蛋白芯片法检测结核分枝杆菌IgG抗体的诊断价值

李 影 张东浩

（吉林省结核病医院检验科，吉林 九台 130500）

我国是全球22个结核病高负担国家之一，结核病的患患者数在世界居第2位。现有肺结核患者约451万，其中痰涂片阳性肺结核约150万人（结核病传染源），全国每年新发肺结核患者约145万人，全年死于结核病者达12万余人，相当于各种其他传染病死亡人数总和的2倍[1,2]。因此，结核病的快速诊断依然是亟待解决的问题。目前，结核病诊断的实验室辅助检查方法很多，现就南京大澳生物技术公司所采用的蛋白芯片法检测结核分枝杆菌抗体3项的技术进行分析，评价其临床诊断价值。

1 材料与方法

1.1 标本来源

2011年5月8日至2011年11月5日，本院住院的结核病（包括肺结核、结核性胸膜炎和肺外结核）确诊患者，共计531例，男性279例，女性252例，年龄在12～86岁。其中，肺结核（包括痰菌涂片阳性和痰菌涂片阴性）患者血清259例，结核性胸膜炎患者血清158例，肺外结核（包括骨结核、肾结核、结核性脑膜炎、淋巴结结核等）患者血清114例。

1.2 仪器及试剂

南京大澳生物技术公司的配套仪器及相应试剂盒。

1.3 检测方法

严格依照配套说明书进行操作，结果由仪器自动判读。

2 结 果

2.1 3种抗原的抗体联合测定，任何一种阳性即为结核抗体阳性。531例结核患者血清标本蛋白芯片检测共261例阳性，灵敏度为49.15%。

不同类型的结核病抗体阳性率不同，痰菌涂片阳性的肺结核患者122例，其中阳性95例。痰菌涂片阴性的肺结核患者137例，其中阳性74例。见表1。

表1 不同类型结核患者结核抗体蛋白芯片阳性检测率 例（%）

2.2 结核患者的3种抗体阳性率以抗LAM的阳性率最高，占42.75%（227/531）；其次是抗38KDa抗体，占34.84%（185/531）；最低的为抗16KDa抗体，占21.81%（68/531）。实验表明，结核杆菌蛋白3种抗体均为阳性为6.59（35/531）%，所有阳性结果，以LAM和38KDa同时出现的检出率为最高，占26.55（141/531）。详见表2。

表2 结核杆菌蛋白LAM、16KDa和38KDa抗体的阳性检出率 例(%)

3 讨 论

脂阿拉伯甘露聚糖（LAM） 脂阿拉伯甘露聚糖是一种非蛋白结核分枝杆菌抗原，属特异性抗原，主要存在于结核菌表面，具有较强的免疫原性和抗原性，能够刺激结核菌感染者产生抗体。而其它分枝杆菌由于表面LAM含量低，不能刺激机体产生高水平的抗体量，故抗-LAM的特异性和敏感性都较高，对活动性肺结核，尤其对痰菌涂片阴性肺结核的诊断有较好的价值。

38KDa和16KDa蛋白质抗原 38KDa抗原具有强免疫性。这种抗原在区分结核分枝杆菌感染还是非结核分枝杆菌感染方面具有重要的实际价值，重组38KDa抗原与结核分枝杆菌本身合成的38KDa抗原无免疫性差异，其特异性100%，与正常健康人、非结核分枝杆菌感染和麻风无交叉。38KDa与16KDa联合检测可提高敏感性。结核分枝杆菌抗原多而复杂，在宿主体内表达的数量、种类或时机可能随患者的个体免疫背景和病程而异，表现出不同的抗原抗体谱。检测时有的抗原不表达，未检测出相应的抗体；有的抗体含量高，有的则低。因此，多种抗原联合检测，在保证特异性的基础上有助于提高灵敏度，并可用于结核分枝杆菌的自然感染或卡介苗接种后阳转者的区别。

结核分枝杆菌3种抗原IgG抗体蛋白芯片的检测意义：当LAM、38 KDa任意一指标为阳性结果或单一指标呈阳性时，表示患者体内有活动性结核分枝杆菌抗体存在，结合临床症状后需要进行抗痨治疗。此两项指标可排除卡介苗接种的影响；仅当16KDa为阳性时，表示患者体内有结核分枝杆菌抗体，但不能完全排除卡介苗接种的影响，需要结合其他信息进一步确认；当3项指标均为阳性时，表示患者体内有活动性结核分枝杆菌存在，需要及时的给予抗痨治疗；当3项指标均为阴性时，表示患者未被活动性结核分枝杆菌感染；当患者第1次检查时，某项指标为阳性时，但没有任何临床症状时，需要在一个半月至2个月后复检，如果为阴性，不需要对其治疗，如果仍为阳性，需要进一步查找原因，并给予患者适当的治疗；当患者经过1个疗程治疗2个月后复检时LAM或38KDa仍呈阳性反应，表示治疗效果不佳，需要调整治疗方案并持续治疗。如果呈阴性反应，表示治疗达到效果。特异结核菌抗原LAM、16KDa、38KDa，这些抗原是其他分枝杆菌所不具有的或者含量非常低的，人感染结核菌后会产生针对此3种抗原的特异性抗体。应用蛋白芯片技术可从患者血清中检测到这些特异性抗体，而对患者做出早期诊断。已证实接种卡介苗后，人体基本不会出现针对3种抗原的抗体，因此，即使已经预防接种，对试验结果的干扰也极其微小[3]。

用生物蛋白芯片技术测定患者体液中结核分枝杆菌IgG抗体，敏感性高，特异性好，操作简单、灵活，是一种较理想的结核病的辅助诊断方法。生物蛋白芯片技术检测结核分枝杆菌IgG抗体在临床上主要用于[4]：①用于活动性结核菌感染引起的疾病特异性抗体检测；②非活动性感染及接受过卡介苗接种者；③涂片、培养检测为阴性的人群检测；④肺部其他疾病的鉴别诊断和结核病化疗后的动态观察。

部分病例出现痰菌涂片阳性而蛋白芯片检测阴性，原因如下[5]：首先是早期的患者体内抗体水平较低，还没有达到检测的最低量；其次是有些较重的患者，免疫功能相对较弱，或者用药后抑制了免疫功能，造成了患者体内的抗体水平低下；其他还有方法本身还不够完善、患者有抗原抗体之间的差异等因素所造成。

[1]梅建.结核病流行现状与控制策略[J].上海预防医学杂志,2003,15(3)：103-104.

[2]樊学军,孙敏.结核病实验室诊断技术的比较研究[J].中国国境卫生检验杂志,2005,28(1)：160-162.

[3]王红.蛋白芯片技术检测结核分枝杆菌IgG抗体结果分析[J].实用医技杂志,2006,11(13)：22.

[4]李洪敏,吴雪琼,王巍,等.结核生物蛋白芯片在结核病中的应用[J].中国医师杂志,2005,11(17)：1556-1557.

[5]米琳,刘幸福.蛋白芯片技术检测抗酸柑橘涂片阳性患者结核分枝杆菌多种抗原的IgG抗体的研究[J].山东杂志,2006,11(11)：1047.