膜式液基薄层细胞制作技术

孙 雁 金寿同 陈淑云

(江苏省金坛市中医医院病理科 213200)

液基薄层细胞制片技术是指薄层制片自动装置制备细胞学标本的技术。薄层制片自动装置如同病理组织切片机一样，只是制片的机器，此装置在恒定的面积上均匀地分布着很薄的一层细胞，克服了传统的制片技术存在的材料太厚、细胞重叠、背景模糊和染色不佳等问题。具有代表性的液基薄层细胞制作技术是沉降式液基薄层细胞制片技术和膜式液基薄层细胞制作技术。现就膜式薄层细胞制作技术介绍如下。

1 制片机制与技术特点

1.1 通过过滤膜将细胞样本过滤，使细胞贴附在滤膜上，再通过负压作用将滤膜上的细胞转移到载玻片上，最后将细胞涂片放入固定液中固定。整个过程在制片机自动完成。

1.2 制片机中的过滤器是一个直径为25mm的真空柱状容器，下面为过滤膜，滤膜孔径通常为5μm和7μm，分别用于非妇科细胞样本和较大的妇科细胞样本，可制成直径2mm的细胞薄层，方便在直径2mm区域进行观察。

2 主要制片操作步骤

2.1 根据采集的细胞样本类型，选择对应的运行程序，机器进行自检。

2.2 机器进入程序自动操作，直到细胞片移到含95%的乙醇固定液的瓶中。

2.3 手工取出细胞片集中到另一含有固定液的容器存放待染色，然后继续下一例样本制片操作。

2.4 将涂片进行巴氏染色。

3 制片质量控制

3.1 血性的细胞标本在上机前应先进行去红细胞处理:(1)经平衡后放入离心机以2000转/分，离心10分钟;(2)吸出清夜后将5ml1%的冰醋酸加入到沉渣，振荡5分钟;(3)弃去冰醋酸后将原标本上清液加到沉渣里，混匀后即可放入制片机制片。

3.2 若标本量较少则直接将其倒入标本瓶内，静止15分钟后制片。

3.3 痰液等黏液性标本可加入消化液进行消化处理。

3.4 对于胸腹水标本应在取样时加入抗凝剂，若标本量较多，在前期处理时应取自然沉淀后底部的标本10 ～15ml。

3.5 制片前必须检测是否装载好样本瓶、过滤器和载玻片，根据样本类型选择合适孔径的滤膜。

3.6 95%的乙醇固定液需每天更换。

4 小结

膜式液基薄层细胞制片技术可明显提高癌症确诊率，能为临床提供可靠的诊断依据。在筛查宫颈癌方面由于传统的巴氏染色涂片技术，采用TBS报告系统国际诊断标准，以得到了普遍认可。该技术用于痰液、尿液、浆膜腔积液也能提高恶性细胞的检出率，为临床治疗提供可靠的诊断依据。但该技术也有不足之处，成本较高，不能在基层医院普及。在技术方面一些问题还有待改进，如细胞固缩等

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