁注射液质量影响的研究

孙瑞芳， 刘 蕾， 蔡海燕， 刘永锁

（1.民航总医院，北京 100123；2.北京双鹤高科天然药物有限责任公司，北京 100123；3.民航医学研究所，北京 100123）

舒血宁注射液具有扩张冠脉血管、脑血管，改善脑缺血产生的症状和记忆功能，被临床广泛应用于治疗急慢性脑机能不全及其后遗症、缺血性心脏病、眼部的血流及神经障碍、耳部的血流及神经障碍及末梢循环障碍。但是，近几年来中药注射剂的不良反应引起人们的关注，尤其是不溶性微粒带来的输液反应时有发生［1］。大量文献报道使用精密过滤输液器和普通输液器的对比观察，发现使用精密过滤输液器有预防和减少静脉炎发生的作用，且效果明显［2-3］。所以，临床上普遍使用精密过滤输液器输注中药注射剂。

目前中药注射剂的输注选择精密输液器是基于临床观察得出的一种看法，它对降低输液反应是有利的，但是中药注射剂成分复杂，一般有多个主要成分，那么中药注射剂经过精密输液器后主要成分的含有量是否有变化［4］。而且，临床上也遇到精密输液器的过滤装置在输注舒血宁注射液过程中被堵的情况，因此，本项目选择舒血宁注射液为模型药物，以指纹图谱作为舒血宁注射液质量的主要评价方法［5-6］。通过建立高效液相色谱法考察精密输液器和普通输液器对舒血宁注射液质量的影响，为临床应用舒血宁注射液选择合适的输液器提供依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器 高效液相色谱仪(岛津LC-20AT)；高效液相色谱仪进样器(SIL-20AT)；雷磁PHS-3C精密pH计；GWF-5J微粒分析仪(激光光源传感器，天河医疗仪器有限公司)；500 mL洁净输液瓶；一次性普通输液器(0.7×20，规格H-06APD-3T4，天津哈娜好医材有限公司)；一次性精密输液器(过滤介质孔径为5.0 μm，规格PT-20D，北京伏尔特技术有限公司)。

1.2 试药 舒血宁注射液(北京双鹤高科天然药物有限公司规格:5 mL/支，含总黄酮醇苷4.2 mg，银杏总内酯0.70 mg，批号091119)，5%葡萄糖注射液(250 mL/500 mL，批号200912073，北京双鹤药业)、氯化钠注射液(250 mL/500 mL，批号200911042，北京双鹤药业)；乙腈为色谱纯，水为注射用水，磷酸为分析纯。

2 方法与结果

2.1 方法学考察

2.1.1 色谱条件［7］色谱柱:Phenomenex:Kinetex TMC18(2.6 μm，4.6 mm×100 mm)；流动相为水(0.5% 磷酸水溶液)(A)-乙腈(100%)(B)。梯度洗脱条件见表1。检测波长 360 nm；进样量 5 μL。

表1 梯度洗脱条件

2.1.2 系统适用性实验 取舒血宁注射液稀释液、芦丁对照品分别进样5 μL，记录色谱图，见图1。对比保留时间，将芦丁峰作为参照峰，理论塔板数应大于40000，样品在芦丁峰前后分离为不少于5个色谱峰(实际为7～8个色谱峰)，其相邻峰的分离度不小于1.2。同一供试品连续进样10针，其相似度应大于0.99。

2.2 实验方案［8］

2.2.1 单因素考察舒血宁注射液在不同条件下输注后的含有量对比研究 模拟临床输液环境，单因素考察舒血宁注射液在不同质量浓度、不同溶媒、不同输注速度、不同输液器配置条件下药物输注后的含有量变化(n=3)，输注后用洁净输液瓶收集液体经HPLC观察舒血宁指纹图谱特征，测定相似度。结果见表2。

2.2.2 单因素考察舒血宁注射液在不同条件下输注后的微粒分布对比研究［9］模拟临床输液环境，单因素考察舒血宁注射液在不同质量浓度、不同溶媒、不同输注速度、两种输液器滤过条件下药物输注后的微粒分布变化(n=3)，输注后用洁净输液瓶收集液体经GWF-5J微粒分析仪测定微粒个数。

