通便化痔颗粒对痔疮模型大鼠的疗效

李雪梅，邵 燕，周建平

（北京市药品检验所药物安全评价中心，北京 100035）

痔疮在临床上是一种常见病、多发病，治疗此病症的药物多为洗、坐浴及外用等。通便化痔颗粒是口服制剂，临床用于治疗内外混合痔疮，风热瘀阻证等。文献中用酸灼伤大鼠肛门周围皮肤多以用肉眼观察，对溃疡和愈合情况进行评分，未见其他方法。我们认为这种观察方法单一，对溃疡的程度及愈合的过程不能全面客观地进行评价，不能合理地反映出药物对治疗痔疮的药理作用。本文根据其功能主治主要对大鼠皮肤灼伤动物模拟临床痔疮模型，进行方法学的研究和主要药理作用的验证。

1 材料和方法

1.1 药物和试剂

通便化痔颗粒浸提浓缩液，由北京华洋奎龙药物研究中心提供，批号：20101010；

龙血竭胶囊，批号：100108，做为阳性药用0.5％羧甲基纤维素钠溶液配制成浓度为0.63 g/kg。

1.2 实验动物

SD大鼠180～200 g，50只，雌雄各半。由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，生产许可证号：SCXK（京）2006-0009；使用许可证号：SYXK （京）2010-0023。

1.3 仪器

Nikon光学显微镜，日本Nikon生产

1.4 实验方法

对盐酸致大鼠肛门周围皮肤灼伤（溃疡）的影响

造模：选健康SD品系大鼠50只，雌雄各半，将其肛门周围毛发剪去并用刀划伤，用10 mol/L盐酸1m L涂抹于去毛皮肤表面，24 h后出现红肿、灼伤后按体重随机分为5组，即模型对照组、通便化痔颗粒高（14 g生药/kg）、中（7 g生药/kg）、小（3.5 g生药/kg）剂量组和阳性对照组（龙血竭胶囊0.63 g/ kg）。各组给药体积为1.0 m L/100 g体重，模型对照组灌胃同体积去离子水。每日1次，连续给药10 d。每组每日观察灼伤面愈合情况。末次给药后1 h，将大鼠麻醉处死，肉眼观察评分后，取肛门组织进行病理组织学检查。与模型对照组比较，进行统计学计算。

1.5 统计学方法

SPSS10.0统计软件进行统计处理，数据以均数±标准差（¯±s）表示，组间比较采用 t 检验。P＜0.05为差异有显著性。

2 结果

试验结果表明：通便化痔颗粒在14 g生药/kg、7 g生药/kg、3.5 g生药/kg的剂量下，对用10 mol/ L盐酸灼伤肛门周围皮肤的大鼠，连续给药10 d，肉眼观察大、中剂量组大鼠灼伤面明显恢复，与模型对照组比较，差异有显著性意义。

评分标准：“-”表示灼伤面全部结痂，计为10分

“+”表示灼伤面结痂占灼伤面积的

80％，计为8分

“++”表示灼伤面结痂占灼伤面积的

50％，计为6分

“+++”表示灼伤面外周有结痂现象，

仍有出血，计为4分

“++++”灼伤面红肿、出血，未见结

痂，计为2分结果见表1。

取上述大鼠肛门组织置于10％福尔马林溶液中固定，HE染色，光镜下观察其病理组织学改变。病理评分标准参照西医诊断标准，根据溃疡大小、坏死程度，肉芽组织增生程度半定量分为4级（+—++++），进行打分。分级评分标准见表2。

试验结果表明：通便化痔颗粒大、中剂量组肛门组织发生溃疡、坏死的只数明显少于模型对照组，平均积分与模型对照组比较，差异有显著性意义（P＜0.01）结果见表3及彩插1图1，图2，图3。

对盐酸致大鼠肛门周围皮肤灼伤（溃疡）的影响

表1 对盐酸致大鼠皮肤灼伤面肉眼观察积分情况（n=10）Tab.1 The naked eye observe the point of Hydrochloric acid induced rat skin burn area（n=10）

表2 分级评分表Tab.2 Ratings Scale

通便化痔颗粒大、中、小3个剂量组肉芽组织增生平均积分明显优于模型对照组，组织修复能力强，与模型对照组比较差异有显著性意义（P＜0.01）。结果见表4。

3 讨论

3.1 痔疮动物模型的建立与评价

通过将SD大鼠肛门周围皮肤用刀划伤，然后用盐酸灼伤，10 d后取下灼伤组织，10％福尔马林溶液中固定，HE染色，病理显示肛门周围组织均出现不同程度的炎症改变，出现溃疡及坏死组织，表明造模合理、成功。建立这种痔疮动物模型和新的观察方法，是为今后进一步验证口服药物对痔疮的药理作用奠定了基础。本试验方法客观、可靠、方法简便、可行。

表3 各试验组肛门组织病理（溃疡、坏死）积分情况（n=10）Tab.3 Experimental group anal tissue pathology（ulcers，necrosis）points situation.（n=10）

表4 各试验组肛门组织肉芽组织增生积分情况（n=10）Tab.4 Experimental groups anal granulation tissue hyperplasia points situation（n=10）

3.2 通便化痔颗粒对痔疮模型大鼠的疗效评价

祖国医学对痔的病因机理认识具有悠久的历史。痔的发病通常为阴阳失调，脏腑气血虚损，在加湿、热、风、燥等邪之作用等等。治疗时应以内服为首要，通便化痔颗粒主要由当归、白芷、连翘、败酱草、赤芍等提取制成，具有活血清热，散风解毒等功效。根据中医的辨证理论，调节整个机体，组方中的当归对麻醉犬、兔的在体肠管及膀胱等平滑肌有兴奋作用，对离体兔肠则为抑制作用，具有镇痛、消炎作用。白芷、连翘具有抗菌作用。败酱草入肝、胃、大肠经，起清热解毒，排脓破瘀作用。赤芍对兔离体或在体的肠管呈兴奋作用，高浓度为抑制作用，同时还具有抗炎、抗溃疡作用。以上诸药通过活血清热，散风解毒，佐以通腑等功效起到通便化痔的作用。动物试验也表明它具有修复被盐酸灼伤的皮肤，肉芽组织增生平均积分明显优于模型对照组，大、中剂量组肛门组织发生溃疡、坏死的只数明显少于模型对照组，平均积分与模型对照组比较，差异有显著性意义（见病理照片）；通过其它试验进一步表明它的药理作用：通便化痔颗粒能缩短小鼠出血、凝血时间。促进小鼠肠蠕动，增加便秘小鼠粪便排出的总粒数。有效地抑制小鼠因物理及化学因素引起的疼痛，提高痛阈值。这表明通便化痔颗粒的药效学研究与临床的药理作用相吻合，为临床使用提供了依据。

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