整合素αv、MMP-2、VEGF表达与卵巢上皮性癌侵袭转移的关系

汤艳

[摘要] 目的 检测整合素αv及基质金属蛋白酶（MMP-2）和血管内皮生长因子（VEGF）在人卵巢上皮性癌的表达，探讨整合素与卵巢上皮性癌血管生成及浸润转移的关系。方法 采用免疫组织化学SABC法检测60例卵巢上皮性癌组织及30例卵巢良性肿瘤中整合素αv、VEGF、MMP-2的表达。 结果 60例卵巢上皮性癌中整合素αv、VEGF、MMP-2的阳性表达率分别为68.33%、73.33%和65.00%，30例卵巢良性肿瘤中三者的阳性表达率分别为13.33%、50.00%、43.33%，卵巢上皮性癌与卵巢良性肿瘤组织间3种蛋白阳性表达率差异均有统计学意义（P < 0.05，P < 0.01，P < 0.01）；整合素αv、VEGF、MMP-2与卵巢上皮性癌的分期、分级相关；整合素αv与VEGF及MMP-2的阳性表达均成正相关。 结论 整合素αv在卵巢上皮性癌中高表达，与临床分期及分级相关；与MMP-2及VEGF的表达呈正相关，表明整合素αv促进卵巢上皮性癌的侵袭转移。

[关键词] 卵巢上皮性癌；整合素αv；基质金属蛋白酶-2；血管内皮生长因子

[中图分类号] R737.31[文献标识码] B[文章编号] 1673-9701（2012）29-0049-03

卵巢癌是妇科恶性肿瘤中死亡率最高的一类肿瘤，而卵巢上皮性癌约占卵巢恶性肿瘤的90%，其发展快，预后差，容易发生腹腔内转移。肿瘤细胞的侵袭和转移是恶性肿瘤的主要生物学特征，也是肿瘤患者致死的主要原因。整合素是一大类跨膜蛋白细胞粘附分子家族，整合素表达变化与卵巢癌的发生和发展有关，与多种肿瘤的新生血管形成以及瘤细胞侵袭转移有关。本研究通过检测整合素αv、血管内皮生长因子（VEGF）和基质金属蛋白酶（MMP-2）在卵巢上皮性癌组织中的表达情况，探讨整合素αv与卵巢癌血管生成及浸润转移的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

随机选择2001～2011年我院收治的60例卵巢上皮性癌病例，其中浆液性腺癌39例，黏液性腺癌21例。按FIGO（1988）标准进行手术分期，Ⅰ期和Ⅱ期32例、Ⅲ期和Ⅳ期28例。高分化（G1）30例，中分化（G2）17例，低分化（G3）13例。卵巢良性上皮性卵巢肿瘤30例。

1.2 检测方法

采用免疫组化SABC法，实验步骤按试剂盒说明书进行。标本经甲醛固定，石蜡包埋，切片厚度5 μm。一抗（整合素αv、VEGF及MMP-2）所用浓度均为1：100稀释液。采用已知阳性切片做阳性对照，PBS代替一抗作阴性对照。

1.3 实验结果的判定

染色结果判定方法参考潘颖等[1]研究：显微镜下观察细胞染色情况，细胞浆或细胞膜中出现黄色或棕黄色颗粒为其阳性判定标准，有着色细胞为阳性，无着色细胞为阴性。光镜下随机观察10×40视野，每个视野记录100个目标细胞，计算阳性细胞的百分比和染色强度评分。根据阳性细胞的比例分为，0分：阳性细胞率<25%；1分：阳性细胞率25%～50%；2分：阳性细胞率50%～75%；3分：阳性细胞率≥75%。依据细胞着色强度计分，0分：无着色；1分为浅黄色；2分为黄色；3分为棕黄色。细胞染色数和细胞染色强度评分乘积即为该例标本整合素αv、VEGF及MMP-2的免疫组化染色结果判定分值，以≥1分视为阳性，<1分视为阴性。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 卵巢良性肿瘤组织及卵巢上皮性癌中整合素αv、MMP-2及VEGF的表达结果

3 讨论

恶性肿瘤以侵袭转移和诱导新血管生成为其重要的生物学特性。目前普遍认为肿瘤的浸润转移首先是由肿瘤细胞与基底膜粘附，进而降解基底膜及细胞外基质，使肿瘤突破自身基底膜，在局部增殖形成转移灶，肿瘤自身基底膜的完整性和肿瘤间质血管的形成在肿瘤浸润转移中起关键作用[2]。肿瘤血管生长及基质破坏已成为近年来肿瘤学科研究的热点。

整合素是一种膜镶嵌糖蛋白，是粘附分子中的一个重要组成部分。介导细胞与细胞外基质（ECM）、细胞与细胞之间及细胞与内皮细胞之间的粘附反应。肿瘤细胞与ECM发生粘附和附着是肿瘤侵袭转移的第一步，粘附作用涉及到细胞之间的粘附，细胞和基底膜的粘附等。整合素表达变化与卵巢癌的发生和发展有关。与正常卵巢细胞和良性卵巢肿瘤细胞相比，卵巢癌细胞系中整合素α3、α6、αv和β1的表达显著增高[3]。整合素αvβ6在正常卵巢组织和良性卵巢肿瘤中不表达，在交界性、低度和高度恶性的卵巢肿瘤中的表达逐步增加[4，5]。本实验研究结果表明，整合素αv在卵巢上皮性癌组织的表达与卵巢良性肿瘤组织相比，呈显著高表达，差异有统计学意义（P < 0.01）。且整合素αv的表达在卵巢上皮性癌晚期（Ⅲ～Ⅳ期）组与卵巢上皮性癌早期（Ⅰ～Ⅱ期）组间差异有统计学意义（P < 0.05）。其在卵巢上皮性癌组织中低分化组与高分化组间差异有统计学意义（P < 0.05）。

本实验对整合素αv与VEGF在卵巢上皮性癌组织中的表达进行相关分析，结果发现整合素αv与VEGF的表达在卵巢上皮性癌组织中呈正相关。对整合素αv与MMP-2的表达进行相关分析后发现，整合素αv与MMP-2的表达在卵巢上皮性癌组织中亦呈正相关。提示整合素αv在卵巢上皮性癌浸润转移过程中起到一定的作用。

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（收稿日期：2012-07-16）