CD44v6和ICAM-1在胃癌组织中的表达及意义

邵建富 王敬瑄 郑宝军 冯俊伟

胃癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，在我国胃癌多年来一直是死亡率最高的恶性肿瘤。浸润转移是肿瘤的最重要恶性特征之一，是胃癌治疗失败导致死亡的主要原因。本课题应用免疫组化技术检测正常胃组织、良性病变组织和胃癌组织中粘附分子CD44v6和ICAM-1的表达水平，并观察它们与临床病理特征尤其是淋巴结转移的关系，旨在探讨各指标在胃癌发生、发展、转移中的作用，为胃癌的治疗提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 标本 取自2008年6月至2011年6月河北省唐山市人民医院普外科及河北省唐山工人医院肿瘤外科手术标本及胃镜活检标本共138例，其中胃癌组织78例，胃良性病变组织30例，正常胃组织30例。有淋巴结转移组45例，无淋巴结转移组33例，术前均未进行化疗或放疗，临床资料完整。

1.2 方法 将标本经10%甲醛固定，常规石蜡包埋切片。采用免疫组化S-P法，鼠抗人CD44v6、ICAM-1单克隆抗体、SP人组织检测试剂盒均购自福州迈新生物技术开发有限公司，以PBS代替一抗作阴性对照。

1.3 诊断标准 切片中阳性表现为细胞膜和胞浆中出现棕黄色颗粒。按阳性细胞数＜5%，5% ～25%，26% ～50%，＞50%分为－、+、++、+++四级。

1.4 统计学分析 应用SPSS 13.0统计软件，计数资料采用χ2检验或Fisher精确检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 正常胃组织、良性病变和胃癌组织中粘附分子CD44v6和ICAM-1的表达 CD44v6蛋白阳性表达位于细胞膜上，在细胞膜周围呈连续的棕黄色线状或带状分布(图1、2)。在正常胃组织及胃良性病变中有少量表达，阳性率分别为3.33%和10.00%，差异无统计学意义(P ＞0.05)。在胃癌组织中CD44v6表达阳性率为78.21%，明显高于正常胃组织及胃良性病变组织(P ＜0.01)。

ICAM-1蛋白的阳性表达位于胞膜或胞浆，表现为胞膜或胞浆内出现弥漫棕黄色颗粒(图3、4)。ICAM-1蛋白在正常胃组织中阳性率为0，在胃良性病变中有极少量表达，阳性率为3.33%，差异无统计学意义(P ＞0.05);在胃癌组织中表达阳性率为65.38%，明显高于正常胃组织及胃良性病变组织(P＜0.01)。见表 1。

表1 不同组织中粘附分子CD44v6和ICAM-1蛋白表达水平比较

图1 正常胃组织中CD44v6阴性表达(SP×200)

图2 胃癌组织中CD44v6强阳性表达(SP×200)

图3 正常胃组织中ICAM-1阴性表达(SP×100)

图4 胃癌组织中ICAM-1强阳性表达(B)(SP×200)

2.2 胃癌组织中粘附分子CD44v6和ICAM-1的表达与临床病理特征的关系 胃癌组织中粘附分子CD44v6蛋白表达阳性率在低分化组为87.72%，明显高于高、中分化组的50.00%和53.33%(P ＜0.05)，在 T3、T4 组为 92.59%和 93.33%，明显高于 T1、T2 组的53.85%和 65.22%(P ＜0.05)，在有淋巴结转移组为82.22%，明显高于无淋巴结转移组的72.73%(P ＜0.05)，在 TNM 分期Ⅲ、Ⅳ组为 88.00%和 94.12%，明显高于Ⅰ、Ⅱ组的57.14%和68.18%(P ＜0.05)。在不同发生部位、大体类型及高和中分化组、T1和T2组、T3和T4组、Ⅰ和Ⅱ组、Ⅲ和Ⅳ组之间差异无统计学意义(P＞0.05)。

胃癌组织中粘附分子ICAM-1蛋白表达阳性率在T3、T4组为 81.48% 和 86.67%，明显高于 T1、T2 组的 30.77% 和52.17%(P ＜0.05)，在有淋巴结转移组为 77.78%，明显高于无淋巴结转移组的48.48%(P ＜0.05)，在TNM分期Ⅲ、Ⅳ组为76.00%和88.24%，明显高于Ⅰ、Ⅱ组的42.86%和50.00%(P＜0.05)。在不同发生部位、大体类型、分化程度及 T1和T2组、T3和T4组、Ⅰ和Ⅱ组、Ⅲ和Ⅳ组之间差异无统计学意义(P ＞0.05)。见表2。

