风湿Ⅱ号合剂抗炎镇痛作用研究

陈黎，王启斌，李梓香，詹艳，朱海涛，叶立红，王刚

(湖北医药学院附属太和医院1.药学部;2.心血管内科，湖北十堰442000)

类风湿关节炎是一种以滑膜慢性炎症为主要表现的自身免疫性疾病，主要侵犯全身各处关节，呈多发性、对称性、慢性增生性滑膜炎，由此引起关节软骨和关节囊的破坏，最后导致关节强直畸形[1]。风湿Ⅱ号合剂是我院治疗类风湿关节炎的中药验方，由金银花、全虫、当归等十余味中药配伍组成，具有祛风除湿、抗炎、消肿、镇痛的功效。笔者在本实验中对该制剂进行抗炎和镇痛作用研究，以期为风湿Ⅱ号合剂的进一步开发利用提供理论依据。

1 材料

1.1 试药风湿Ⅱ号合剂由太和医院制剂室提供，所用药材均由太和医院药学部叶立红副主任药师鉴定，符合2010年版《中华人民共和国药典》要求;氢化可的松(南阳普康药业有限公司，批号:2008070302)。二甲苯、伊文思蓝、甲醛、醋酸，以及其他所用试剂均为分析纯，水为纯化水。

1.2 动物昆明种小鼠，体质量(20±2)g;SD大鼠，体质量(200±20)g。合格证号:SYXK(鄂)2005-0031，均由湖北医药学院实验动物中心提供，许可证号:SCXK(鄂)2005-0008。

1.3 仪器501型超级恒温器(上海实验仪器总厂)，岛津AUW120D分析天平(d=0.1 mg∶0.01 mg)，分光光度计(北京普析通用仪器厂)，打孔器。

2 方法与结果

2.1 镇痛实验

2.1.1 小鼠热板实验昆明种小鼠50只，随机分为模型组(灌胃等体积0.9%氯化钠溶液)，风湿Ⅱ号合剂高、中、低剂量组(分别给予浓度为0.5，0.25，0.125 g·mL－1风湿Ⅱ号合剂)，阳性对照组(氢化可的松50 mg·kg－1)，每组10只。除氢化可的松皮下注射外，其他各组均灌胃给药，0.3 mL·(10 g)－1，连续7 d，qd，最后一次给药1 h后取小鼠置超级恒温器中，计算各组小鼠第一次舔后足时间(痛阈)，痛阈超过60 s者按60 s计，计算痛阈提高率。给药前痛阈以模型组痛阈计，痛阈提高率(%)=(给药后痛阈－给药前痛阈)/给药前痛阈×100%，结果见表1[2]。

2.1.2 醋酸致小鼠扭体反应昆明种小鼠50只，分组及给药方法同“2.1.1”项，连续给药7 d，各小鼠腹腔注射0.6%醋酸，0.1 mL·(10 g)－1，记录给药后各组小鼠首次出现扭体反应的时间与20 min内各鼠扭体次数，结果见表2。

2.2 抗炎实验

2.2.1 腹腔染料法昆明种小鼠50只，分组及给药方法同“2.1.1”项，连续给药7 d，最后一次给药1 h后，尾静脉注射伊文思蓝，0.1 mL·(20 g)－1，1 h后断头处死小鼠，剪开腹腔并用纯化水5 mL冲洗腹腔，收集洗液，离心，在紫外分光光度计590 nm波长处测定吸光度[3]，结果见表3。

2.2.2 小鼠耳廓肿胀实验昆明种小鼠50只，分组及给药方法同“2.1.1”项，连续给药7 d，最后一次给药1 h后，在小鼠右侧耳廓正反两面均匀涂抹二甲苯致炎。30 min后处死小鼠，用打孔器等面积冲下左右两耳同一部位耳廓，分别置于分析天平上称质量，计算鼠耳肿胀度及抑制率。肿胀度(%)=(右耳质量－左耳质量)/左耳质量×100%，肿胀抑制率(%)=(模型组平均肿胀度－给药组平均肿胀度)/模型组平均肿胀度×100%。比较各组间差异[4]，结果见表4。

表1 5组小鼠痛阈提高率测定结果Tab.1Elevated rate of pain threshold in 5 groups of mice ±s

表1 5组小鼠痛阈提高率测定结果Tab.1Elevated rate of pain threshold in 5 groups of mice ±s

与模型组比较，*1P＜0.01Compared with model group，*1P＜0.01

/%风湿Ⅱ组别动物数剂量/(g·kg－1)痛阈提高率号合剂高剂量组1015.0062.14±3.90*1中剂量组107.5043.02±2.30*1低剂量组103.7517.45±2.27*1阳性对照组1050 mg·kg－160.18±2.74*1模型组10…3.92±1.14

表2 5组小鼠醋酸致疼痛反应测定结果Tab.2 Results of pain induced by acetic acid in 5 groups of mice ±s

