天津市南开医院6年来感染病原菌菌谱及耐药性监测

孙兰菊，房 杰，陈明慧

天津市南开医院6年来感染病原菌菌谱及耐药性监测

孙兰菊，房 杰，陈明慧

目的：调查临床分离病原菌菌谱及耐药特征，为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法：采用Bio-Merieux VITEK-ams细菌自动分析仪对临床分离的菌株进行鉴定，采用纸片扩散法进行药敏试验，按CLS1标准判定药敏结果。结果：非重复临床分离的10868株菌中，革兰阴性菌占63.45%，革兰阳性菌占27.21%；真菌占9.34%；大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs的检出率分别为53.46%和41.20%。各种肠杆菌科细菌对亚胺培南仍高度敏感。铜绿假单胞菌对碳青霉烯类药物的耐药率为43%以上。MRSA及MRSCON的分离率分别为65.41%和75.98%，未发现万古霉素耐药株。结论：医院感染病原菌仍以革兰阴性菌为主，已出现泛耐药株；真菌检出率较高，但耐药性处于较低水平。

耐药性监测；细菌；真菌；医院感染

由于抗菌药物的广泛应用，细菌耐药性也更为严重，对临床抗感染治疗带来很大挑战。了解医院感染病原菌的耐药性，对合理使用抗菌药物及制订防治策略非常重要。现将我院2006年1月—2011年12月临床分离病原菌的耐药性报道如下。

1 材料与方法

1.1 菌株来源 天津市南开医院非重复临床分离的10868株病原菌。

1.2 抗菌药物纸片 为英国OXOID公司产品。

1.3 菌株鉴定 采用Bio-Merieux VITEK-ams细菌自动分析仪进行鉴定。

1.4 药敏试验 按照CLSI推荐的纸片扩散法（Kirby-Bauer法)进行。以金葡菌ATCC25923、大肠埃希菌ATCC25922，铜绿假单胞菌ATCC27853，肺炎克雷伯菌ATCC700603为质控菌株。

1.5 结果判断 药敏试验结果按照美国临床实验室标准化协会（CLSI）规定的折点进行判断。

2 结果

2.1 标本来源 10868株临床病原菌，在各类标本中的分布以呼吸道标本最多占45.59%，其次为腹引液（16.78%），胆汁（13.48%），尿液（7.35%），血液（6.54%），切口分泌物（5.78%），胸腹水（1.26%），便（1.03%）。其他2.19%。

2.2 主要病原菌 在10868株非重复临床分离病原菌中，革兰阳性菌2957株，占27.21%；革兰阴性菌6896株，占63.45%；真菌1015株，占9.34%。前10位病原菌依次为大肠埃希菌，肺炎克雷伯菌，铜绿假单胞菌，金黄色葡萄球菌，屎肠球菌，白假丝酵母，粪肠球菌，鲍曼不动杆菌，阴沟肠杆菌，嗜麦芽寡养单胞菌等。见表1。

表1 2006—2011年临床分离病原菌菌谱（n,%）

2.3 革兰阳性细菌的耐药监测 葡萄球菌属：1310株葡萄球菌属中金黄色葡萄球菌占68.85%，MRSA检出率为65.41%。凝固酶阴性葡萄球菌占31.15%， MRSCON的检出率为75.98%。均未发现万古霉素耐药株，但已出现对利奈唑烷和喹努普汀/达福普汀耐药的金黄色葡萄球菌。肠球菌属:1176株肠球菌属中粪肠球菌占41.33%,屎肠球菌占57.31%。粪肠球菌较屎肠球菌敏感，该菌对青霉素、氨苄西林的耐药率分别为17.28%和13.38%。而屎肠球菌均为81.89%。粪肠球菌和屎肠球菌对高浓度庆大霉素耐药率分别为49.59%和32.63%。已出现对喹努普汀/达福普汀耐药的屎肠球菌，均未发现万古霉素耐药株。见表2。

