贵州不同产地南板蓝根中腺苷的含量研究

杨 丹 张丽艳 罗 君 杨玉琴 李 健

1.贵阳中医学院实验中心，贵州 贵阳 550002;2.贵阳中医学院第一附属医院，贵州 贵阳 550002

南板蓝根为爵床科Acanthaceae马蓝属植物马蓝Baphicacan thus cusia(Nees)Bremek.的干燥根茎及根［1]。收载于2010版《中国药典》，南板蓝根主产于两广地区、贵州及云南等地［2]。南板蓝根为黔产道地药材，其性寒、味苦，归心、胃经，具有清热解毒、凉血的功效，用于温病发斑、丹毒、流感、流脑等疾病。目前《中国药典》仅采用性状和理化鉴别对南板蓝根进行质量控制。南板蓝根中的核苷类成分通过参与并干扰细菌和病毒的基因表达过程，从而起到一定的抗病毒作用［3]。因此，对南板蓝根中腺苷 (A-denosine)的含量进行研究就显得尤为重要。目前，尚未见采用HPLC法对其进行含量测定的报道。故本文对贵州不同产地的南板蓝根，进行了腺苷的含量测定，并进行了质量评价与对比研究。进一步阐明南板蓝根的最佳产区与道地性，将有利于南板蓝根药材的标准化种植与质量控制。

1 仪器与试药

岛津LC-20AT高效液相色谱仪 (日本)，超声波清洗器为天津恒奥科技公司，型号：HS10260D。甲醇为色谱纯(天津市科密欧化化学试剂有限公司)，水为纯净水，其他试剂均为分析纯。腺苷对照品 (批号：879-200001)，购于中国药品生物制品检定所。

南板蓝根药材均自采集，经贵阳中医学院魏升华副教授鉴定为爵床科植物马蓝Baphicacant huscusia(Nees)Bremek的干燥根茎及根。

2 方法与结果

2.1 色谱条件［4]色谱柱为Agilent ZORBAX EclipseXDBC18(250mm×4.6mm，5μm);流动相甲醇-水 (8：92);流速1mL·min-1;柱温30℃;检测波长260nm;进样体积10μL。色谱图见图1。

2.2 对照品溶液的制备 精密称取腺苷对照品适量，置25mL量瓶中，用10%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得每1mL含0.2892mg的溶液，精密吸取1.0mL置50mL量瓶中，用10%甲醇定容至刻度，即得每1mL含腺苷0.005784mg的溶液。

2.3 供试品溶液的制备 取南板蓝根粉末 (过80目筛)0.5g，精密称定，置25mL容量瓶中，精密加入30%甲醇20mL，超声提取30分钟，取出，放冷，用30%甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液15mL，置蒸发皿中，挥去溶剂，用30%甲醇定容至2 mL容量瓶中，滤过，即得。

2.4 供试品溶液提取方法的考察

2.4.1 提取溶剂的选择 取同一批次南板蓝根粉末0.5g，精密称定，置25mL容量瓶中，精密加入30%甲醇、60%甲醇、甲醇、30%乙醇、60%乙醇、无水乙醇25mL，称定重量，超声提取10分钟，取出，放冷，用溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液15mL，置蒸发皿中，挥去溶剂，用30%甲醇定容至2 mL容量瓶中，滤过，即得。结果见表1。

表1 不同溶剂对南板蓝根中腺苷提取效率的影响 (n=2)

2.4.2 提取方式及时间的考察 分别精密称取相同批次的南板蓝根药材粉末0.5 g，分别精密加入30%甲醇25mL，称定重量，分别超声提取10，20，30 min，或于水浴上热回流1，2，3 h，提取结束后，加30%甲醇补足重量，滤过，精密量取续滤液15mL，置蒸发皿中，挥去溶剂，用30%甲醇定容至2 mL容量瓶中，滤过，即得。腺苷的提取量随超声提取时间增加而增多，但回流提取3 h却明显低于回流2 h，超声提取腺苷的效率明显高于回流提取法。见表2。

表2 加热回流和超声提取对板蓝根中腺苷提取效率的影响

2.5 含量测定 取黔产不同产地、不同采收期、取7月份药材不同初加工方法及不同药用部位的南板蓝根药材粉末，按2.3项下方法制备供试品溶液，进行色谱分析，记录腺苷的峰面积，计算含量，结果见表2，表3。

表3 南板蓝根不同产地腺苷的测定结果 (n=3)

3 讨论

3.1 本研究测定了9批黔产不同产地南板蓝根药材中腺苷的含量。由表2可知，4号和5号台江产的南板蓝根药材中腺苷的含量最高，其余产地的南板蓝根的含量均较低，说明腺苷的含量的高低与地域有一定的关系。关岭产地的2个批次的药材腺苷的含量，1号海拔高于2号，说明南板蓝根的质量除地域因素以外，还与其他因素 (海拔、湿度等)密切相关。

3.2 提取溶剂及方法的选择 通过查阅文献［5]，对不同比例的溶剂以及提取方法进行了考察，结果发现水溶性的腺苷在30%甲醇提取的条件下含量最高。而且超声提取含量高于回流，故选择超声，即节约了时间也简化了提取工艺。方法学考察另见文。

3.3 南板蓝根属于常用中药，用量较大，其中4号台江产的南板蓝根在9批当中含量最高，现在南板蓝根主要为栽培品，由于野生品不多。因此，我们应对其栽培情况做进一步的研究与调查，确定其种源与栽培条件，建立其种植基地，确保质量的稳定可控。

3.4 在全省各地南板蓝根种质资源调查过程中，发现各地的农民只把南板蓝根当作染料进行栽种，不知道南板蓝根是药材。因此，为了加强其推广应用，应增加各地农民对南板蓝根的药用认识，帮助农民增收致富。

［1]国家药典委员会.中华人民共和国药典［S].一部，北京：化学工业出版社，2010.

［2]苗明三，李振国.现代实用中药质量控制技术［M].北京：人民卫生出版社，2000：882.

［3]窦希波，于晓蕾，王颖.RP—HPLC法测定板蓝根中腺苷的含量［J].齐鲁药事，2004，23(7)：28.

［4]谭丽萍，谭小勇.HPLC测定海麻雀中腺苷的含量［J].中国实验方剂学杂志，2011，17(5)：107-109.