燧心胶囊对慢性心力衰竭大鼠心功能及脑钠肽的影响

张鸿婷 王先滨 季旭明 王 斌 耿自上

1.黑龙江中医药大学附属第二医院心内一病房，黑龙江哈尔滨 150001；2.黑龙江中医药大学附属第一医院，黑龙江哈尔滨 150001；3.山东中医药大学，山东济南 250355；4.黑龙江中医药大学，黑龙江哈尔滨 150001

慢性心力衰竭（CHF）是多种心脏疾病的终末阶段，随着人口老龄化，慢性心衰发病率逐年增高[1]。近年来，中医学在CHF的防治上作了大量的工作，中医治疗CHF既重视纠正患者血流动力学状态、改善心功能，又强调其对神经内分泌的生物学作用，而中药制剂的多靶点、多效应的特点又是其优势所在。燧心胶囊是治疗CHF的中药制剂，临床观察显示其对患者中医证候、心功能分级有显著改善，且能提高左室射血分数与心脏指数[2]。为揭示其作用机制，本研究以腹主动脉缩窄术致CHF大鼠为研究对象，观察燧心胶囊对CHF大鼠血流动力学的作用，并从神经内分泌的角度分析其可能的作用机制。

1 试药与方法

1.1 实验动物

健康、SPF级SD大鼠，共42只，体质量240～260 g，雄性。实验动物由黑龙江中医药大学实验动物中心提供，生产许可证号：SCXK（黑）2008004。实验动物SPF环境条件饲养。

1.2 主要试剂与仪器

1.2.1 燧心胶囊 由制附子、红参、丹参、茯苓、泽泻组成，黑龙江中医药大学附属二院制剂室制备。

1.2.2 酶联免疫吸附法试剂盒 酶联免疫吸附法（ELISA）试剂盒由美国ADL公司提供。

1.2.3 MedLab生物信号采集处理系统 型号：4CS，由南京美易科技公司提供。

1.2.4 酶标仪 型号Stat-Fax-2100，由广州倍肯公司提供。

1.3 实验动物模型制作及分组

1.3.1 CHF大鼠模型复制 参照文献[3]方法实施腹主动脉缩窄术。

1.3.2 分组及给药方法 将上述大鼠随机分为6组，造模成功后每日1次灌胃治疗，连续12周。①假手术组实施开腹手术但是腹主动脉处不结扎缩窄，造模成功后以等量蒸馏水灌胃，n=8；②模型对照组以等量蒸馏水灌胃，n=7；③地高辛组给予地高辛（上海医药集团有限公司信谊制药总厂生产，批准文号：国药准字 H31020678，规格：0.25 mg）1.0 mL/100 g（0.04 mg/kg）体重灌胃，n=6；④卡托普利组给予卡托普利（中美上海施贵宝制药有限分司生产，批准文号：国药准字H31022986，规格：12.5 毫克×20 片）1.0 mL/100 g（6.25 mg/kg）体重灌胃，n=7；⑤中药低剂量组给予燧心胶囊1.0 mL/100 g（20 g/kg）体重灌胃，n=7；⑥中药高剂量组给予燧心胶囊1.0 mL/100 g（40 g/kg）体重灌胃，n=7。

1.4 标本采集及指标检测

1.4.1 血流动力学指标检测 将大鼠以10%水合氯醛0.3 mL/100 g腹腔注射麻醉，固定在自制手术台上，分离右侧颈总动脉，由颈总动脉插管，连接Medlab 6系统，记录心率（HR）、左室收缩压（LVSP）、左室舒张末压（LVEDP）、左室压力最大变化速率（±dp/dtmax）。

1.4.2 BNP检测 以脊椎脱臼法处死动物，称重并记录，碘伏消毒胸部，迅速打开胸腔，直视下大鼠心脏采血1.5～2.0 mL，室温下静置2 h后，3 000 r/min离心10 min，留取血清，严格按照ELISA试剂盒说明操作。

1.5 统计学方法

采用统计软件SPSS 17.0对实验数据进行分析，计量资料数据以均数±标准差（±s）表示，采用方差分析，两两比较采用LSD-t检验。计数资料以率表示，采用秩和检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般情况统计

大鼠行腹主动脉缩窄术后，常规喂养5周，开始出现明显心力衰竭症状，如呼吸频率增加、幅度增加、活动明显减少、食减少、毛发干枯无光泽、爪背发绀、尿少水肿等，与假手术组经秩和检验比较，差异有高度统计学意义（U=4.5，P＜0.01）。 见表1。

