香水莲花总提取物对小鼠急性酒精肝损伤的实验研究

姜洪芳，金敬宏，赵伯涛，张卫明*

(1.南京师范大学，江苏南京，210046;2.南京野生植物综合利用研究院，江苏南京，210042)

香水莲花总提取物对小鼠急性酒精肝损伤的实验研究

姜洪芳1，2，金敬宏2，赵伯涛2，张卫明1，2*

(1.南京师范大学，江苏南京，210046;2.南京野生植物综合利用研究院，江苏南京，210042)

目的：观察香水莲花提取物对酒精所致小鼠急性化学损伤的保护作用。方法：雄性昆明种小鼠70只，随机分为正常对照组、急性酒精肝损伤模型组、水飞蓟素阳性对照组(46.7 mg/kg)以及香水莲花低、中、高剂量组(120、180、240 mg/kg)共6组，检测肝组织甘油三酯(TG)、丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量，称量体重和肝脏重量。结果：香水莲花总提取物能够抑制急性酒精肝损伤小鼠肝组织的TG、MDA含量升高(P＜0.05)，增加GSH含量(P＜0.05)。结论：香水莲花总提取物对急性酒精肝损伤有明显的保护作用。

香水莲花;酒精性肝损伤;护肝作用

香水莲花(Nymphaea hybrid)为睡莲科(Nymphaea)水生宿根草本植物，属于大型睡莲类，既是重要的园林观赏花卉，又是生产切花的新兴品种。实验已经证明香水莲花具有降血脂、抗氧化及抑制酪氨酸酶的活性［1－3］，源于香水莲花的各种产品也开始不断开发，有以子房连同雄蕊一起经高温烘焙制成的香水莲花茶，也有以其提取物制成的九品莲花酒，均具有一定的保健作用，但对实验性酒精肝损伤的保护作用如何?为此，本实验建立小鼠酒精性肝损伤模型［4］，观察香水莲花对实验性酒精肝损伤的护肝作用。

1 实验材料

1.1 样品与材料

香水莲花干花(以热风干燥法制备)，经80%乙醇回流提取两次，减压浓缩至干，得率为27%，药渣加水煮沸提取两次，减压浓缩至干，得率为17%，总提取物制备成12 mg/mL、18 mg/mL、24 mg/mL溶液，用于小鼠灌胃。

阳性对照物：水飞蓟素胶囊(利加隆，德国马博士大药厂)，配成4.67 mg/mL溶液，小鼠灌胃用。

基础饲料：按卫生部卫生监督司颁布的《保健食品功能学评价程序和检验方法》中的方法配制。

1.2 试剂与仪器

甘油三酯(TG)试剂盒(批号090408)、丙二醛(MSD)试剂盒(批号090513)、谷胱甘肽(GSH)试剂盒(批号090417)由南京建成生物工程研究所提供。

电子天平(SL－1001型，0.1 g，上海民桥电子仪器厂)、分光光度计(722型，上海第三分析仪器厂)。

1.3 试验动物

昆明雄性SD小鼠，由南京江宁青龙动物繁殖场提供。

2 实验方法

2.1 实验动物分组

将健康成年昆明雄性SD小鼠70只，用基础饲料平衡喂养6d后，筛选出体重为16～22 g的60只进行随机分为6组，每组10只。设急性酒精肝模型组、空白对照组、阳性对照组、香水莲花提取物低剂量组、中剂量组、高剂量组。

2.2 给药方法

从实验开始到结束，急性酒精肝模型组、空白对照组：蒸馏水灌胃，香水莲花提取物低剂量组、中剂量组、高剂量组：分别用浓度为12 mg/mL、18 mg/mL、24 mg/mL总提取物溶液灌胃，阳性对照组：4.67 mg/mL水飞蓟素胶囊内容物灌胃，灌胃体积均为0.1 mL/10 g.bw，每日一次，每组动物单笼饲养，自由摄取饲料。连续灌胃30 d，最后一次用药1 h后造模，样品组及模型组均按0.12 mL/10g体重灌胃50%酒精，空白组用蒸馏水灌胃，各组动物禁食及水16h后，处死，解剖取肝脏用于检测。

2.3 检测方法

称量一定量的肝脏加入预冷的细胞均浆液匀浆后，经普通离心机3 000 r/min离心15 min。取上清液，测定匀浆液中TG、MDA和GSH的含量。

2.4 数据统计处理方法

采用SAS统计软件对数据进行方差分析，用Dunnett＇s T检验进行各试验组与对照组的比较。数据表示方法为均数±标准差(±s)，组间差异比较用单因素方差分析，P＜0.05为有差异，P＜0.01为有显著性差异。

3 结果及分析

给药30 d后灌胃酒精各组小鼠肝脏TG、MDA和GSH值及体重测定值，见表1。

表1 给药后各组动物TG、MDA、GSH值及体重(±s)

