吉西他滨的肝脏毒性作用观察

(广西壮族自治区人民医院，南宁 530021)

化疗药物在杀伤肿瘤细胞的同时，对正常组织细胞不可避免地产生损害或毒副作用，大多数化疗药物均可引起一定程度的肝损害。吉西他滨是临床上常用的广谱抗癌药物，骨髓抑制为其主要不良反应［1］，其肝脏毒性在不同的文献报道中有较大差异［2～5］。2009年1月 ～2011年6月，我们观察了吉西他滨的肝脏毒性作用，旨在为其临床应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料 50只昆明种雄性小鼠，体质量(20±2)g，(广西医科大学实验动物中心提供，许可证号:SYKG桂2003-0005)。吉西他滨注射液(江苏豪森药业股份有限公司);丙二醛(MDA)、超氧化歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。数显恒温水浴锅(金坛市医疗仪器厂);Baujahr 2000低温离心机(上海博星基因芯片有限公司);8430紫外—可见分光光度计(美国惠普)。

1.2 动物模型建立 将50只健康昆明种雄性小鼠随机分为观察组40只和对照组10只;观察组静脉注射22.4 mg/mL吉西他滨注射液0.2 mL，对照组静脉注射生理盐水0.2 mL。观察组分别于给药第3、7、11、14 天，对照组在给药第 3 天取血和肝组织进行相关指标检测(取标本前1 d禁食)。

1.3 观察项目

1.3.1 血清生物化学指标 小鼠眼眶采血，3 000 r/min离心10 min，分离血清检测直接胆红素(DBIL)、碱性磷酸酶(ALP)、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)水平。

1.3.2 肝组织氧化及抗氧化指标 取小鼠肝组织0.2 g，加4℃生理盐水在冰浴下制成10%肝组织匀浆，将匀浆在4℃离心10 min(4 000 r/min)，取上清液，考马斯亮蓝法检测总蛋白含量，按试剂盒方法测定肝组织匀浆MDA、GSH含量和SOD活性。

1.3.3 肝脏组织病理学变化 取同一部位肝组织一小块约10 mm×8 mm×3 mm，用10%甲醛固定，梯度酒精脱水，石蜡包埋、切片5 μm厚，HE染色，光学显微镜下观察。

1.4 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件，所得实验数据用±s表示，并进行t检验，组织病理学结果进行秩和检验。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清生化指标 两组生化指标比较见表1。

表1 两组生化指标检测结果(n=10，U/L，±s)

表1 两组生化指标检测结果(n=10，U/L，±s)

注:与对照组比较，*P ＜0.01，△P ＜0.05

组别D-BIL ALT AST ALP观察组第3 天 0.50 ±0.06* 37.63 ±3.89 101.00 ±6.78△ 289.75 ±11.72*第7 天 0.45 ±0.05△ 35.88 ±4.09 99.00 ±7.60△ 321.50 ±14.73*第11 天 0.49 ±0.07* 38.38 ±2.45 95.00 ±5.55△ 321.88 ±13.03*第14 天 0.53 ±0.04* 32.88 ±2.80 98.88 ±4.67△ 278.88 ± 9.55*对照组0.36 ±0.05 36.88 ±4.07 73.63 ±7.74 91.88 ± 6.85

2.2 肝组织氧化及抗氧化指标 见表2。

表2 两组氧化及抗氧化指标比较(n=10，±s)

表2 两组氧化及抗氧化指标比较(n=10，±s)

注:与对照组比较，*P ＜0.01，△P＜0.05

组别 MDA(nmol/mg) GSH(mg/g) SOD(U/mg)观察组第3 天 243.82 ±15.27* 23.00 ±1.89* 58.63 ±3.97△第7 天 267.66 ±25.76* 28.83 ±2.72* 52.94 ±2.93△第11 天 226.63 ± 7.44* 31.40 ±3.51* 56.88 ±4.84△第14 天 223.10 ±13.37* 25.95 ±5.48* 54.38 ±2.63△对照组124.98 ±10.14 53.95 ±1.76 66.43 ±4.63

2.3 肝脏组织病理学变化 观察组在给药第3天即出现肝细胞病理改变，均出现肝细胞脂肪变性，整个肝小叶弥漫受累，根据肝细胞脂肪变性程度分级［6］，大部分为重度脂肪变性;17 例(42.5%)出现肝细胞坏死，点状坏死多见，周围有炎性细胞，极少数可见桥接坏死;11例(27.5%)出现肝细胞瘀胆。观察组病理改变程度与对照组比较，经秩和检验，有显著性差异，详见表3。

表3 两组病理结果比较(例)

3 讨论

化疗是肿瘤治疗的主要手段之一，抗肿瘤药物大多为细胞毒药物，在杀伤肿瘤细胞的同时，对正常组织细胞不可避免地产生损害或毒副作用，大多数化疗药物在临床应用中出现一定程度的肝损害。吉西他滨是临床上常用的广谱抗癌药物，为肺癌、乳腺癌及卵巢癌等化疗方案中的主要药物，骨髓抑制为其主要不良反应［1］。关于吉西他滨的肝脏毒性近年来报道较多［4，5，7］。本研究结果显示，吉西他滨在给药第3天即出现组织病理改变及相关指标异常。说明无药物防护情况下，临床剂量的吉西他滨在用药第3天即可能引起肝脏细胞损伤。本研究发现，吉西他滨给药第3天肝组织脂质过氧化物MDA较对照组明显升高，抗氧化成分GSH和SOD明显降低，一直延续至实验结束，符合药物诱导肝脏损伤的氧化应激反应机制，即药物诱导的肝脏损伤与药物的代谢异常有密切关系。药物本身含有的及经CYP450酶系代谢产生的自由基、亲电子基、氧基等有害活性物质，通常与GSH结合而解毒，并不产生肝损伤，而某些因导致肝组织抗氧化防御体系(GSH等)功能下降时，引发脂质过氧化，肝组织脂质过氧化链式反应的终产物之一——MDA升高，导致肝脏氧化应激损伤，轻者为脂肪变性(具有可逆性)，重者可发生中毒性肝细胞坏死［8，9］。

鉴于氧化应激反应在化疗性肝损伤中的作用，临床使用吉西他滨化疗期间应及早应用抗氧化剂，以减轻肝脏毒行。

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