祁红英,李师默,宋超
(1.江苏淮安柴米河农业科技发展有限公司,223007;2.江苏淮阴师范学院生科院)
穴盘基质育苗的优点较多,推广速度较快,使用基质穴盘进行育苗已成为蔬菜育苗的主要方式。然而在蔬菜工厂化育苗过程中,苗期常会发生黑茎病,尤期是在温度较高的季节辣椒苗黑茎病表现较为严重,即使苗期不表现症状,定植后也会发病。为此我们对此病害进行鉴定,并采用生防菌剂进行了防效试验。
参试辣椒品种为绿园3号。
对辣椒穴盘育苗中常发生的茎基部黑腐病进行病原物鉴定。取辣椒幼苗中典型的发病植株,依照《植病研究方法》(方中达)中病害标本病原物分离的方法对辣椒发病茎秆样本进行分离。在分离过程中,为了进一步鉴别病原物,分别按照真菌和细菌的分离方法进行样本分离,选取病健交接处的辣椒组织进行分离。
①组织的表面消毒 用70%乙醇液浸泡样本1 min,将样本置于灭菌水中漂洗3~4次,接着放于5.25%的NaClO溶液中浸泡10~15 min,然后用无菌水清洗3~4次,自然风干。
②组织分离 (真菌分离)取表面消毒彻底的病部组织,切成2 cm×2 cm的小块,培养于含链霉素的PDA平板上,25℃培养2 d后观察,设5个重复。2 d后组织周围长出菌丝,且每个重复内生长出来的真菌菌丝形态基本一致,同时镜检的菌丝形态也相同。挑取生长旺盛的真菌菌丝,进行纯化,并将分离得到的真菌进行回接,以确定基质育苗上病害的病原物。
生防菌 AR156、AR156-1、AR156-2 由南京农业大学植物病理学系细菌研究室提供,每种菌剂设1×106、1×107、1×108cfu/mL 3 个浓度梯度,共 9 个处理;化学农药为安克(烯酰吗啉),由德国巴斯夫公司生产;清水处理作为对照(CK)。
采用柴米河蔬菜育苗基质,营养成分为N 0.5%,P2O51.7%,总钾含量4.6%,电导率2.0 mS/cm,有机质含量32%、pH值6.8、含水量35%。
播 种 前 12 h, 分 别 将 AR156、AR156-1、AR156-2菌剂的3个浓度梯度的菌液喷洒到12 L育苗基质中;化学药剂安克播种前以600倍液均匀喷洒到12 L育苗基质中;另设清水对照处理,以上各处理3次重复。于2010年5月31日,将辣椒种子播于72孔重型穴盘。试验在淮安蔬菜科技示范园育苗温室内进行。
图1 辣椒疫病基质育苗苗盘发病症状
图2 辣椒幼苗疫病田间发病症状
辣椒出苗后30 d调查疫病发病率及防效情况;辣椒出苗后35 d随机取样30株测定地上部鲜质量、地下部鲜质量,计算植株综合鲜质量。
发病率(%)=发病株数/总株数×100%;防治效果(%)=[(总对照组病指-总处理组病指)/总对照组病指]×100%;促生效果(%)=[(处理平均产量-对照平均产量)/对照平均产量]×100%。
采用SPSS 13.0分析软件进行平均数、标准差、单因素方差分析。
图3 辣椒坐果期疫病田间发病症状
图4 辣椒疫病游动孢子囊(10X)
表1 出苗后30 d生防菌剂处理对辣椒疫病的防治效果
表2 生防菌剂处理播种后35 d对辣椒基质穴盘幼苗促生作用
图5 生防菌剂对基质穴盘辣椒幼苗的促生效果
对病组织进行分离鉴定,纯化得到病原真菌。经镜检,并结合《真菌鉴定手册》确定该病害由鞭毛菌亚门的辣(甜)椒疫霉真菌(Phytophthora capsici Leonian)侵染所致。其田间症状及病原物孢子形态如图 1~4。
如表1所示,南京农大植病系提供的各生防菌剂对辣椒穴盘育苗中出现的疫病均有一定的防治效果,其中AR156-2表现突出,其1×108cfu/mL浓度处理防效接近80%,比安克防效好。
由表 2所示,AR156-2菌剂 的 1×108cfu/mL浓度处理促生效果也显著高于其他处理,达35.27%,AR156菌剂 的1×108cfu/mL浓度处理促生效果表现也较好,说明生防菌剂能明显增加辣椒地上部与地下部鲜质量,而安克促生效果最差(图5)。
经鉴定,辣椒基质穴盘育苗中幼苗发生的病害为疫病,其病原菌为Phytophthora capcisi。当温度高且湿度大时病原菌容易繁殖,而且病原菌扩展病害很难控制。由于常规甲霜灵类药剂大量使用,导致病原菌对其耐药性增强,防效降低;进口药剂安克作为甲霜灵类农药的替代物,对辣椒疫病有一定的防治效果,但田间试验中其防治效果表现并不突出,且其价格较高。
本试验将生防菌剂接种在蔬菜育苗基质里,利用基质里丰富的营养,使生防菌剂进行大量扩繁,达到抑制有害病菌繁殖的作用。试验中生防菌剂AR156-2(BBS合剂)表现出良好的防病效果和促生效果,对辣椒疫病防效达79.5%,且促生效果也十分明显,达到35.27%,显示出良好的应用前景。