子宫单发与多发肌瘤雌、孕激素受体表达差异

梁明珠 祁秀娟

1.青岛大学医学院附属医院妇产科，山东青岛266003；2.山东省蓬莱市人民医院妇产科，山东蓬莱 265600

近年来，子宫肌瘤的发病率呈逐年上升的趋势，但其病因、发病机制至今尚未完全明了。目前认为子宫肌瘤是一种激素依赖性良性肿瘤，在子宫肌瘤生长过程中，雌、孕激素的细胞作用主要为诱导转录、合成调节、分化蛋白质，而这一作用发生是雌、孕激素通过靶器官内的雌激素受体（estrogen receptor，ER）、孕激素受体（progesterone receptors，PR）才能起作用，因此ER、PR和子宫肌瘤关系的研究成为关键。根据子宫肌瘤与子宫肌壁的关系分肌壁间肌瘤、浆膜下肌瘤、黏膜下肌瘤。各种类型肌瘤同时发生在一个子宫为多发性子宫肌瘤。临床上子宫多发肌瘤较单发肌瘤常见。分子生物学研究结果提示，子宫肌瘤是由单克隆平滑肌细胞增殖而成；多发子宫肌瘤是由不同克隆细胞形成。本研究旨在通过检测子宫多发、单发肌瘤组织与周围正常肌组织中ER、PR在增殖期及分泌期的表达差异，试图探讨单发与多发肌瘤发病机制与治疗对策，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2010年1～12月在笔者所在医院行子宫肌瘤手术患者96例，年龄40～50岁，子宫单发肌瘤患者平均年龄（45.6±3.2）岁，多发肌瘤患者平均年龄（45.3±3.7）岁，月经规律，无绝经，术前6个月内未服用激素类药物，无其他疾病史。手术时间选择：增殖期中期、分泌期中期。术后病理诊断：子宫平滑肌瘤，其中子宫多发肌瘤增殖期25例，分泌期25例；子宫单发肌瘤增殖期23例，分泌期23例。

1.2 方法

1.2.1 取材 所有患者均是手术后立即取子宫肌瘤组织及周围正常肌组织各1块，约1 cm×1 cm×1 cm，经10%多聚甲醛固定，常规脱水后石蜡包埋，连续切片备用。

1.2.2 链霉素蛋白-过氧化物酶（sp）免疫组化学法 按试剂盒（ER11302611，PR11305001，北京中杉生物试剂公司）说明书操作。

1.2.3 判定标准 显微镜（日本Olympus）下观察每份标本。结果判定采用免疫组织化学评分（H-score）法[1]。随机选择5个高倍镜视野（×200），每个视野计数100个细胞中的阳性细胞数，取平均结果得出阳性细胞百分率。以I代表染色深浅，共0～3分：0分为不着色；1分为着色浅、呈淡黄色；2分为中度着色、呈深黄色；3分为着色深、呈棕色或深棕色。Pi代表每一着色程度细胞所占比例为0%～100%。H-score=ΣPi（I+1），满分为4分。

表1 ER、PR在增殖期、分泌期的多发、单发子宫肌瘤组织与周围正常子宫肌层组织中的表达（x ± s）

1.3 统计学处理

采用SPSS17.0软件对数据进行统计学分析，各组数据分别以（x ± s）表示，两独立样本行t检验（双侧），P＜ 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

ER、PR在子宫多发肌瘤、单发肌瘤及周围正常肌层中表达情况，见表1。子宫多发、单发肌瘤组织的ER、PR表达明显高于周围正常肌组织，差异有统计学意义（P＜0.05）；子宫多发肌瘤组织的ER、PR表达水平均明显高于子宫单发肌瘤，差异有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨论