表1 术后第5周大鼠心力衰竭症状比较（只）

2.2 燧心胶囊对CHF大鼠血流动力学的影响

2.2.1 各组大鼠左室收缩功能的比较 图1表明，与假手术组比较，模型对照组大鼠LVSP显著降低、+dp/dtmax明显减慢，差异有高度统计学意义（P＜0.01）。与模型对照组比较，地高辛组、卡托普利组、中药低剂量组、中药高剂量组大鼠LVSP和+dp/dtmax均有不同程度升高，差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。中药高剂量、卡托普利与地高辛三组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。中药低、高剂量两组比较，高剂量组升高+dp/dtmax明显，两者差异有统计学意义（P＜0.05）。见图1。

图1 各组大鼠左室收缩功能比较

2.2.2 各组大鼠左室舒张功能的比较 图2表明，与假手术组比较，模型对照组大鼠LVEDP显著升高，而-dp/dtmax则明显减慢，差异有高度统计学意义（P＜0.01）；与模型对照组比较，地高辛组和中药低剂量组LVEDP均有下降，差异有统计学意义（P＜0.05），而-dp/dtmax变化不明显；卡托普利组和中药高剂量组LVEDP下降极显著（P＜0.01），-dp/dtmax升高显著（P ＜ 0.05）。 见图2。

图2 各组大鼠左室舒张功能比较

2.3 燧心胶囊对CHF大鼠脑钠肽的影响

图3 显示，与假手术组比较，模型对照组大鼠血清内BNP浓度明显增高，差异有高度统计学意义（P＜0.01）。与模型对照组比较，地高辛组、卡托普利组、中药低剂量组、中药高剂量组大鼠血清BNP浓度均降低，差异有高度统计学意义（P＜0.01）。与中药低剂量组比较，卡托普利组与中药高剂量组BNP下降更明显，差异有统计学意义（P＜0.05）。见图3。

图3 各组大鼠血清脑钠肽浓度的比较

3 讨论

根据临床特点，CHF当属中医 “心悸”、“喘证”、“水肿”、“胸痹”等病证范畴，由于心力衰竭患者多为年老体弱之人，病情复杂，虚实夹杂，缠绵难愈，其病机可归纳为：心肾阳虚为本，瘀血、痰浊、水停为标。燧心胶囊组方即针对此病机而设，方中以制附子为君，补火助阳；臣以红参，益气复脉，两者配伍，补益心衰之心肾阳虚；丹参活血养血，化瘀通络，祛除血瘀之病理产物，且调畅气机，助痰浊、水饮进一步消退；茯苓、泽泻为佐使，利水消肿，使小便得利，肿消水散。诸药配伍，以扶正为主，消补兼施，共达温阳益气、活血利水之功效。

本实验表明燧心胶囊对心室收缩和舒张功能均有良性调节作用，呈剂量依赖关系。它通过降低LVEDP、升高-dp/dtmax，使得肺毛细血管楔压下降，肺动脉压力下降，肺循环阻力降低，肺水肿缓解，从而减轻心脏后负荷；同时加强LVSP、提高+dp/dtmax，而使心室排血量增加以减轻心脏前负荷。心脏负荷减轻则心功能得以纠正，呼吸困难、活动耐量下降、尿少水肿等症状则逐渐消除。

BNP是心肌组织中具有扩血管功能的血管活性物质之一，具有扩张血管、利尿排钠、拮抗神经内分泌、抗心室重塑等作用。心室壁压力增大、心室容量增加是BNP释放的主要刺激因素。本实验心力衰竭模型对照组大鼠血中BNP浓度显著增高，与文献报道相符[4-8]。燧心胶囊治疗后，各组心力衰竭大鼠BNP浓度显著下降。说明由于心力衰竭大鼠的血流动力学得到纠正，左心室收缩压、左心室舒张末期压均有不同程度的改善，心室容积及室壁压力降低，刺激BNP分泌减少。

由此可推断，燧心胶囊通过改善CHF大鼠血流动力学状态，而使BNP分泌减少，BNP浓度的下降代表了心功能得到纠正，心脏由失代偿状态向代偿状态转化，其疗效呈剂量依赖关系，这为进一步研究燧心胶囊干预心室重塑的机制奠定了理论基础。

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