表1 给药后各组动物TG、MDA、GSH值及体重(±s)

(与酒精模型组比较，*P＜0.05，＊＊P＜0.01)

指标组别TG(mmol/L)MDA(nmol/mgprot)GSH(mg/gprot) 体重(g) 肝重(g)22.75 ±3.83 1.24 ±0.35 27.74 ±6.08 1.40 ±0.36酒精模型组 n=9 0.23 ±0.05 8.67 ±1.30 0.68 ±0.12 24.6±4.70 1.34 ±0.20香水莲花高剂量组 n=8 0.16±0.04* 7.02 ±2.02* 0.95 ±0.11* 25.33 ±4.32 1.36±0.16香水莲花中剂量组 n=7 0.19 ±0.02 7.23 ±0.75* 0.88 ±0.16* 31.59 ±2.05 1.50 ±0.26香水莲花低剂量组 n=8 0.20 ±0.05 7.67 ±0.86* 0.83 ±0.09* 27.42 ±5.85 1.31 ±0.32阳性对照组 n=8 0.13±0.17＊＊ 2.26±1.60＊＊ 1.18±0.53*正常对照组 n=9 0.09±0.04＊＊ 0.76±0.28＊＊ 0.80±0.23＊＊

由表1可见，小鼠喂食30天后，急性酒精肝损伤模型组肝组织中的TG、MDA、GSH与正常对照组有极显著性差异(P＜0.01)。小鼠喂食香水莲花提取物高剂量组30天后，与酒精模型组比较肝脏中的TG水平有差异(P＜0.05);香水莲花3个剂量组之间的MDA没有差异(P＜0.05)，均与酒精模型组有差异(P＜0.05).香水莲花提取物高、中、低剂量组与酒精模型组比较均有升高GSH的作用(P＜0.05)，三个剂量没有明显差异(P ＜0.05)。

3 讨论

本实验结果显示香水莲花对实验性急性酒精肝损伤有明显的保护作用，肝脏TG、MDA及GSH含量的测定表明，香水莲花总提取物可抑制肝细胞TG、MDA的升高(P＜0.05)，且能增加GSH的含量(P＜0.05)，提示香水莲花对急性酒精肝损伤起到良好的保护作用。其作用机制可能是香水莲花能降低机体内氧自由基的产生，增强体内抗氧化防御能力，以致提高细胞膜稳定性，保护肝细胞膜系统，但确切的作用机制还需进一步的研究，此实验为香水莲花在酒精肝损伤的防治方面提供了一定的实验依据。

［1］ 张卫明，姜洪芳，徐辉，等.香水莲花降血脂作用的实验研究［J］.食品工业科技，2009(2)：111 －112.

［2］ 任红荣，张卫明，姜洪芳，等.香水莲花醇提物抗氧化活性的研究［J］.食品科技，2010(3)：200 －203.

［3］ 徐辉.香水莲花的化学成分及活性功能研究［D］.南京：南京农业大学，2008：6.

［4］ 裴凌鹏，崔箭.番茄红素对小鼠急性酒精肝损伤的实验研究［J］.辽宁中医杂志，2009，36(2)：293 －295.

Study on Protective Effects of Nymphaea hybrid on Acute Alcohol Liver Injury in Mice

Jiang Hongfang1，2，Jin Jinghong2，Zhao Botao2，Zhang Weiming1，2*
(1.Life Science Institute of Nanjing Normal University，Nanjing 210046，China;2.Nanjing Institute for Comprehensive Utilization of Wild Plants，Nanjing 210042，China)

Objective：To study the protective effects of Nymphaea hybrid against the acute alcohol liver injury in mice and offer scientific basis of its health function.Methods：Randomly distribute 70 male Kunming mices to control group，acute alcohol liver injury model group，Silymarin group(46.7 mg/kg)and low，middle，high dose group s of Nymphaea hybrid(120，180，240 mg/kg).Determinaiton and comparing of liver triglycerides(TG)，glutathione(GSH)activities，malondialdehyde(MDA)content between groups.Results：Treatment with different dose Nymphaea hybrid could increase liver GSH activities(P＜ 0.05) ，decrease TG and MDA content in liver tissue(P＜ 0.05).Conclusion：Nymphaea hybrid showed protective effects on the acute alcohol liver injury induce by alcohol in mice.

Nymphaea hybrid;alcohol liver injury;liver－protection effects

R285.5

A

1006－9690(2012)05－0018－02

10.3969/j.issn.1006－9690.2012.05.0004

2012－03－18

国家“十一五”支撑计划课题(2006BAD06B02);国家科技基础条件平台工作项目(2004DEA71010)

姜洪芳，副研究员，从事植物有效物质开发利用研究。E－mail：jhf74@163.com

*通讯作者：张卫明，研究员，博导，主要研究植物活性成分开发与应用。E－mail：botanyzhang@163.com