广东海洋大学农学院 黄冠庆 余亲平 陈雁群黄晓亮 谢金婵
谷氨酰胺是动物血液中最丰富的一种游离氨基酸,具有维持体内酸碱平衡、保持小肠黏膜正常的结构和功能、维持组织中抗氧化剂的贮备、增强免疫反应等作用(Wilmore等,1988)。但谷氨酰胺在实际应用中存在溶解低、热不稳定等缺点,影响了谷氨酰胺在动物生产中的应用。近年来,有学者将目光转移到谷氨酰胺前体物质α-酮戊二酸(α-ketoglutarate,AKG) 上进行研究 (胡泉舟等,2008)。本试验通过饮水方式给黄羽肉鸡供给AKG,通过代谢试验来研究AKG对黄羽肉鸡饲料表观代谢能和蛋白质代谢的影响,为AKG在肉鸡生产中应用提供试验依据。
1.1 试验药物 AKG购自上海朗源化工有限公司,规格:99.8%。
1.2 日粮组成及营养水平 试验基础日粮按照NRC标准(1998)和广东省地方黄羽肉鸡饲养标准配制,其组成及营养水平见表1。
1.3 试验设计 选用42日龄的健康黄羽肉鸡(♀)24只,随机分成A、B两组,每组6个重复,每重复2只鸡,每重复饲养于同一个代谢笼中,A组饲喂基础日粮,B组饲喂基础日粮并通过饮水方式按每只每天供给2 g AKG,A组和B组试鸡的初始体重分别为 (737.33±32.27)g 和 (740.15±20.93)g,差异不显著(P > 0.05),进行为期 7 d(其中预试期3 d,主试期4 d)的全收粪法代谢试验(计成,2008)。2010年9月在广东海洋大学动物营养实验室进行。
表1 日粮组成与营养水平(风干基础)
1.4 试验指标及方法 试验前、后空腹称重,计算平均日增重,期间统计鸡的饲料采食量和收集全部排泄物,用于测定能量和粗蛋白质含量;试验结束后,每只鸡翅静脉采血3 mL,凝固后离心取血清,-20℃保存备用,用于测定血清中总蛋白、白蛋白、尿素氮、谷草转氨酶和谷丙转氨酶。
平均日增重=(终体重-始体重)/天数。
采用国产WZH-15全自动热量计测定饲料和排泄物的总能。
表观代谢能=(摄入饲料能-排泄物能)/饲料采食量。
采用半微量凯氏定氮法测定饲料和排泄物的含氮量。
净蛋白利用率/%=(摄入总氮-排泄物总氮)/摄入总氮×100。
总蛋白用考马斯亮兰比色法测定,白蛋白用溴甲酶绿比色法测定,尿素氮用二乙酰一肟比色法测定,谷草转氨酶活性和谷丙转氨酶活性均用比色法测定。试剂盒均购于南京建成生物工程研究所,其操作按试剂盒说明书进行操作。
1.5 数据处理 试验数据采用SPSS16.0统计软件处理,并进行t检验,试验结果以“平均数±标准差”表示。
由表2可知,B组的平均日增重、表观代谢能、净蛋白利用率、血清总蛋白和白蛋白含量分别比 A 组提高 3.59%、1.85%、4.57%(P<0.05)、5.62%和4.10%,其中净蛋白利用率和血清总蛋白含量达到显著水平(P<0.05);B组的血清尿素氮含量及血清谷草转氨酶和血清谷丙转氨酶活性分别比A组降低7.53%、2.79%和3.86%,其中血清尿素氮含量达到显著水平(P<0.05)。
表2 AKG对黄羽肉鸡能量和蛋白质代谢的影响
3.1 AKG对黄羽肉鸡饲料表观代谢能的影响AKG是生物体三羧酸循环中重要的中间产物,也是生物体内谷氨酸、谷氨酰胺和精氨酸等的生物合成前体物。有研究证明,谷氨酰胺和精氨酸在促进受损肠道的修复过程中发挥着重要的作用(Wu等,2000、1996)。代谢能是饲料总能减去粪能、尿能及消化道可燃气体的能量后剩余的能量。代谢能的高低可以反映出鸡对饲料的消化利用效果。本试验表明,通过饮水方式供给AKG可一定程度提高黄羽肉鸡饲料表观代谢能,说明AKG能维护黄羽肉鸡消化道的结构和功能,促进饲料养分的消化吸收,减少养分的排出,从而提高饲料的代谢能。
3.2 AKG对黄羽肉鸡蛋白质代谢的影响 血清总蛋白由白蛋白和球蛋白组成,主要作为营养物质的载体,参与维持血浆渗透压,同时也是机体蛋白质的一个来源,总蛋白在一定程度上代表了日粮中蛋白质的营养水平及动物对蛋白质的消化吸收程度,血清总蛋白含量高是蛋白质代谢旺盛的表现。
尿素氮是体内蛋白质降解的产物。一般而言,体内蛋白质的合成量增加或体内蛋白质的分解代谢降低,均会导致血清尿素氮浓度下降;而体内蛋白质合成降低或体内蛋白的分解代谢增强,都会导致血清尿素氮浓度的升高。谷丙转氨酶和谷草转氨酶是动物肝细胞内参与氨基酸代谢的重要酶,当组织细胞受损或通透性增大时,大量的谷丙转氨酶、谷草转氨酶逸入血液,使血中谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性升高。
本试验结果表明,通过饮水方式供给AKG,可显著提高黄羽肉鸡饲料净蛋白利用率及血清总蛋白含量(P<0.05),使血清白蛋白的一定程度的提高,显著降低血清尿素氮含量(P<0.05),而且血清转氨酶活性有所降低,但差异不显著。说明外源补充一定量的AKG使肉鸡体内蛋白质分解降低,合成增加,从而促进了含氮物质在体内的沉积,也说明外源供给AKG对肉鸡肝脏无损伤。其作用机理为作为谷氨酰胺前身物的AKG和谷氨酰胺一样可为肠上皮细胞和免疫细胞供能和补充氮源,同时为胃肠道细胞代谢提供能量,保障肠道屏障功能的完整性和正常的吸收功能 (Jones等,1999)。本试验AKG可显著提高净蛋白利用率(P<0.05)及平均日增重一定程度的提高的结果进一步证实这一结论。本试验结果是在42日龄黄羽肉鸡的代谢试验基础上得出,而在实际生产中的效果如何尚有待进一步研究。
在本试验条件下,通过饮水方式供给42日龄黄羽肉鸡AKG可提高饲料代谢能和促进蛋白质沉积。
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