红药膏对健康和磨损皮肤的急性毒性试验与皮肤刺激试验

吴风云 朱佳芹

湖北省黄石市二医院烧伤皮肤病药物开发研究所 435002

红药膏能否对健康和磨损皮肤引起急性毒性与皮肤刺激性？现将对大白兔的试验过程报告如下。

1 皮肤的急性毒性试验

1.1 材料

1.1.1 动物：健康日本大耳兔15只，成年，雌雄不拘，体重（2.48±0.04）kg，由黄石卫校动物室和同济医大动物室提供。

1.1.2 药品：红药膏是本试验的主要研究对象，分为高银红药膏（含SD－Ag 4%）和低银红药膏（含SD－Ag 2%，与现用的红药膏相当），都是由本院烧伤皮肤病药物开发研究所配制和提供。赋形剂组（又称对照组）为黄凡士林，是由国营南昌扬子洲制药厂分装等。

1.2 试验方法

1.2.1 分组：将15只大白兔随机分为3组。1组：涂高银红药膏，称高银组；2组：涂低银红药膏，称低银组；3组：涂黄凡士林，称赋形剂组（作为对照组）。每组都由5只大白兔组成。

1.2.2 试验经过：试验时，常规对每只受试大白兔应用10%硫化钠溶液给大白兔右侧背部皮肤脱毛约5×10cm2＝50cm2，相当于体表面积10%，在脱毛区内每天按组别种类涂药2次，0.2g／次，涂药后，应用背心式包布［1］和无菌敷料妥当包扎、固定和保护，防止受试区表面上的药品被白兔所舔食，导致试验失败。分笼单独饲养，连续观察受试大白兔1周。观察内容：活动、皮毛光泽、饮食、体重、体温和死亡数。如无毒性反应，再在左侧背部皮肤以10%硫化钠脱毛50cm2，并应用细砂纸（钻石牌耐水砂纸380号），摩擦该处皮肤，直到有密集性出血点为止，立即在该处按上述组别涂药0.2g／次，2次／d，观察指标同上，连续观察1周，并与对照组比较。因此，每只受试大白兔前后共观察14d（2周）。

1.3 结果 自高银和低银红药膏外用于大白兔的健康和磨损皮肤后，对其行动、饮食、皮毛光泽、体温和体重（见表1）连续测定和观察14d。发现红药膏对健康和磨损皮肤均无刺激性和任何不良影响。受试动物无1只死亡，也未出现任何不良反应，体温均在正常范围内（38.5～39.5℃），各方面均与对照组大白兔的表现无任何差别。本实验研究表明，高和低银红药膏（即现用的红药膏）涂抹在大白兔的健康和磨损皮肤上，经过14d观察，对受试大白兔均未引起任何急性中毒反应和皮肤刺激反应。说明现在已经在临床使用多年的红药膏（即2%低银红药膏）对全身无吸收中毒，对创面和周围皮肤也均无刺激性［2，3］。

表1 红药膏涂于完整和损伤兔皮对体重的影响（kg，，n＝5）

表1 红药膏涂于完整和损伤兔皮对体重的影响（kg，，n＝5）

注：△表示3组试验动物涂药后体重与涂药前相比P＞0.05，其差别无显著意义。

2 皮肤刺激试验

2.1 材料

2.1.1 动物：日本大耳白兔6只，雌雄不拘，体重（2.46±0.45）kg，由黄石卫校动物室和同济医大动物室分别提供。

2.1.2 药品：供做试验的红药膏，分为高银和低银红药膏两种，高银红药膏含4%SD－Ag，低银红药膏含2%SD－Ag（代表现用的红药膏）。二者均由本院烧伤皮肤病研究所提供，赋形剂为黄凡士林，由国营南昌扬子洲制药厂分装和提供等。

2.2 试验方法

2.2.1 试验动物脱毛和分组：将6只大白兔的背部延伸到侧腹壁皮肤，应用10%硫化钠溶液，对称脱毛4块，每块为6×8.4cm2＝50cm2，脱毛时注意勿擦破皮肤，脱毛后第2天（24h后）在左侧背部的1区和2区分别涂高银和低银红药膏各0.1g，前者归纳到本试验的高银组，后者被归纳到本试验组的低银组，右侧背部2区涂赋形剂黄凡士林，被归纳入赋形剂组或对照组。右侧背部的4区皮肤留为空白对比区，专供观察和对比时参考。

2.2.2 试验经过。在每次涂药完毕后2h内，每隔30min观察皮肤反应1次，此后便立即予以背心式包扎［1］，妥为保护和固定。在涂药24h后，去除全部包扎，并用温水清洗药物和赋形剂观察各试区皮肤的变化，如发现局部无红斑、发疹、水肿和疼痛等异常表现，便继续每天涂药1次。一共6d于第7天停药，并去除包扎。观察涂药7d后皮肤反应，若仍无红斑、发疹、水肿和疼痛等异常表现，便进一步在各试区用细砂纸（钻石牌耐水砂纸38号），磨擦皮肤造成损伤，并以上述同样方法涂药和连续7d观察各试区皮肤有否红斑、发疹、水肿和疼痛等出现。

2.3 结果 经过在各试区内连续每天涂药1次共7d，观察各试区皮肤无水肿、发疹和红斑。在停药后24h和48h，局部仍无反应。各试区皮肤在擦伤后连续涂药7d，观察24h和48h也均未发现局部有明显的红斑、发疹和水肿，因此，皮肤刺激反应为0，均小于规定刺激指数（见表2、3），体温也均在正常范围（38.5～39.5℃）以内。提示红药膏无皮肤刺激性合乎要求［2～4］。

表2 文献中皮肤刺激反应分级标准

表3 红药膏对兔皮肤的刺激试验结果

［1］吴风云，鲁立新，丁冬琴.药物实验中动物创面包扎方法的改进〔J〕.中华烧伤杂志，2004，20（2）：108.

［2］南京药学院药剂学教研组，编著.药剂学〔M〕.第2版.北京：人民卫生出版社，1985：853－857.

［3］陈奇，主编.中药药理研究方法学〔M〕.北京：人民卫生出版社，1993：164－165.

［4］卫生部药政管理局，编.中药新药研究指南〔M〕.卫生部药政管理局，1994：230－235.