接骨木促进骨折愈合及抗骨质疏松作用的研究进展

杨洪梅

(通化师范学院 制药与食品科学系，吉林 通化 134200)

接骨木(SambucuswilliamsiiHance)主要分布在中国的东北地区，欧洲亦有栽种，生长在海拔540米至1600米的地区.接骨木又名戳树、蒴树、续骨木、续骨草、大接骨丹、公道老等，性平、味甘苦，无毒.全株植物均可入药，具有祛风湿、接骨续筋、行血通络的功效，主治风湿痹痛、跌打损伤、骨折及创伤出血等症，并可外用.迄今为止，学者们已从接骨木的根、根皮、茎枝、叶、果实等中分离出了多种化学成分.近年药理研究表明接骨木还有降低血脂及抗衰老、健脑、提高视敏度的作用，是一种较理想的保健药物[1].

《本草新编》记载：“接骨木，入骨节，专续筋接骨.”中医学上，接骨木被制成膏药、蜜丸、胶囊等剂型而广泛应用于治疗跌打损伤、骨折[2].在中国，已有几个世纪用接骨木的茎枝治疗骨折的历史[3].大量临床试验表明，应用接骨木或接骨木的复方中药治疗骨折具有疗程短、见效快、疗效高的优点[4].为了进一步研究和开发利用该植物，现将其促进骨折愈合和抗骨质疏松的研究综述如下.

1 提取工艺

现代药理学研究表明，接骨木属植物的低极性溶剂提取部位具有促进骨折愈合和抗骨质疏松活性.杨序娟等[5]将粉碎的接骨木用60%乙醇加热回流提取两次，每次回流3小时.将提取液减压浓缩，浓缩后的浸膏加入水使之形成混悬液，再用有机溶剂进行萃取.氯仿萃取部分经两次硅胶柱色谱分离洗脱，活性部分经Sephadex LH-20柱先初步分离，再用ODS柱色谱和制备型高效液相色谱(HPLC)分离.醋酸乙酯萃取部分同氯仿萃取部分的操作.

将接骨木根皮用95%乙醇[6]或90%乙醇[7]加热回流提取后，常压蒸馏除去乙醇，得到乙醇的提取物.再将此提取物用AB-8型大孔吸附树脂柱色谱分离，依次分别用水、50%乙醇和95%乙醇洗脱，药效学实验证明50%乙醇洗脱部分为有效部位.同样采用柱色谱及HLPC等现代分离技术与手段对该部位进行进一步分离以得到有效成分.

2 新的有效成分

杨序娟等[8]研究了接骨木中抗骨质疏松的活性成分.他们应用以大鼠类成骨细胞UMRl06的增殖为指标的活性追踪分离方法，发现了丁香醛、(-)-松脂素、(-)-1-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-{4-[(IE)-3-羟基-丙-1-烯基]-2-甲氧苯氧基}-1，3-丙二醇、(2R，3S)-2-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3-羟甲基-7-甲氧基-2，3-二氢-5-苯并呋喃丙醇、(-)-2-{4-[2，3-二氢-3-羟甲基-7-羟基-5-(4-羟基-3-甲氧桂皮酰氧丙基)-2-苯唑呋喃基]-2，6-二甲氧苯氧基}-1-(4-羟基-3-甲氧苯基)-1，3-丙二醇和6-(4-羟基-3-甲氧基桂皮酰氧)丙基-3-(4-羟基-3-甲氧苯基)-2-羟甲基-l，4-苯并二氧六环可同时促进UMRl06细胞的增殖和分化，香草醛、香草乙酮、白桦醇、白桦酸、(-)-丁香脂素、(-)-1，2-二(4-羟基-3-甲氧基苯基)-1，3-丙二醇、落叶松脂醇、赤式-1-(4-羟基-3-甲氧苯基)-2-[4-(4-羟基-3-甲氧肉桂酰氧)丙基-2-羟基苯氧基]-1，3-丙二醇、苏式-1-(4-羟基-3-甲氧苯基)-2-[4-(4-羟基-3-甲氧肉桂酰氧)丙基-2-羟基苯氧基]-1，3-丙二醇、(-)-苏式-1-(4-羟基-3-甲氧苯基)-2-{4-[3-(4-羟基-3-甲氧桂皮酰氧)丙基]-2-羟基苯氧基}-3-(4-羟基-3-甲氧桂皮酰氧基)-1-丙醇和(2S，3R)-2-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3-羟甲基-7-羟基-2，3-二氢-5-苯并呋喃丙醇可促进细胞的增殖，对羟基苯甲酸、原儿茶酸、白桦醇、(-)-赤式-1-(4-羟基-3-甲氧苯基)-2-[4-(3-羟丙基)-2-甲氧基苯氧基]-1，3-丙二醇、(-)-苏式-1-(4-羟基-3-甲氧苯基)-2-[4-(3-羟丙基)-2-甲氧基苯氧基]-1，3-丙二醇、(-)-2-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-4-(4-羟基-3-甲氧基苯基)甲基-4-羟基-3-四氢呋喃甲醇、(9E)-8，11，12-三羟基油酸甲酯和天师酸可促进细胞碱性磷酸酶活性，表明这些酚酸及三萜类化合物具有抗骨质疏松的作用.

韩华等[6]应用激光扫描共聚焦技术考察了莫诺苷及接骨木根皮有效部位对细胞内游离钙的影响，实验结果表明莫诺苷具有促进细胞内钙的释放、成骨细胞增殖、分化及矿化的作用，从而得出莫诺苷为促进骨折愈合的有效成分的结论.

