G6PD不同检验方法比较

陈飞

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)是参与红细胞代谢的一种重要酶，其缺陷可导致红细胞代谢障碍而引起溶血性贫血，大多是遗传性疾病，主要靠临床筛查发现，本文采用全自动生化分析仪速率法,分光光度法,高铁血红蛋白还原试验等方法比较对葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD) 缺乏筛查效率的比较。

1 基本资料和方法

1.1 基本资料

我院近2年1036例孕检样本，年龄在21～38岁之间，采用在柠檬酸葡萄糖抗凝剂（ACD）抗凝血中加入适量乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝剂,4℃冷藏保存。

1.2 使用仪器

全自动生化仪(日立7020)，分光光度计（上海江仪）。

1.3 方法

1.3.1 G6PD活性检测 采用广州科方公司提供的G6PD试剂盒，抗凝血离心取红细胞层20ul到含有1ml溶血剂(试剂盒配备)试管里，待红细胞溶解后立即在生化仪上检测（注意：红细胞溶解后到上机检测时间约8分钟，最长必须在25分钟之内）。G6PD活性表达单位为U/L，小于1300为缺乏，大于3600为增高，介于其二者中间的为正常值，所有操作步骤及参数必须按照说明书严格执行。

1.3.2 G6PD/6PGD比值法 采用广州米基公司提供的试剂盒，取两管，各加50ul溶血液，加热20分后加中止液2ml，在650NM分光光度计上检测两管吸光度,S1/S2正常值为比值大于 1.05，缺乏者比值小于0.95，但若比值介于其二者之间即为高度怀疑，所有操作步骤及参数必须按照说明书严格执行。参考值1.0～2.3。

1.3.3 高铁血红蛋白还原实验 使用分光光度计按照《 全国临床检验操作规程》中步骤严格执行操作［1］。高铁血红蛋白还原率小于75% 为阳性。

1.4 统计学方法 数据输入计算机后,采用SPSS16.0统计软件包进行统计分析。

2 结果

2.1 共1036例患者标本,生化分析仪进行G6PD活性检测时,检测结果为正常的有924例，结果大于3600U/L的有42份,结果＜1300U/L的标本有70份。

2.2 共1036例患者标本,高铁血红蛋白还原实验检测结果阴性的有924例（高铁血红蛋白还原率大于75%）,阳性结果有112例(高铁血红蛋白还原率小于75%)。

2.3 共1036例患者标本，G6PD/6PGD比值法测定时检测结果正常的为910例（比值大于1.05），缺乏者为98例（比值小于0.95），28例高度怀疑（比值介于0.95与1.05之间）。

3 讨论

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症是遗传性红细胞酶病中最常见的一种，G-6-PD基因定位于Xq28，G-6-PD缺乏为性连锁的不完全显性遗传。因此，带有变异基因的男性会发病，该异常基因不会从父亲遗传给儿子，只会从母亲遗传给儿子。女性G-6-PD缺乏杂合子有两个红细胞群，G-6-PD缺乏细胞和正常细胞，在女性杂合子外周血中G-6-PD缺失红细胞与正常红细胞之比的这种显著性差异就会导致其临床表现各异［2］。

G-6-PD活性测定是通过单位时间生成NADPH的量来反映红细胞G-6-PD活性［3］，但是单测G6PD活性不能排除由其他原因引起的G6PD活性升高或降低（如红细胞增多症，标本吸量不准确，贫血，标本溶血，凝血，陈旧，污染等）。高铁血红蛋白还原试验法（MHB-RT）是目前国内常用于筛查G-6-PD活性试验之一，其优点在于不需要昂贵的试剂或仪器，操作简单，可用于普查，但存在假阳性。一般认为,G-6-PD缺乏患者高铁血红蛋白还原率31%～75%是杂合子型，还原率小于30%是纯合子型(为显著缺陷)。G6PD/6PGD比值测定是一种表型诊断,会因各种因素漏诊或误诊一部分杂合子女性［4］。

从检测结果分析,生化分析仪进行G6PD活性检测分析阳性检出率与高铁血红蛋白还原试验法检出比例相同，均为10.8%，G6PD/6PGD比值法阳性检测比率为12.1%,但G6PD活性检测可以在自动生化分析仪上重复检测，重复性测量避免误差是其他方法所没有的。

这三种生化检测的方法都相对较简单，尤其是生化仪检测，虽然准确性上还不及基因检测，但在基层医院开展对育龄妇女的筛查是十分有帮助的，筛选后对可疑对象再做进一步检查有利于节约医疗成本，更有益于提高出生人口的质量。

［1］应妩,王毓三.全国临床检验操作规程［M］.3版.南京:东南大学出版社,2006:173.

［2］徐小兰,王枫,杨蓉,等.南昌地区10792例新生儿G6PD缺乏症筛查结果分析［J］.中国优生与遗传杂志,2005,13(8):85.

［3］梁栋伟，区丽群.生化仪直接测定G6PD 活性的临床应用［J］.检验医学与临床2007,4(8):709-710.

［4］区丽群,崔金环,林蔚,等.应用G6PD/6PGD比值法检测育龄夫妇62磷酸葡萄糖脱氢酶［J］.现代检验医学杂志,2004,19(4):31.