蜂王浆蛋白和脂类降血脂功能的研究

杨文超，吴安杏，吴珍红，缪晓青

(福建农林大学蜂学学院，蜂产品加工与应用教育部工程研究中心，福建福州 350002)

蜂王浆蛋白和脂类降血脂功能的研究

杨文超，吴安杏，吴珍红，缪晓青*

(福建农林大学蜂学学院，蜂产品加工与应用教育部工程研究中心，福建福州 350002)

为研究蜂王浆中的蛋白和脂类的降血脂功能，建立高血脂症大鼠模型，以大鼠血清中TC、TG和HDL－C水平，动脉粥样硬化指数(AI)以及体重，肝重、脾重与体重比作为评价指标，考察蜂王浆蛋白和脂类的降血脂作用。结果表明，蜂王浆蛋白能显著降低高血脂症大鼠血清中TC、TG水平，提高血清HDL－C水平，抑制AI值的上升，减少体重、肝脏和脾脏重量的增加，且与鲜蜂王浆效果接近;但是脂类没有降血脂功能。因此，蜂王浆的降血脂功效成分主要是蜂王浆蛋白。

蜂王浆蛋白，降血脂功能，高血脂症

蜂王浆又名蜂皇浆、王浆、蜂乳，是工蜂舌腺和上颚腺所分泌的浆状物［1］。蛋白质是蜂王浆的主要组成部分，占蜂王浆干重的50%［2］。其中的单一蛋白组分，如MRJP3、Jelleine－I－IV、Royalisin、MRJP1、57ku蛋白、Apisimin等已被分离、表达，并开展了相应的功能研究［3］。蜂王浆中的脂类有饱和、不饱和直链脂肪酸，饱和、不饱和支链二羧酸，大约有80%～90%是含C8和C10的短链脂肪酸，其中王浆酸含量占总脂肪酸21%以上。研究表明，王浆酸具有抗菌消炎、增强免疫、抗癌、防辐射等重要的生理活性，是评价蜂王浆质量重要的指标之一［4］。蜂王浆是一种天然的营养保健食品，富含多种生物活性成分，诸多研究表明其具有抗氧化、降血脂、抗菌、调节心脑血管系统、免疫调节等多种营养保健功效［5－8］。据报道，新鲜王浆经180目滤网过滤的滤渣、经0.5μm陶瓷膜过滤的滤渣和再经0.1μm陶瓷膜陶过滤的滤渣均能显著降低大鼠血清TC含量［9］。但是蜂王浆降血脂的功能成分尚不明确。本研究旨在通过对比鲜蜂王浆、蜂王浆蛋白以及蜂王浆中的脂类对高血脂大鼠血脂的影响，分析蜂王浆蛋白和脂类的降血脂作用，为确定蜂王浆降血脂的活性成分提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料与设备

蜂王浆(蜜粉源植物:油菜) 福建省神蜂科技开发有限公司提供;清洁级SD大鼠 雄性，体重(230±20)g;大鼠基础饲料、大鼠高脂饲料 福建医科大学吴氏实验动物中心;石油醚、硫酸铵、甲醇、无水乙醚 分析纯。

透析袋 北京经科宏达生物技术有限公司; LGJ－25C型冷冻干燥机 北京四环科学仪器厂有限公司;GL－16－II型高速冷冻离心机 上海安亭科学仪器厂;WFJ 7200型可见分光光度计 上海尤尼柯仪器有限公司;测试试剂盒 浙江东瓯诊断产品有限公司。

1.2 实验方法

1.2.1 蜂王浆中蛋白的提取 蜂王浆蛋白的提取采用硫酸铵沉淀法［10］。新鲜蜂王浆→蒸馏水溶解→离心(2000r/min、10min)→取上清液→加入硫酸铵固体至过饱和(4℃条件下)→静置过夜(4℃)→冷冻离心(4℃、10000r/min、30min)→弃上清→蒸馏水透析(截留分子量14000透析袋、4℃、48h，分别隔4、8、12h换水三次)→冻干→蜂王浆蛋白冻干粉。

