酱油中3-氯-1，2-丙二醇检测实验室间比对分析

王卫华，卢晓华，徐锐锋，张庆合

（中国计量科学研究院化学所，北京 100013）

酱油中3-氯-1，2-丙二醇检测实验室间比对分析

王卫华，卢晓华，徐锐锋，张庆合

（中国计量科学研究院化学所，北京 100013）

介绍了由中国计量科学研究院化学所负责实施的酱油中3-氯-1，2-丙二醇检测实验室间比对情况，并针对该项目的检测方法、标准物质选择、前处理方法等进行了技术分析。21家参加比对实验室对样品1检测结果满意率85.7%，样品2结果满意率100%。建议实验人员在检测中可通过空白加标或应用质控样品等手段提高检测结果的准确度。

3-氯-1，2-丙二醇；酱油；比对

氯丙醇具有致癌、生殖毒性等危害，其中以3-氯-1，2-丙二醇最为常见［1］。3-氯-1，2-丙二醇对食品的污染主要源于添加酸水解植物蛋白（HVP），我国在SB 10338–2000 《酸水解植物蛋白调味液》［2］中规定其最大允许限量为1 mg/kg，而在《食品安全国家标准 食品中污染物限量》征求意见稿中，拟将3-氯-1，2-丙二醇的限量定为0.4 mg/kg。由于食品中3-氯-1，2-丙二醇的测定涉及到多种前处理手段，操作较为复杂，中国计量科学研究院化学所选择酱油中3-氯-1，2-丙二醇的测定项目组织了实验室间比对，用于了解各实验室在该检测领域的整体水平，提升检测能力。

1 参加实验室

此次比对报名参加的实验室共25家，每个参加实验室被赋予唯一实验室代码，比对相关报告均按代码标识参加实验室。最终收回结果21家，均为国家级或省级检测机构，具有酱油中氯丙醇测试项目的检验资质。

2 样品制备

为考察实验室在SB10338–2000 《酸水解植物蛋白调味液》以及征求意见中的食品安全国家标准GB 2762 《食品中污染物限量》中分别规定的2个限量水平以及检测限附近的检测能力，设计了本底样品以及0.4 mg/kg和1.0 mg/kg附近两个浓度水平的样品，每个浓度水平配制两份样品，最终配制浓度为样品1：0.36，0.44 mg/kg，样品2：0.90，1.10 mg/kg，每个浓度水平抽取1份样品发放到比对实验室。

测试样品的制备采用向酿造酱油中添加3-氯-1，2-丙二醇的方法。经过对市场样品的筛查，选择质量较为稳定、未检出3-氯-1，2-丙二醇的酿造酱油为原料。取足量原料置于洁净的聚乙烯塑料桶中充分混合，静置消泡后用于样品制备。为了保证制备样品的均匀性，采用3-氯-1，2-丙二醇水溶液进行添加，根据设计的样品浓度向酱油中添加适量溶液，以低速电磁搅拌方式充分混合样品4 h以上，静置过夜。最后将添加样品及本底样品均分装至20 mL洁净安瓿瓶中，于常温下保存。

抽取样品进行均匀性测试，经检验证明制备的样品均匀性良好。根据文献［3］，酱油中3-氯-1，2-丙二醇稳定性在两个月以上，本次比对从发送样品到回收结果报告仅用不到一个月时间，并在收回所有结果后对留存样品进行了测定，实验结果证明4个浓度添加样品稳定性良好。

3 比对结果

考虑到此次比对参加实验室数量较少，采用中位值、平均值等统计结果不能很好地反映各实验室测定结果的准确性，同时，比对实施机构在完成样品制备后，也对样品进行了测定，结果证明测定值与制备值无明显偏差，因此确定以样品制备浓度值为指定参考值进行结果判定。

由于样品1和样品2分别对应两个浓度，为便于数据统计，采用相对值进行计算。对实验室的检测结果，按式(1)计算Z值：

式中：x——实验室检测结果；

X——指定参考值；

σ——变动性度量值（目标相对标准偏差）。

以Z值评价实验室的结果，若∣Z∣≤2，检测结果为满意；若2＜∣Z∣＜3，检测结果为有问题；若∣Z∣≥3，检测结果为不满意或离群值。为了清晰表示各实验室参加本次考核活动的结果，绘制了Z比分数柱状图，见图1、图2。

结果表明，样品1的比对结果中，代码为9，20的实验室检测结果为可疑；代码为17的实验室检测结果为不满意；其余18家实验室检测结果均为满意，占85.7%；样品2的检测结果均为满意。