表2 单因素考察实验方案

2.2.3 单因素考察舒血宁注射液在不同条件下输注后的pH对比研究 模拟临床输液环境，单因素考察舒血宁注射液在不同质量浓度、不同溶媒、不同输注速度、两种输液器滤过条件下药物输注后的pH变化(n=3)，输注后用洁净输液瓶收集液体经精密pH计测定pH。

2.3 实验结果

2.3.1 舒血宁注射液HPLC指纹图谱 本实验中供试品为舒血宁注射液原液稀释25倍液，从指纹图谱分离情况看，芦丁峰的理论塔板数为40000，在芦丁峰前后分离为不少于5个色谱峰，相邻峰的分离度为1.2，同一供试品连续进样相似度大于0.99，满足舒血宁注射液配伍实验测定要求。见图1。

图1 舒血宁注射液HPLC指纹图谱

图2 单因素实验方案中舒血宁注射液的HPLC指纹图谱

表2 单因素实验方案中舒血宁注射液的相似度

2.3.2 不同条件下舒血宁注射液输注后指纹图谱 单因素考察舒血宁注射液在不同条件下输注后的指纹图谱与舒血宁注射液标准图谱匹配图见图2，计算后相似度见表2。舒血宁注射剂的质量控制范围为与标准指纹图谱比较相似度大于0.90合格。

由上述结果得出，舒血宁注射液20 mL加入到5%葡萄糖250 mL经普通、精密输液器2 h滴完后样品指纹图谱相似，相似度比为0.989；舒血宁注射液20 mL加入到5%葡萄糖500 mL注射液中，经普通、精密输液器2 h滴完后样品指纹图谱相似，相似度比为1.004；舒血宁注射液20 mL加入到5%葡萄糖250 mL注射液中，经普通、精密输液器高速(约1 h)滴完后样品指纹图谱相似，相似度比为1；舒血宁注射液20 mL加入到250 mL 0.9%氯化钠后分别经过普通输液器和精密输液器2 h滴完后样品指纹图谱相似，相似度比为1，指纹图谱均未发现显著性变化。

2.3.3 不同条件下舒血宁注射液输注后不溶性微粒 单因素考察舒血宁注射液在不同条件下输注后的不溶性微粒个数测定结果见图3～5。

图3 单因素实验方案中舒血宁注射液输液过滤前后不溶性微粒检测结果

图4 不同实验方案下≥10 μm微粒测定结果

图5 不同实验方案下≥25 μm微粒测定结果

按照中国药典［10］规定，5%葡萄糖注射液250 mL每1 mL中含≥10 μm的微粒不得超过25粒，含≥25 μm不得超过3粒，舒血宁注射液每支(5 mL)中含≥10 μm不得超过6000粒，含≥25 μm不得超过600粒，本实验中收集输注后配伍液体100 mL，按照中国药典标准计算，总≥10 μm粒子不得大于(25×250+6000×4=30250)，总≥25 μm粒子不得大于(3×250+600×4=3150)，则每1 mL中含≥10 μm不得超过112粒，含≥25 μm不得超过12粒。由图3看出，每1 mL中含不溶性微粒≥10 μm 有25～58个，含≥25 μm有4～9个，均符合规定，通过SPSS统计软件分析，经不同输液器后微粒没有显著性差异(P＞0.05)；由图4～5看出，4种实验方案下≥10 μm和≥25 μm微粒比较，输液前(舒血宁注射液与溶媒配伍后0.5 h，不经过输液器直接取样)的不溶性微粒与两种输液器输注后的不溶性微粒个数是有显著性差异的(P＜0.05)，A、B、C 3种方案中舒血宁注射液与5%葡萄糖注射液配伍后输液前≥25 μm微粒个数超出中国药典标准，只有D方案中舒血宁注射液与0.9%氯化钠配伍后输液前和输液后的不溶性微粒个数都是符合药典标准的。