表1 实验设计方案Table 1 The protocol of experiment

表2 不同成分对大鼠血清中TC和TG水平的影响Table 2 The effect of compositions on TC and TG of serum of rats

1.2.2 蜂王浆中脂类的提取 新鲜蜂王浆冻干后，研磨粉碎，过40目筛，制得蜂王浆冻干粉。取冻干粉100g，用甲醇－石油醚(1∶3，V/V)混合溶剂400mL在室温条件下振荡提取24h，过滤。重复三次后合并滤液，经减压除去溶剂后得到蜂王浆中的脂类物质。

1.2.3 高血脂动物模型的建立 雄性Wistar大鼠适应饲养1周后，正常对照组饲喂大鼠基础饲料，实验组饲喂高脂饲料。饲喂4周后，禁食12h，称量每只大鼠的体重，用熔点毛细管从眼眶静脉采血，3000r/min下离心15min得到血清。

用试剂盒法测定血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL－C)水平。对比正常组大鼠与高脂大鼠的体重和血清TC、TG、HDL－C水平，以确定高血脂动物模型是否建立成功。

1.2.4 动物实验分组和设计 将建模成功后的大鼠随机分为9组，每组10只，分组及处理情况详见表1。

采血后立即处死大鼠，解剖并摘取肝脏和脾脏，用生理盐水冲洗，用滤纸吸干水分后称重。

1.2.5 动脉粥样硬化指数计算 血液样本在3000r/min下离心15min，测定所得血清中TC、TG和HDL－C水平。动脉粥样硬化指数(AI)通过以下公式计算出:

2 结果和分析

2.1 不同成分对大鼠血清中TC和TG的影响

测试各处理组实验动物的血清TC和TG水平，利用SPSS13.0软件对组间数据的差异性进行t检验，结果见表2。

由表2可见，与正常对照组相比，模型对照组血清TC水平显著升高(p＜0.01)，蜂王浆脂类各组也显著升高(p＜0.01)，而蜂王浆组和RJPM组、RJPH组无显著差异。与模型对照组相比，蜂王浆组血清TC下降了15.8%(p＜0.05)，RJPM组、RJPH组分别下降了12.4%(p＜0.05)、14.0%(p＜0.05)，其他各组则无显著差异。与蜂王浆组相比，蜂王浆蛋白中、高剂量组均无显著差异;而蜂王浆脂类各组中RJLL组和RJLM组显著升高(p＜0.05)，而RJLH组与蜂王浆组相比则无显著差异。

与正常对照组相比，模型对照组、RJPL组和蜂王浆脂类各剂量组血清 TG水平均显著升高(p＜0.05)，蜂王浆组和RJPM组、RJPH组则差异不显著。与模型对照组相比，蜂王浆组血清TG水平下降明显，下降了13.3%(p＜0.05);除此之外，RJPH组血清TG水平亦显著下降，下降了16.3%(p＜0.05);蜂王浆脂类各组无显著差异。而蜂王浆蛋白各组与蜂王浆组相比，只有RJPL组存在差异(p＜0.05)，RJPM组和RJPH组则差异不显著。

2.2 不同成分对大鼠血清HDL-C和AI的影响

从表3数据分析可以看出，与正常组相比，RJPL组血清HDL－C水平显著降低(p＜0.05)，模型对照组、蜂王浆脂类各剂量组血清HDL－C水平也显著下降(p＜0.01)，其余差异不显著。与模型对照组相比，蜂王浆组血清HDL－C水平有了明显的上升，上升了17.4%(p＜0.05);此外，RJPM组和RJPH组也显著升高，分别上升了15.9%(p＜0.05)和20.3%(p＜0.05);其余则没有显著差异。与蜂王浆组相比，蜂王浆脂质降低了血清中HDL－C水平，低剂量组血清HDL－C水平差异显著(p＜0.05)，其高、中剂量组差异极显著(p＜0.01)，蜂王浆蛋白各组血清HDL－C水平无显著差异。