表2 5组小鼠醋酸致疼痛反应测定结果Tab.2 Results of pain induced by acetic acid in 5 groups of mice ±s

与模型组比较，*1P＜0.01Compared with model group，*1P＜0.01

次数风湿Ⅱ组别动物数剂量/(g·kg－1)首次出现扭体反应时间/min扭体号合剂高剂量组1015.0014.20±3.2712.20±1.92*1中剂量组107.5012.60±3.2113.80±3.35*1低剂量组103.7510.60±2.9719.60±4.16阳性对照组1050 mg·kg－114.60±2.7010.80±3.19*1模型组10…8.80±1.325.20±3.56

表3 5组小鼠腹腔洗液吸光度值Tab.3Absorbance of celiac eluate from 5 groups of mice ±s

表3 5组小鼠腹腔洗液吸光度值Tab.3Absorbance of celiac eluate from 5 groups of mice ±s

与模型组比较，*1P＜0.01Compared with model group，*1P＜0.01

吸光度值风湿Ⅱ组别动物数剂量/(g·kg－1)腹腔洗出液号合剂高剂量组1015.000.276±0.053*1中剂量组107.500.317±0.101*1低剂量组103.750.428±0.027*1阳性对照组1050 mg·kg－10.266±0.048*1模型组10…0.556±0.012

2.2.3 大鼠足肿胀实验SD大鼠50只，分组及给药方法同“2.1.1”项，连续给药7 d，最后一次给药后，分别给大鼠右后足趾注射10%蛋清致炎，每只0.2 mL，致炎0.5，1，2，4，6 h后分别用软皮尺测量大鼠足周长，计算各组平均肿胀度。肿胀度(%)=(给药后足周长－给药前足周长)/给药前足周长×100%，结果见表5。

3 讨论

本实验结果显示，风湿Ⅱ号合剂能减轻二甲苯所致小鼠耳廓肿胀，抑制蛋清致大鼠足肿胀。而且随着时间的延长，作用效果持久;热板法和扭体法实验结果显示，风湿Ⅱ号合剂有明显的镇痛效果，抗炎、镇痛作用呈现一定的量效关系，药物剂量越大，镇痛、抗炎作用越强。说明风湿Ⅱ号合剂在镇痛、抗炎方面有显著的作用。

表4 5组小鼠耳廓肿胀度与耳廓肿胀抑制率测定结果Tab.4Swelling of auricle and the inhibition ratio in 5 groups of mice%，±s

表4 5组小鼠耳廓肿胀度与耳廓肿胀抑制率测定结果Tab.4Swelling of auricle and the inhibition ratio in 5 groups of mice%，±s

与模型组比较，*1P＜0.01Compared with model group，*1P＜0.01

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表5 5组大鼠不同时间足趾肿胀度测定结果Tab.5 Results of swelling of paw in 5 groups of rats at different time points%，±s

表5 5组大鼠不同时间足趾肿胀度测定结果Tab.5 Results of swelling of paw in 5 groups of rats at different time points%，±s

与模型组比较，*1P＜0.01Compared with model group，*1P＜0.01

0.5 h1 h2 h4 h6 h风湿Ⅱ组别动物数剂量/(g·kg－1)号合剂高剂量组1015.0014.17±1.26*113.13±4.84*110.73±3.47*18.71±5.12*16.52±3.57*1中剂量组107.5019.47±3.01*117.58±4.72*115.34±4.01*112.37±1.47*110.37±8.14*1低剂量组103.7522.37±2.47*120.56±3.12*117.42±4.0715.23±3.1412.76±1.25阳性对照组1050 mg·kg－113.01±1.12*110.72±2.15*19.13±4.18*17.16±1.14*15.76±2.32*1模型组10…30.78±11.0228.56±10.0518.23±9.3117.16±11.0315.11±4.87

本实验结果初步证实，风湿Ⅱ号合剂具有较强的抗炎、镇痛作用，而且起效快，持续时间长，为临床治疗类风湿关节炎提供了一定的实验依据[5-6]。

[1]胡晓敏.抗类风湿关节炎药物的药效学评价[J].中国新药杂志，2005，14(5):523－524.

[2]陈奇.中药药理实验方法[M].北京:人民卫生出版社，1994:67，107.

[3]胡爱萍，章敏.热痹颗粒剂治疗类风湿关节炎的实验研究[J].湖北中医杂志，2005，27(10):49－50.

[4]王宪英，杨劼，李雪靖.骨痹宁胶囊的药效学研究[J].医药导报，2010，29(4):436－438.

[5]李莉，胡定伟，敬雪明，等.思维导图在风湿科住院患者入院指导中的应用[J].护理学杂志，2011，26(9):73－74.

[6]周玮，张育，沈维干，等.沙利度胺对类风湿关节炎模型大鼠炎症及血管新生相关因子的影响[J].医药导报，2010，29(2):148－151.