图2 样品2测定结果Z比分分布图

4 技术分析

本次比对结果表明，大部分参加的实验室均具备3-氯-1，2-丙二醇检测能力，但仍有少量实验室对较低浓度样品的测定结果不满意。从国际限量来看，欧盟对调味品中氯丙醇的限量为0.02 mg/kg［4］，对实验室的检测水平提出更为严格的要求。现根据比对信息进行技术分析，以供相关检测人员参考。

4.1 检测方法

此次比对除代码为003，024，025三家实验室采用了GB/T 18782–2002 《调味品中3-氯-1，2-丙二醇的测定》中规定的GC/MS外标法测定外，其余实验室均采用GB/T 5009.191–2006 《食品中氯丙醇含量的测定》中规定的第一法——内标法进行测定，此次比对中两种检测方法得到的检测结果无显著性差异。根据实验经验，采用外标法测定酱油中氯丙醇对实验操作要求较高，容易出现回收率不稳定，导致结果偏差，而内标法可以对因实验、操作条件波动对检测结果造成的影响起到很好的校正作用，定量结果相对稳定，方法更为可靠。

4.2 选用标准物质

参加比对实验室使用的3-氯-1，2-丙二醇纯品分别来自Dr. E，SIGMA–ALDRICH，West-Chester，Chem. Service，纯度标称值均在98%以上，3-氯-1,2-丙二醇溶液标准物质来自中国计量科学研究院。内标纯品分别来自Cambrige，CDNISOTOPES，SIGMA–ALDRICH，CIL，Dr. E，纯度标称值均在98%以上，内标溶液来自中国计量科学研究院。从结果看不同来源的标准物质对本次考核结果无影响，但从实验室使用便利性以及成本方面来考虑，使用溶液标准物质更有优势。

4.3 样品前处理方法

前处理主要使用国标方法中自制Extrelut NT填料玻璃层析柱，少量实验室使用了固相萃取柱。根据实验经验，自制的层析柱由于每次填料力度不同，无法保证稳定性和重现性，导致样品的回收率不稳定；而商品化的固相萃取柱，柱子间差异不大，理论上回收率应较稳定。但是目前在测定酱油中氯丙醇时使用固相萃取柱进行前处理的相关研究及文献报道较少，不同的固相萃取柱在实验条件、结果准确性、重复性等方面的差别还须进一步研究和考察，以形成可推广的前处理方法。

从衍生化条件来看，比对中各实验室使用的衍生化时间有20 min和30 min，衍生温度为70℃和75℃，从结果看上述条件变化对本次考核结果无影响。七氟丁酰基眯唑衍生试剂在使用和保存过程中易受潮，可能对实验结果产生影响，而层析柱中无水硫酸钠的添加量若不足会导致除水不完全，不仅影响洗脱速度，多余的水分也会影响衍生效果。

5 结论

在即将颁布的GB 2762食品安全国家标准《食品中污染物限量》中，拟将3-氯-1，2-丙二醇的限量定为0.4 mg/kg，本次考核活动中，在该限量水平，仍有个别实验室出现检测结果可疑或不满意结果，应分析检测结果不确定度来源，加强该项目质量控制，通过空白加标实验或应用质控样品等手段，加强对前处理和测定环节的质量控制。

［1］ 刘红丽，李永利，解魁，等.市售酱油中3-氯-1，2-丙二醇的测定［J］.中国卫生检验杂志，2004，14(3): 342.

［2］ SB 10338–2000 酸水解植物蛋白调味液［S］.

［3］ 佟克兴.酱油中3-氯-1，2-丙二醇检测能力验证［J］.理化检验：化学分册，2008，44(4): 380–383.

［4］ 秦红梅，金一和，黄飚，等.食品中3-氯丙醇的污染状况及其毒性研究进展［J］.中国公共卫生，2002，18(12): 1 519–1 521.

Interlaboratory Comparison for Test Result on 3-chloro-1,2-propanediol in Soy Sauce

Wang Weihua， Lu Xiaohua， Xu Ruifeng， Zhang Qinghe
(National Institute of Metrology， P. R. China， Beijing 100013, China)

An interlaboratory comparison on 3-chloro-1，2-propanediol determination in soy sauce was performed by National Institute of Metrology. Result was discussed, and technical analysis was proceeded aim at the determination method，reference standard selection and pretreatment method. The satis fi ed rate of sample 1 was 85.7%, and sample 2 was 100% among 21 laboratories. Proceeding recovery rate experiments or using quality control samples were suggested in order to improve the accuracy of the test.

3-chloro-1,2-propanediol; soy sauce; interlaboratory comparison

O656.32

A

1008–6145(2012)03–0089–03

10.3969/j.issn.1008–6145.2012.03.025

联系人：王卫华；E-mail: wangwh@nim.ac.cn

2012–03–08