贵州省牛羊衣原体感染血清学调查

洪尼宁，颜修刚，皮 泉，华 莹，李基棕

（贵州省动物疫病预防控制中心，贵州贵阳550008）

衣原体目（Chlamydiales）的成员是一类专性细胞内寄生的微生物，可划分为4个科，其中的衣原体科（Chlamydiaceae）包括衣原体属（Chlamy dia）和嗜性衣原体属（Chlamydophila），这2个属又分别包含有3个及6个种［1］。嗜性衣原体引起的衣原体病（Chlamydiosis）是导致动物和人流产的一个主要原因［2－3］。嗜性衣原体多呈混合感染，流产嗜性衣原体（Chlamydophila abortus），以前也称作鹦鹉热衣原体（Chlamy dia psittaci）流产亚型，在牛、羊、马、猪体内很容易检测到［4］，能导致反刍动物和猪孕育后期流产，在极少数情况下孕妇感染也会导致急性病症和流产发生［5］。

我国自20世纪70年代从羊身上分离到衣原体以来，有关衣原体病的报道不在少数。周继章等［6］2007年统计有6个省（市）和11个省（市）分别报道有牛、羊衣原体病的流行，随后宁夏［7］、青海［8－10］等省（区）也有血清学调查报道，这些从一个侧面反映了动物衣原体病的流行情况。为深入了解该病在我省牛、羊群中的流行状况，我们于2010年3月至2011年11月对省内9个市（州）30个规模养殖场及12个乡（镇）散养户的牛、羊进行了衣原体感染血清学调查。

1 材料与方法

1.1 材料

待检血清采自省内42个场（户），按常规方法采血、分离血清后－20℃冷冻备用。衣原体IHA抗原、阴性标准血清、阳性标准血清为中国农业科学院兰州兽医研究所生产（批号为100823）。

1.2 方法

1.2.1 检测方法 按衣原体IHA说明书检测。首先在110°V型有机玻璃板内每孔加稀释液75μL，取待检血清25μL加入第1孔，呈4倍稀释至第4孔，第4孔弃去25μL，每孔加稀释好的抗原25μL，微型振荡器上振荡后置37℃作用2 h，被检血清1∶16稀释孔出现“＋ ＋”以上凝集者判为阳性。

1.2.2 数据分析 χ2检验使用下载软件《卡方检验计算器》的四格表格式，将发生数（阳性数）和未发生数（阴性数）输入相应位置，即可得χ2值及P范围。在计算小样本的P值时，使用“直接概率”功能选项直接计算出P值。

2 结果

随机抽取9个市（州）12县8乡（镇）散养户及存栏数超过50头的15个规模养牛场，采集牛血清838份。IHA检测结果（表1）表明牛血清衣原体抗体总体阳性率为2.86%，牛群阳性率为39.13%（9／23），其中规模养殖场阳性率为46.67%（7／15），散养户阳性率为25.00%（2／8），两者阳性率差异不显著（直接概率计算P＝0.22＞0.05）。奶牛、肉牛及耕牛阳性率差异不显著（P＞0.05）。

随机抽取15县4乡（镇）散养户及存栏数超过200只的15个规模养羊场，共采集羊血清515份。IHA检测结果（表2）表明羊血清衣原体抗体总体阳性率为36.12%，羊群阳性率为89.47%（17／19），其中规模养殖场阳性率为93.33%（14／15），散养户阳性率为75.00%（3／4），规模养殖场和散养户阳性率差异不显著（直接概率计算P＞0.05）。黑山羊与白山羊、本地山羊、简阳大耳羊相比阳性率差异不显著（P＞0.05），黑山羊与黄羊相比阳性率偏高（χ2＝24.78，P＜0.01）。

表1 九市（州）牛血清衣原体抗体检测结果Table1 The results of cattle chlamydial antibody test in nine regions of Guizhou province

表2 八市（州）羊血清衣原体抗体检测结果Table2 The results of goat chlamydial antibody test in eight regions of Guizhou province

3 讨论

本次衣原体感染血清学调查涉及贵州省12个县的牛群、15个县的羊群，样品随机抽取，采样畜群未接种过衣原体疫苗。牛血清抗体阳性率较低（2.86%），羊血清抗体阳性率相对较高（36.12%），这为区别防控这类疫病提供了有价值的信息。