表3 不同成分对大鼠血清HDL－C和AI指数的影响Table 3 The effect of compositions on HDL－C and AI of serum of rats

表4 不同组分对大鼠体重、肝脏和脾脏的影响Table 4 The effect of compositions on weight，liver and spleen of rats

与正常组相比，各组AI值均显著升高，其中除蜂王浆组显著水平为p＜0.05外，其他组显著水平都为p＜0.01。而与模型对照组相比，蜂王浆组、RJPM组和RJPH组AI值均显著降低(p＜0.01)，分别下降了47.2%、42.9%和39.7%;蜂王浆脂类各组则差异不显著。与蜂王浆组相比，蜂王浆蛋白各剂量组AI值差异都不显著;蜂王浆脂类各剂量组AI值都显著升高(p＜0.01)。

2.3 不同组分对大鼠体重、肝脏和脾脏的影响

经4周灌胃处理后，与正常对照组相比，模型对照组体重增加明显(p＜0.05)，而其余各组体重没有显著差异。与模型对照组相比，蜂王浆组和RJPH组体重分别减少了 8.7%(p＜0.01)和10.0%(p＜0.05);其余各组则无显著差异。与蜂王浆组相比，各组大鼠体重除模型对照组外均无显著差异。

与正常组相比，模型对照组肝体比和脾体比均显著升高(p＜0.01)，RJPL组和RJPM组肝体比上升明显(p＜0.05)，蜂王浆脂类各组也显著升高(p＜0.01);蜂王浆蛋白各组脾体比均无显著差异，而蜂王浆脂类各组脾体比显著上升(p＜0.01)。与模型对照组相比，蜂王浆组肝体比和脾体比均下降明显(p＜0.05)，分别下降了10.7%和11.3%;RJPM组脾体比下降10.7%(p＜0.05)，RJPH组肝体比和脾体比分别下降了8.2%(p＜0.05)和12.5%(p＜0.05)，而蜂王浆脂类各组肝体比和脾体比均无显著差异。与蜂王浆组相比，RJPL组和RJPM组肝体比差异显著(p＜0.05)，RJPH组差异不显著。蜂王浆蛋白各组与蜂王浆组脾体比均没有显著差异。

3 结论

研究表明蜂王浆蛋白类成分能明显降低血清TC、TG水平和AI值，且适当剂量的蜂王浆蛋白可达到与蜂王浆相近的效果，具有较强的降血脂功能。蜂王浆中的脂类物质在实验中则未显示出降血脂的效果，对高脂饮食引起的各项指标的异常没有明显的改善效果。

但蜂王浆中蛋白种类很多，具体是哪种蛋白具有该功能，以及其降血脂功能的机理还有待于进一步研究。

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The antilipemic function of royal jelly proteins and lipids

YANG Wen－chao，WU An－xing，WU Zhen－hong，MIAO Xiao－qing*
(College of Bee Science，Fujian Agriculture and Forestry University，Bee Products Processing and Application Engineering Research Center of the Ministry of Education，Fuzhou 350002，China)

Aim to research the antilipemic function of protein and lipids of royal jelly(RJ).Its indexes were TC，TG and HDL－C in serum，atherosclerosis index(AI)as well as body weight，the ratio of liver and spleen to body of hyperlipidemia models rat.The results showed that royal jelly proteins could significantly reduce the level of TC，TG and the elevation of AI，body weight and the ratio of liver and spleen to body，and increase the level of HDL－C of hyperlipidemia rat.And there were no significant difference between the functions of RJ and RJ proteins.But lipids of RJ had no hypolipidemic function.The results showed the main component on antilipemic function was protein of RJ.

protein of royal jelly;antilipemic function;hyperlipidemia

TS218

A

1002－0306(2012)21－0345－04

2012－04－20 *通讯联系人

杨文超(1980－)，男，讲师，博士，研究方向:蜂产品加工与应用。

国家现代农业(蜂)产业技术体系项目(CARS－45－KXJ19)。