表2 葡萄球菌及肠球菌对常用抗菌药物的耐药率（%）

2.4 革兰阴性细菌的耐药监测 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs的检出率分别为53.46%和41.20%。这两种菌对亚胺培南(和美洛培南)最为敏感，敏感率分别为99.08%、99.38%。6年中已检出耐亚胺培南的大肠埃希菌14株，肺炎克雷伯菌6株。肺炎克雷伯菌的敏感性略高于大肠埃希菌。铜绿假单胞菌1429株，占非发酵革兰阴性杆菌的67.57%，该菌对亚胺培南、美罗培南的耐药率分别为43.95%和46.18%。耐药率在40%以下的抗生素分别为哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星，环丙沙星。鲍曼不动杆菌451株，占非发酵革兰阴性杆菌的21.32%，该菌除对头孢哌酮/舒巴坦和米诺环素有较好的敏感性外，其余的抗生素的耐药率均达50%以上。见表3。

2.5 真菌的耐药监测 真菌的检出率较高，但耐药率处于较低水平。仅伊曲康唑耐药率在25%以下，其他药物的耐药率均低于10%。见表4。

3 讨论

2006—2011年,我院送检的标本中，来源于手术中和术后的标本占42.7%，与呼吸道标本（45.59%）相近。10868株临床分离病原菌中，革兰阴性菌的分离率明显高于革兰阳性菌，常见的病原菌为大肠埃希菌，肺炎克雷伯菌，铜绿假单胞菌，金黄色葡萄球菌，肠球菌及白假丝酵母,这与我院以腹部外科为主的特色相关联，而区别于其他医院[1]。

在革兰阳性菌中，金黄色葡萄球菌检出率占首位，其次为屎肠球菌和粪肠球菌。在葡萄球菌菌属中，MRSA及MRSCON的检出率均达65%以上，且多为多重耐药菌，给临床治疗带来困难。值得注意的是，一些较经济、并少在临床使用的抗菌药物如复方新诺明，对金黄色葡萄球菌、四环素对凝固酶阴性的葡萄球菌都保持较高的敏感率，均达70%以上。经监测发现，对利奈唑烷、喹努普汀/达福普汀耐药的金黄色葡萄球菌，但未发现耐万古霉素的金黄色葡萄球菌。与文报献道[2]一致的是，屎肠球菌和粪肠球菌对青霉素的耐药差异较大，因此细菌鉴定到种是十分必要的。屎肠球菌和粪肠球菌对高浓度庆大霉素的耐药率分别为67.37%和50.41%，提示这部分肠球菌采用庆大霉素联合氨苄西林无协同抗菌作用。粪肠球菌含有对喹努普汀/达福普汀的耐药基因，临床监测均为耐药。已分离出对喹努普汀/达福普汀耐药的屎肠球菌，目前此药尚未在我院使用，其耐药机制尚待研究。未发现对万古霉素、替考拉宁的耐药株。

表3 主要革兰阴性对常用抗菌药物的耐药率（%）

表4 真菌对常用药物的耐药率（%）

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs的检出率分别为53.46%和41.20%，AmpC的检出率分别为21.20%和11.00%。对部分肺炎克雷伯菌进行基因型检测后发现，与文献报道不同[3]，我院以SHV和CTX-M-1组ESBLs为主[4],产酶株对B内酰胺类、氨基糖苷类和喹诺酮类的耐药率亦高于非产酶株。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对头孢吡肟、头孢他啶的耐药率低于头孢噻肟。大肠埃希菌的耐药性强于肺炎克雷伯菌，Ⅰ～Ⅲ代头孢菌素的耐药率已达到50%以上。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对亚胺培南最为敏感，敏感率分别为99.08%、99.38%，其次为头孢哌酮/舒巴坦。令人担忧的是，已检出亚胺培南耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌。感染此“超级细菌”的患者，均为患有多种基础病的重症患者，都存在使用碳青霉烯类抗生素治疗史。感染患者存活率极低。