周继章等［11］报道8省（区）部分牛血清衣原体抗体阳性率为23.2%（149／642），邱洪流等［12］报道宁夏牛、羊血清衣原体抗体阳性率分别为9.22%（107／1161）、22.06%（154／698），何存利等［7］调查宁夏规模化奶牛场和羊场牛、羊血清衣原体抗体阳性率分别为28.4%（109／384）和19.3% （113／586）。相比之下，我省这次牛血清衣原体抗体检测阳性率相对较低（P＜0.01），这可能与饲养密度低、本地化程度高、引种把关严等因素有关。羊血清衣原体抗体阳性率与我省龙冲冲等［13］报道阳性率5.7%（11／194）及上述宁夏报道相比差异显著（P＜0.01），就本次调查19群羊而言，个体阳性率≤10%有3群、10%～30%有7群、40%～60%有5群、＞60%有4群，如果羊群选择不同，得出的阳性率是不同的，青海省曾报道阳性率变化范围为8.6%～27.0%［14，8－10］也说明了这一问题。

血清学调查表明我省部分牛、羊群存在不同程度的衣原体感染，深入开展病原学调查，采取综合防控措施显得非常必要。

［1］Everett K D E，Bush R M，Andersen A A.Emended description of the order Chlamydiales，proposal of Parachlamydiaceae fam.nov.and Simkaniaceae fam.nov.，each containing one monotypic genus，revised taxonomy of the family Chlamydiaceae，including a new genus and five new species，and standards for the identification of organisms［J］.Int J Syst Evol Microbiol，1999，49（2）：415－440.

［2］Donn A，Jones G E，Ruiu A，et al.Serological diagnosis of chlamydial abortion in sheep and goats：comparison of the complement fixation test and an enzyme－linked immunosorbent assay employing solubilised proteins as antigen ［J］.Vet Microbiol，1997，59（1）：27－36.

［3］Szeredi L， Bacsadi A. Detection of Chlamydophila（Chlamydia）abortus and Toxoplasma gondii in smears from cases of ovine and caprine abortion by the streptavidin－biotin method［J］.J Comp Pathol，2002，127（4）：257－263.

［4］Pantchev A，Sting R，Bauerfeind R，et al.Detection of all Chlamydophila and Chlamydia spp.of veterinary interest using species－specific real－time PCR assays［J］.Comp Immunol Microbiol Infect Dis，2010，33（6）：473－484.

［5］Thomson N R，Yeats C，Bell K，et al.The Chlamydophila abortus genome sequence reveals an array of variable proteins that contribute to interspecies variation ［J］.Genome Res，2005，15（5）：629–640.

［6］周继章，邱昌庆.我国家畜衣原体病流行状况［J］.中国畜牧兽医，2007，34（07）：110－112.

［7］何存利，史 晓，张皓弘.宁夏鹦鹉热衣原体血清学调查［J］.上海畜牧兽医通讯，2009（5）：25.

［8］铁富萍.绵羊衣原体病的血清学调查［J］.中国畜牧兽医，2010，37（4）：234－235.

［9］李 娟，李德寿.青海省海晏县绵羊衣原体病的血清学调查［J］.中国动物检疫，2011，28（6）：59.

［10］张永兰，李 春.海晏县牛羊衣原体病的血清学调查［J］.黑龙江畜牧兽医，2011（6）：79－80.

［11］周继章，邱昌庆，程淑敏，等.我国部分地区肉用牛群衣原体病的血清学调查［J］.中国兽医科技，2000，30（7）：14－15.

［12］邱洪流，谢 琴.宁夏地区牛、羊衣原体和布病的血清学调查［J］.中国人兽共患病学报，2006，22（10）：1004－1005.

［13］龙冲冲，颜 艾，周碧君，等.贵州省山羊布鲁氏杆菌病衣原体病蓝舌病的血清学调查研究［J］.贵州畜牧兽医，2011，35（1）：1－2.

［14］陈辅君，袁有贞，史元忠，等.青海省德令哈市改良绒山羊衣原体病血清学调查［J］.青海畜牧兽医杂志，2006，36（3）：28.