高效液相色谱法测定健心片中原儿茶醛的含量

天津渤海职业技术学院（300408）杨静

天津市南开医院（300100）乔晓莉Δ

健心片主要由丹参、麦冬、党参、黄芪等组成，具有活血化瘀，扶正固本的功效，适用于冠心病、心肌梗塞等心脏疾病。为了有效控制该制剂质量，采用RPHPLC法，测定方中君药丹参的主要成分原儿茶醛的含量，建立了可靠准确、专属性强的质量控制方法。

1 仪器与材料

LC-10A型高效液相色谱仪，岛津SPD-10A紫外检测器， AUTO SCIENCE A T-3 3 0 柱温箱，A G T C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）；KQ3200超声波清洗器（昆山市超声波仪器厂）；甲醇（色谱纯，天津大学科威公司），冰醋酸（分析纯，天津大学科威公司），水为娃哈哈饮用纯净水。原儿茶醛对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110810-200506）；健心片为天津市南开医院院用制剂（批号：20110607，20110609，20110720）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱：AGT C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）；流动相∶甲醇-0.1%醋酸（12∶88）；检测波长：278nm；流速：1.0mL／min；柱温：35℃； 理论板数按原儿茶醛峰计算不低于3000。

2.2 样品的制备

2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取原儿茶醛对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.02304mg的对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液的制备 取本品适量，研细，取2g，精密称定，置于有塞锥形瓶中，精密加入含0.5%盐酸的50%甲醇50ml，称定重量，超声处理60min，放冷，再称定重量，用含0.5%盐酸的50%甲醇50ml补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.3 阴性样品溶液的制备 按处方去除丹参的各味药材，煎煮，制成阴性样品，按“2.2.2”项下方法，制得阴性样品溶液，描记色谱图。

2.3 标准曲线的制备 精密吸取一定量对照品溶液，用甲醇稀释并定容，得到浓度为0.0384，0.1152，0.2304，0.3072，0.3840mg/mL的对照品溶液的系列溶液。将上述溶液按2.1项下色谱条件进行测定，以原儿茶醛峰面积值(Y)对其相应浓度(X)做线性回归，得到原儿茶醛的回归方程：Y=2.32×105X+5.07×101，r＝0.9991，表明原儿茶醛在0.0384～0.3840μg/mL范围内线性关系良好。

2.4 精密度试验 取同一浓度原儿茶醛对照品溶液(0.2304mg/mL)，按2.1项下色谱条件连续进样5次，测定峰面积值，其相对标准偏差RSD为1.96%。

2.5 重复性试验 取同一批样品（20110607），精密称取5份，按2.2.2项下方法制备供试品溶液，按2.1项下色谱条件进行测定，其相对标准偏差RSD为1.97%，表明本法重复性良好。

2.6 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别于0、3、9、14、17h按2.1项下色谱条件进行测定，其相对标准偏差RSD为1.87%，表明样品在17h内稳定性良好。

附表1 回收率试验

附表2 样品含量测定 (n=3)

2.7 回收率试验 取 同 一 批 号 样 品（20110607），研细，取1g，共6份，精密称定，置有塞锥形瓶中，分别加入含原儿茶醛0.0024mg/ml的标准品溶液50ml（此标准品溶液以含0.5%盐酸的50%甲醇作为溶剂），称定重量，超声处理60min，放冷，再称定重量，用含0.5%盐酸的50%甲醇50ml补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，制得供回收率用供试品溶液，按2.1项下色谱条件进行测定，计算回收率，见附表1。

2.8 样品测定 按上述方法，测定3批健心片中原儿茶醛的含量并随行对照品，结果见附表2。

3 讨论

供试品制备过程中，对盐酸的浓度、提取方法和提取时间三个因素，在二个水平下，采用L4（23）正交试验进行了优化。试验结果表明，采用含0.5%盐酸的50%甲醇溶液，超声处理60min后，得到的原儿茶醛的含量最高，因此，选用含0.5%盐酸的50%甲醇溶液，超声处理60min，作为实验条件。

本实验根据文献的报道[1][2[3]，对流动相进行了选择，最终确定流动相为甲醇-0.1%醋酸（12∶88）时，峰形良好，同时可达到完全分离且保留时间较短。实验结果证明，该方法重复性好，操作简便，可用于健心片中原儿茶醛的含量测定，为该制剂质量标准的制定提供了参考依据。