子宫肌瘤好发于生育期女性，在妊娠期随着妊娠周数增加，子宫肌瘤也随着增长，而绝经后女性子宫肌瘤会缩小，这说明激素对子宫肌瘤的生长起着举足轻重的作用。近年来雌、孕激素与子宫肌瘤关系研究较深入。国外研究表明，培养的子宫肌瘤细胞中单独加入雌激素、孕激素后均可促进肌瘤细胞的生长，而对培养的子宫平滑肌细胞加入雌激素后，细胞开始出现增殖，增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）的表达增强，加入孕激素并无此现象。由此可推测E2首先与子宫肌瘤细胞的ER结合，后诱导肌瘤细胞的表皮生长因子受体（EGF-R）的表达，再促进PCNA的表达，而孕激素也是首先与PR结合，诱导肌瘤细胞产生大量的上皮生长因子 EGF样蛋白，再促进肌瘤细胞的增殖，所以雌、孕激素共同作用才能促进肌瘤细胞的增殖。

子宫肌瘤患者血液中雌二醇、孕激素水平较未患子宫肌瘤者并没有增加，说明雌、孕激素促肌瘤生长的作用是靶器官局部对性激素反应性增强。北京大学人民医院利用分子生物学技术，发现肌瘤组织比周围正常肌组织孕激素受体mRNA及其表达蛋白均有增加，说明孕激素对肌瘤局部生物学效应较其周围正常肌层作用强，细胞内转录活化作用强，提示孕激素增强肌瘤增生活性的机制可能是通过局部受体表达增强来实现的。

ER、PR均是可溶性大分子糖蛋白，分别能识别特异性的雌、孕激素及其类似物，并与之结合。雌、孕激素对靶器官作用强弱通常与靶组织内ER、PR水平高低有关。许多研究证明子宫肌瘤内ERmRNA、PRmRNA及其表达蛋白均高于周围肌层组织，相应的ER、PR含量也高于其周围正常肌层组织[2-4]。应用促性腺激素释放激素激动剂（GnRH-a）治疗后的子宫肌瘤中ER、PR的表达明显下降，说明子宫肌瘤的生长与ER、PR的水平有关。Ichmura等[5]利用针取活检标本作连续监测后得出：平滑肌瘤细胞中PR含量与子宫肌瘤的生长密切相关，而ER的含量却无此相关性，认为PR对子宫肌瘤生长的作用强于ER。但Lessl等[6]指出：同正常子宫肌组织相比，子宫肌瘤ER、PR的表达水平并没有发生变化，从而认为ER、PR在子宫肌瘤发生中的作用不大。本研究通过采用免疫组化法测定ER、PR在子宫多发肌瘤、单发肌瘤与周围正常肌层组织周期变化表达情况，结果显示：（1）无论在增殖期还是分泌期，子宫多发、单发肌瘤组织的ER、PR表达水平明显高于周围正常肌组织，说明子宫肌瘤能结合大量的ER、PR，从而使子宫肌瘤局部呈高激素状态，进而刺激子宫肌瘤细胞的不断分裂增生，使肌瘤体积增大。（2）雌、孕激素对靶器官作用强弱通常与靶组织内ER、PR水平高低有关。本研究显示无论在增殖期还是分泌期，子宫多发肌瘤组织的ER、PR表达水平均明显高于子宫单发肌瘤。说明在体内激素水平相同时，由于子宫多发肌瘤表达ER、PR高于单发肌瘤，多发肌瘤对激素反应性强于单发肌瘤，因此多发肌瘤增殖较单发肌瘤快。

子宫肌瘤的发病原因、机制较为复杂，目前虽然有较深入研究，但却没有突破性进展。对患子宫肌瘤且年龄＜45岁、月经无明显改变、肌瘤较小的患者，应注重保留子宫的问题。治疗子宫肌瘤药物仍以激素类药物为主如GnRH-a和米非司酮。研究显示，子宫多发肌瘤较单发肌瘤ER、PR表达水平高，对子宫单发、多发肌瘤患者，应用激素类药物或抑制剂时不能统一用量，可能子宫多发肌瘤需要药量较单发肌瘤要大一些，尽量减慢或抑制子宫肌瘤生长，从而使患者免受手术之苦。

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