表2 粘附分子CD44v6和ICAM-1蛋白在胃癌组织中的表达水平与临床病理特征的关系 例

2.3 胃癌组织中粘附分子CD44v6和ICAM-1蛋白的表达检测胃癌转移 胃癌组织中粘附分子CD44v6蛋白阳性表达检测胃癌转移的敏感度为82.22%，特异度为27.27%;ICAM-1蛋白高表达检测胃癌转移的敏感度为77.78%，特异度为51.52%;两项并联后检测胃癌转移的敏感度为97.78%，较之测定单项指标明显提高(P ＜0.05)，特异度为15.15%;串联后检测胃癌转移的敏感度为20.00%，特异度提高到90.91%，与测定单项指标相比差异有统计学意义(P＜0.05)。见表3。

表3 胃癌组织中粘附分子CD44v6和ICAM-1蛋白的表达检测胃癌转移情况

3 讨论

CD44v6是含V6变异体的CD44拼接变异体，它通过与透明质酸(HA)结合，影响肿瘤细胞之间以及肿瘤细胞与基质的结合能力，增强肿瘤细胞的运动能力，促进肿瘤细胞的浸润和转移。本研究显示粘附分子CD44v6在正常胃组织和胃良性病变组织中有少量表达，胃癌组织中表达明显增加。证实了CD44v6在介导细胞-细胞间和细胞-基质间的粘附，参与细胞移动、肿瘤生长、浸润转移等过程中的作用，促进了胃癌的发生、发展、侵袭及转移［1］。有研究发现CD44v6的表达与胃癌淋巴结转移显著相关，是判断淋巴结转移和预后评估的重要指标［2－4］。本研究结果显示，粘附分子CD44v6与胃癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期密切相关，探讨其机制可能为胃癌CD44v6蛋白的过度表达一方面介导了瘤细胞与细胞外基质的粘附，另一方面可能激活体细胞内某些信号的传导机制，使瘤细胞分泌蛋白水解酶，加速细胞外基质的降解，有利于癌细胞的播散转移。CD44v6阳性细胞更易与毛细血管后小静脉中的高柱状内皮细胞结合，使肿瘤更易进入淋巴系统及循环系统，同时HA降解产物还能启动血管的发生，这些都使CD44v6阳性肿瘤细胞获得更强的浸润转移能力。CD44v6蛋白强表达意味着胃癌有较恶的生物学行为和病期较晚，患者预后差，对CD44v6蛋白强阳性表达的胃癌应采用更为积极有效的综合治疗措施。

肿瘤细胞逃逸机体免疫系统对其破坏是因为肿瘤细胞下调了靶抗原的活性，ICAM-1就是其中最重要的辅助性分子之一［5］。ICAM-1在肿瘤细胞和附近的基质细胞中表达，凭借其膜外区的淋巴细胞功能相关蛋白-1(LFA-1)结合部位，与LFA-1组成一对配/受体，共同参与免疫、炎症及肿瘤转移等一系列重要生理和病理过程。本研究结果显示，在正常胃组织中无1例表达，在胃良性病变中有极少量表达，在胃癌组织中阳性表达率明显提高。提示ICAM-1高表达可能与胃癌的发生有关。有研究证实ICAM-1的表达与胃癌的生长、转移及TNM分期存在相关性［6］。本研究结果显示，ICAM-1与胃癌的浸润深度、淋巴结转移和TNM分期密切相关。与文献报道的结果一致，提示ICAM-1可能是反映胃癌侵袭转移潜能的一个有效生物学指标。其机制可能为胃癌细胞ICAM-1过度活化可促使过多可溶性ICAM-1进入血液，竞争性抑制了血液循环中ICAM-1依赖的主要组织相容性复合物-1(MHC-1类抗原)对游离癌细胞的免疫识别作用，从而使癌细胞逃避免疫监视，更容易发生侵袭和转移。但具体作用机制尚不十分清楚，进一步研究ICAM-1在胃癌侵袭转移中的作用及机制，将会对胃癌的发生发展有新的认知，从而开辟胃癌诊断治疗的新思路。

本研究结果还显示:胃癌组织中粘附分子CD44v6和ICAM-1并联检测对检测胃癌转移的敏感度为97.78%，较之测定单项指标明显提高;串联检测对检测胃癌转移的特异度提高到90.91%，与测定单项指标相比差异有统计学意义(P＜0.05)。因此综合分析上述两指标，能够更准确的判断胃癌的淋巴结转移状况，可为胃癌的随访、辅助治疗、判断预后等提供有价值的参考资料。

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3 Chen JQ，Zhan WH，He YL，et al.Expression of heparanase gene，CD44v6，MMP-7and nm23 protein and their relationship with the invasion and metastasis of gastric carcinomas.World JGastroenterol，2004，10:776-782.

4 Vizoso FJ，Fernandez JC，Corte MD，etal.Expression and clin ical significance of CD44V5 and CD44v6 in resectable colorectal cancer.JCancer Res Clin Oncol，2004，130:679-686.

5 Mayer B，Lorenz G，Babic R.Expession of leukocyte cell adhesion molecules on gastric carcinomas:possible of LFA 3 expression in the development of distantmetastases.Int JCancer，1995，64:415.

6 倪海滨，黄介飞，毛振彪，等.胃癌患者细胞间粘附分子-1表达意义的研究.交通医学，2003，17:134-135.