HPLC法测定扎冲－13味丸中甘草苷含量

郑 敏

(内蒙古自治区人民医院，内蒙古 呼和浩特 010010)

扎冲－13味丸为蒙医治疗白脉病的要药，有祛风通窍，舒筋活血，镇静安神作用;用于半身不遂，口歪眼斜、言语不清，面肌痉挛等症。主要由麝香、草乌、珊瑚、珍珠、沉香、甘草、石菖蒲、诃子等药材组成。制法:草乌、沉香、甘草、石菖蒲、诃子等药材粉碎与麝香、珊瑚、珍珠配研成细粉，用水泛丸，既得［1］。本文采用液HPLC法测定本品中对甘草苷含量，结果报道如下。

1 仪器、试剂及样品

1100型高效液相色谱仪(Agilentg公司制造);NC－2000中北色谱工作站;TG332A型1/10万光电天平(湘仪制造);AS2060B型超声清洗仪(上海科学仪器公司制造)。乙腈、甲醇为色谱纯(Tedai公司生产);其它试剂均为分析纯(市售)。甘草苷由天津建达生物技术有限公司提供，含量99.0%。扎冲－13味丸由内蒙古中蒙医医院蒙药制剂中心生产。

2 含量测定

2.1 色谱条件:非罗门Kromasil色谱柱C18(4.6 mm×200 mm，5μm)，流动相:乙腈 －0.5%冰乙酸(20:80)，检测波长276nm，柱温:30℃。

2.2 测定溶液的制备

2.2.1 标准品溶液的制备:精密量取甘草苷标准品0.4 mg，置10mL容量瓶内，加甲醇溶解至刻度，为A溶液，精密吸A溶液1mL，置10mL量瓶内，加甲醇至刻度为B溶液。

2.2.2 样品溶液的制备:取本品(粉碎，研细，过100目筛)200mg，精密称重，置50mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10mL，称定质量，超声处理(功率250W，频率40kHz)30min，放冷，再称定质量，用甲醇补足失去的质量，摇匀，静止，用0.45μm滤膜滤过，即的。

2.2.3 阴性样品溶液的制备:取不含甘草苷的药剂，按供试品制法制备。

2.3 线性关系考察:吸取 A 溶液 8、6、4、2μL，B 溶液 6、4、2、1μL按色谱条件测定峰面积，以峰面积积分值为纵坐标，标准品含量为横坐标，绘制标准曲线，作回归分析。回归方程:Y=27282+4678787x，r=0.9993。甘草苷在 0.0240 ～0.486μg范围内线性关系良好 。

2.4 精密度试验:精密吸取同一样品溶液10μL，连续进样5次，测定甘草苷峰面积积分值，积分值的RSD为0.91%

2.5 稳定性试验:取同一样品溶液，分别于样品制备后第0，2，4，8h进样10μL测定甘草苷峰面积积分值，积分值的RSD为0.85%。样品溶液在8h内稳定。

2.6 重复性试验:精密称取5份同批号样品，照“样品溶液的制备”方法制备，照色谱条件测定。甘草苷含量分别为0.35、0.35、0.34、0.33、0.34(mg·g－1)，RSD=2.5%

2.7 回收率试验:取已知甘草苷含量的样品100mg，分别精密加入甘草苷标准品溶液(0.04mg·mL－1)，加甲醇至刻度。样品用微孔滤膜过滤，取滤液10μL，照色谱条件测定。平均回收率为100.5%。

表1 加样回收率测定

3 样品测定

分别吸取标准品溶液与样品溶液各10μL，依上述色谱条件测定不同 批 号 (071110、080410、081121、090233、100421)甘草苷含量。甘草苷平均含量分别为43.2，30.4，38.5，40.3，35.3μg·g－1(n=5)。

4 讨论

批样品含测表明甘草苷含量在30～43μg·g－1之间，甘草苷平均含量为37.5μg·g－1。样品超声处理20min后甘草苷含量不再增加，为提取完全，样品超声处理时间为30min。阴性样品在甘草苷保留时间位置内无干扰。本法测定甘草苷的含量，操作简便，准确可靠，可以作为该药品含量控制标准。

［1］国家药典委员会编辑.卫生部药品标准蒙药分册［S］.1998，70