3 作用机理

众所周知，血钙和血磷水平的基本恒定是维持人体基本生理功能、骨骼正常生长和更新所必需的前提条件.在研究接骨木促进骨折愈合作用的实验中，韩华等[9]给骨折家兔口服或外敷接骨木有效部位，观察到接骨木各剂量组在用药后血钙水平一直较低，特别是用药24和36天后血清钙与空白组的比较显著降低，具有统计学意义；血磷水平一直较高.血清中钙和磷的乘积则基本恒定，与空白组的值比较没有显著性差异.表明接骨木能降低血钙，促进钙盐的沉积，并能升高血磷，使体内钙磷水平保持恒定.另外接骨木能促进胶原合成以及无机盐的沉积，提高骨痂质量，加速骨折的愈合.

另外，接骨木的活性成分莫诺苷[8]可加速MC3T3-E1成骨细胞的增殖，使MC3T3-El成骨细胞碱性磷酸酶及骨依赖维生素K的骨基质蛋白活性明显增强，使细胞外矿化结节数明显增多，并能瞬时增加细胞内钙离子浓度.

酚酸类、木质素类和个别的三萜类化合物对大鼠类成骨UMRI06细胞的增殖或分化均显示一定的促进作用，是部分通过雌激素受体来调控细胞的功能.这些化合物同时具有细胞选择性，选择性的作用于骨细胞，而对乳腺癌细胞没有影响，或者由于两种细胞系含有的雌激素受体亚型不同，而导致结果不同.不论哪一种假设都提示我们，如果这些化合物应用于体内治疗骨质疏松的话，很有可能会成功的避免雌激素样副作用[10].谢芳等[11]报道了接骨木提取物具有类雌激素的抗骨质疏松的作用，但与雌激素相比，接骨木提取物的作用具有更高的组织选择性[12].并且，(-)-赤式-1-(4-羟基-3-甲氧苯基)-2-[4-(3-羟丙基)-2-甲氧苯氧基]-1，3-丙二醇不但可以调节大鼠成骨细胞UMR106的骨相关基因的表达，还能够促进大鼠颅骨成骨细胞特异性转录因子Cbfα1、成骨细胞分化早期功能标志性基因碱性磷酸酶(ALP)以及成骨细胞骨钙素(OCN)基因的表达；同时表明此化合物对破骨细胞性骨吸收具有抑制作用[12].有报道称，接骨木提取物通过抑制骨再吸收过程和刺激骨再形成过程来改进骨性质[13].另外，在运用乳鼠顶骨的器官培养系来研究接骨木茎枝抑制骨吸收的实验过程中发现，其甲醇提取物的乙酸乙酯部分明显抑制甲状旁腺激素的促进骨吸收作用[14〗.

虽然对接骨木在促进骨折愈合和抗骨质疏松方面的研究已取得了显著的成果，但大量问题尚未完全弄清楚.以后应继续开展化学成分研究，以及作用机理的探索.随着研究的深入，期待开发出安全、有效的新药物，接骨木必将在临床上得到更广泛的应用.

参考文献：

[1]傅沛云.东北植物检索表[M].北京:科学出版社，1995：623.

[2]林敏，梅娇.复方接骨木胶囊促进股骨颈骨折愈合临床观察[J].中国中医急症，2010(8):1306-1308.

[3]Chinese Materia Medica of State Administration of Traditional Chinese Medicine Chinese Bencao[M].Shanghai:Shanghai Science and Technology Press，2000：545-547.

[4]Peng L，Ko C，Siu S.et al.In vitro & in vivo assessment of a herbal formula used topically for bone fracture treatment[J].Journal of Ethnopharmacology，2010，31:282-289.

[5]杨序娟，等.接骨木中的酚酸类化合物及其对大鼠类成骨细胞UMRl06增殖及分化的影响[J].中草药，2005，36:1604-1609.

[6]韩华.接骨木根皮促进骨折愈合有效部位化学成分和药理作用研究[D].哈尔滨：黑龙江中医药大学，2006.

[7]吕芳.接骨木根皮化学成分的研究[D].哈尔滨：黑龙江中医药大学，2002.

[8]Yang XJ，Wong MS，Wang NL et al.Lignans from the stems of Sambucus williamsii and their effects on osteoblastic UMR106 cells[J].J Asian Nat Prod Res，2007，9:583-591.

[9]韩华，闫雪莹，匡海学，等.接骨木的研究进展[J].中医药信息，2008，25(6):14-18.

[10]杨序娟.接骨木中抗骨质疏松活性成分的研究[D].沈阳：沈阳药科大学，2005

[11]Xie F，Wu CF，Zhang Y et al. Increase in bone mass and bone strength by Sambucus williamsii HANCE in ovariectomized rats[J].Biol Pharm Bull，2005，28:1879-1885.

[12]解芳.接骨木提取物抗骨质疏松作用及作用机理研究[D].沈阳：沈阳药科大学，2005.

[13]Zhang Y，Li Q，Wan HY et al. Study of the mechanisms by which Sambucus williamsii HANCE extract exert protective effects against ovariectomy-induced osteoporosis in vivo[J].Osteoporos Int，2011，22:703-709.

[14]Li H，Li J，Prasain JK et al. Antiosteoporotic activity of the stems of Sambucus sieboldiana[J].Biol Pharm Bull，1998，21:594-598.