2.3.4 不同实验方法测定的舒血宁注射液的pH值，结果见表3。

表3 单因素实验方案中舒血宁注射液输液的pH值

由表3可见，舒血宁注射液模拟临床输液，20 mL加入到5%葡萄糖注射液250 mL中，经普通、精密输液器2 h滴完后样品的pH 4.74，4.69；舒血宁注射液20 mL加入到5%葡萄糖500 mL注射液中，经普通、精密输液器2 h滴完后样品pH 4.16、4.15；舒血宁注射液20 mL加入到5%葡萄糖250 mL注射液中，经普通、精密输液器1 h滴完后样品的pH 4.70、4.71；20 mL舒血宁注射液加入到250 mL 0.9%氯化钠后分别经过普通输液器和精密输液器2 h滴完后样品pH 5.02、5.03；可以认为两种输液器对舒血宁注射液pH没有影响。

3 讨论

3.1 本实验通过建立高效液相法测定舒血宁注射液与溶媒配伍后的舒血宁中黄酮类化合物的含有量变化，液相条件已经用于生产企业的质量控制，方法可靠，舒血宁注射液中黄酮类化合物的指纹图谱分离度高，相似度计算方法可行。

3.2 本实验方案模拟临床输液情况，按药品说明书使用要求选取剂量为20 mL，单因素考察舒血宁注射液在不同质量浓度、不同溶媒、不同输注速度、不同输液器配置条件下药物输注后的含有量变化。实验结果显示，舒血宁注射液在高或低质量浓度、用5%葡萄糖注射液或0.9%氯化钠注射液配伍、在高或低输注速度输注时，无论是经过普通输液器还是精密输液器得到的液体经测定，与标准指纹图谱比较相似度均在0.95以上，可以认为舒血宁注射液通过两种输液器后的主要成分含有量没有显著性差异。

3.3 单因素考察舒血宁注射液在不同质量浓度、不同溶媒、不同输注速度、不同输液器配置条件下药物输注后的pH没有显著性变化，与文献报道一致［11］。

3.4 将不溶性微粒考察数据通过SPSS统计软件分析得出，各种实验方案下经普通输液器和精密输液器输注后得到的液体中不溶性微粒个数都符合药典规定，且相互间没有显著性差异(P＞0.05)，可以说在本实验中普通输液器和精密输液器在降低不溶性微粒个数上没有显著性差异。但是比较舒血宁注射液与溶媒配伍后0.5 h，不通过输液器的溶液(以下称输液前)的不溶性微粒发现，A、B、C 3种方案中舒血宁注射液与5%葡萄糖注射液配伍后输液前≥25 μm微粒个数超出药典标准，只有D方案中舒血宁注射液与0.9%氯化钠配伍后输液前和输液后的不溶性微粒个数都是符合药典标准的，而且输液前的不溶性微粒与两种输液器输注后的不溶性微粒个数是有显著性差异的(P＜0.05)，说明舒血宁注射液在配伍后不溶性微粒都有增大的趋势，与文献报道相符［12］。但是通过输液器中的过滤介质都会显著截留不溶性微粒，有效的降低不溶性微粒的个数，保证药液进入人体静脉的安全性；另外舒血宁注射液与0.9%氯化钠配伍后不溶性微粒个数增加幅度不大，符合药典标准，建议生产厂家在说明书中增加0.9%氯化钠的配伍选择。

3.5 本实验结果显示，舒血宁注射液通过精密输液器后质量浓度、pH没有显著性改变，与普通输液器相比也没有显著性差异，临床使用精密输液器不会因为输液器的过滤作用而影响舒血宁注射液的质量浓度，从而影响疗效。

3.6 临床评价精密输液器在控制输液不良反应上有显著性优势［2］，从临床的角度证明使用精密输液器输注中药注射剂是更为安全可行的方法。但是，精密输液器通过什么方式降低了不良反应的发生，文献报道［2］用精密输液器过滤了不溶性微粒，降低了过敏原。从本实验结果看精密输液器与普通输液器均能有效地降低配伍后的舒血宁注射液的不溶性微粒，但是精密输液器5.0 μm的过滤介质与普通输液器8.0～10.0 μm的过滤介质相比没有截留更多的不溶性微粒，没有显著降低微粒个数，本实验结果显示对于舒血宁注射液的输注使用精密输液器并没有显著优于普通输液器。兼顾药物经济学因素，临床输注舒血宁注射液不一定必须选择精密过滤输液器。

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