S-100与大肠癌的相关性病理学研究

张建坤 庞国莲 陈昊宾 罗贤勇

（云南省曲靖市第一人民医院，云南 曲靖 655000）

大肠癌是我国常见的消化道恶性肿瘤之一，其发病率有逐年升高趋势，且发病年龄年轻化，大肠癌的发生、发展与癌基因的激活、抑癌基因的失活、基因的突变或丢失及蛋白的过度表达等密切相关[1]。本文应用免疫组化方法检测和分析S-100蛋白在大肠癌中的表达，旨在探讨其与大肠癌发生发展的相关性。

1 材料与方法

1.1 研究对象

收集云南省曲靖市第一人民医院病理科2009年9月至2011年6月期间有明确病理诊断的大肠癌手术标本46例。并收集该46例大肠正常组织标本作为对照组。年龄32岁～70岁，中位年龄51岁。

1.2 方法

采用链菌素亲生物素-过氧化酶法（S-P法）：石蜡切片先经过二甲苯脱蜡，后梯度乙醇水化。再将切片置于10mmol/L柠檬酸钠缓冲液（pH=6.0）内，高温高压抗原修复2min；一抗采用1∶100稀释的S-100兔抗人多克隆抗体（购自福州迈新生物技术有限公司）。4℃温育过夜。其余步骤按常规免疫组化S-P法进行，DAB显色，苏木素复染。乙醇梯度脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。阴性对照采用PBS液代替第一抗原，用已知阳性组织切片作阳性对照。所有对照均与实验标本在相同条件下进行免疫组化染色。

1.3 结果判定

S-100蛋白表达定位于细胞核或细胞浆，呈棕黄色颗粒状。每张切片根据染色强度进行评分：无色（-）为阴性；浅黄色（±）为弱阳性；黄色（+）为阳性；棕黄色（++）强阳性。对照组大肠正常粘膜组织亦根据染色强度进行评分。

1.4 统计学处理

应用spss 16.0 for windows对数据进行统计分析，χ2检验或作相关分析，以P＜0.05为差异显著性标准。

2 结 果

2.1 S-100蛋白在不同部位表达情况

本试验46例大肠癌组织中有38例S-100蛋白表达，阳性率82.61%（38/46）；46例大肠正常组织S-100蛋白均不表达，其阳性率为0.00%（0/46），大肠癌组织中S-100蛋白表达阳性率显著高于大肠正常粘膜，二者相比具有显著性差异（P=0.00）。

2.2 大肠癌组织中S-100蛋白表达与临床病理特征的关系

本实验18例高分化大肠癌病例中有6例S-100蛋白表达，阳性率为33.33%（6/18），28例中低分化大肠癌中有24例呈阳性，阳性率为85.71%（24/28），二者相比差异具有统计学意义（χ2=11.67，P=0.00）；在无淋巴结转移的20例大肠癌中，S-100蛋白表达的为8例，阳性率为40.00%（8/20），在有淋巴结转移的26例大肠癌中，有23例S-100蛋白表达阳性，其阳性率为88.46%（23/26），差异具有统计学意义（χ2=8.95，P=0.00）；在临床分期中，判定为I+II期的24例大肠癌与判定为III期的22例大肠癌组织相比，差异无统计学意义（χ2=5.78，P=0.59）；在25例男性病例与21例女性病例中，差异无显著性（χ2=0.12，P=0.67）；患者年龄＜51岁的19例大肠癌与患者年龄≥51岁的27例大肠癌组织相比，差异也无统计学意义（χ2=0.03，P=0.98）。

由上所知，S-100蛋白表达与大肠癌的分化程度和有无淋巴结转移密切相关（P＜0.05），而与大肠癌的临床分期、患者性别、年龄无相关性（P＞0.05）。

3 讨 论

S-100蛋白是从牛脑中提取的一种可溶性、富含天门冬氨酸和谷氨酸的脑特异性的酸性蛋白，相对分子质量为20000～25000，因其能溶于100%的硫酸铵溶液，所以S-100蛋白被看作神经外胚叶肿瘤的一种很有用的抗原，与神经生理功能有关，是一组低分子量的钙结合调节蛋白之一[2]。S-100蛋白有三种亚型，即S-100ao、S-100a、S-100b，在细胞周期过程、细胞分化、细胞骨架和膜相互作用中起作用[3]。S-100蛋白主要存在神经组织、垂体、颈动脉体、肾上腺髓质、唾液腺及少数间叶组织，主要用于星形细胞少突胶质瘤、室管膜瘤、神经母细胞瘤、神经鞘瘤、恶性黑色素瘤、脂肪肉瘤的诊断与鉴别诊断。

本研究对46例大肠癌组织标本及大肠正常组织中S-100蛋白检测结果显示，高分化癌组织中S-100蛋白阳性率为33.33%（6/18），中～低分化癌中阳性率为85.71%（24/28），二者相比差异具有统计学意义（χ2=11.67，P=0.00）；在无淋巴结转移的病例中，S-100蛋白阳性率为40.00%（8/20），在有淋巴结转移的病例中其阳性率是88.46%（23/26）。二者相比差异具有统计学意义（χ2=8.95，P=0.00），由此可见，S-100蛋白阳性表达在大肠癌组织中明显高于在大肠正常组织中，并随着大肠癌分化程度的降低S-100蛋白的表达逐渐升高；在有淋巴结转移的病例中高于在无淋巴结转移的病例，因此，大肠癌组织中S-100蛋白表达阳性率与分化程度、和有无淋巴结转移具有相关性，而S-100蛋白表达水平与大肠癌临床分期、患者性别、年龄、无相关性（P＞0.05）。

综上所述，本实验对S-100蛋白在46例大肠癌组织的表达检测分析结果显示，S-100蛋白在低分化的大肠癌中表达强阳性，因此可能对大肠癌的发生、发展具有重要的作用；S-100蛋白在有淋巴结转移的大肠癌中的表达明显，故认为S-100蛋白的表达情况可作为判断大肠癌预后的指标之一。因此，S-100蛋白可作为判断大肠癌分化程度和预后的参考指标，尤其对大肠癌恶性演进以及判断预后具有重要意义，可作为新的生物标志物及治疗大肠癌浸润转移的潜在靶目标。

[1]王金松,曾树林.S100蛋白在大肠癌组织中的表达及其临床意义[J].微循环学,2011,21(1):37-41.

[2]Lee GJ,Carter TE,Villagarcia MR.A major QTL conditioning salt tolerance in S-100 soybean and descendent cultivars[J].Theoretical Applied Genetics,2005,10(4):787-791.

[3]Magro G,Grasso S,Emmanuele C.Immunohistochemical distribution of S-100 protein and type IV collagen in human embryonic and fetal sympathetic neuroblasts[J].Histochemical J,1995,27(9):694-701.