在非发酵革兰阴性杆菌中，铜绿假单胞菌的检出率高举榜首，且耐药性强于我国的平均水平[5]。铜绿假单胞菌耐药率较低的是哌拉西林/他唑巴坦和阿米卡星，但也达到34.50%和34.64%。已检出对碳青霉烯类、氨基糖甙类、喹诺酮类、单酰胺类、头孢类及酶抑制剂复合制剂等药物均耐药的泛耐菌株，给临床治疗带来一定的困难。在目前细菌耐药性日趋严重的情况下，加强对碳青霉烯类抗生素的耐药性检测及耐药机制的研究，有助于合理应用该类抗生素，延缓该类耐药性的发生和发展。近几年，鲍曼不动杆菌的检出率逐年升高，已成为医院感染及致死相关重要病原菌之一。鲍曼不动杆菌占我院非发酵革兰阴性杆菌的第2位，阴性杆菌的第4位。经监测，该菌除对头孢哌酮/舒巴坦（22.62%）和米诺环素（37.25%）耐药率较低外，其余的抗生素，包括碳青霉烯类的耐药率均达50%以上,与罗鹏等[6]的报道相同。

调查显示，我院的深部真菌的检出率较高，但耐药率处于较低水平。深部真菌感染增多的主要原因为发生严重真菌感染的高危人群增加。深部真菌感染预后差,病死率高，应引起临床医生及相关感染控制部门的重视。

[1]王瑶，徐英春，张小江，等.2005年北京协和医院细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志，2007，7（4）：253-258.

[2]杨青，俞云松，倪语星，等.2009年中国CHINET肠球菌属细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志，2010，10（6）：421-425..

[3]季淑娟，顾怡明，谭文涛，等.中国部分地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱B内酰胺酶基因型研究[J].中华检验医学杂志，2004，27(9):590-593．

[4]孙兰菊，聂晶晶，李东华，等.医院感染肺炎克雷伯菌的表型及基因型研究[J].中华医院感染学杂志，2008,18(11):1516-1621.

[5]张袢博，倪语星，孙景勇，等.2009年中国CHINET铜绿假单胞菌细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志，2010,10(6):436-440.

[6]罗鹏，戴玮，张莉萍.1582株鲍曼不动杆菌的临床分布及耐药性分析[J].重庆医学,2011,40（3）：224-228.

（收稿：2012-06-12 修回：2012-08-02）

（责任编辑 傅 强）

Surveillance of Pathogenic Spectrum and Drug Resistance in Hospital Infections

SUN Lan-ju,FANG Jie,

CHEN Ming-huiDepartment of Microorganism Immunity，Tianjin Nankai Hospital Tianjin（300100)China

Objective To investigate the characteristics of pathogenic spectrum and drug resistance，and to provide evidences of reasonable application of antibiotics. Methods Bacterial strains isolated from clinical samples were identified by bio-Merieux VITEK-ams,subjected to drug susceptibility test by Kirby-Bauer meth⁃od.and the drug sensitivity determined by CLSI. Results In the 10868 bacterial strains isolated from clinical samples,the distribution rate of different gram-negative bacteria was 63.45%,the distribution rate of different gram-positive bacteria was 27.21%,and that of fun⁃gus was 9.34%.Those of Escherichia coli and Klebsi⁃ella pneumoniae producing ESBLs were 53.46%and 41.20%respectively.Imipenem was highly sensitive to En⁃terobacteriaceae.About Pseudomonas aeruginosa,the rate of resistance to Carbapenem drugs was more than 43%, and the rates of MRSA and MRSCON were 65.41%and 75.98%respectively.No strain resistance to vancomycin was found. Conclusion Pathogens of nosocomial infection were mainly gram negative bacteria.Emergence of resistant strains has been found.The fungus positive rate was high,but drug resistance rate was low.

Surveillance of bacterial resistance；bacteria；fungal；hospital infection

R378

A

1007-6948(2012)05-0444-05

10.3969/j.issn.1007-6948.2012.05.004

天津市南开医院微生物免疫室（天津 300100）

孙兰菊；E-mail:tjnkslj@163.com