慢性心力衰竭病人外周血炎性因子和Th1/Th2细胞因子变化与心功能关系的临床研究

古锡钦

广东省梅州市五华县人民医院，广东梅州 514400

慢性心力衰竭（Chronic Heart Failure,CHF）是由多种原因引起心脏结构和功能发生变化，进而导致心室射血和（或）充盈功能低下，并出现相应的临床表现的综合征，它是大多数心血管疾病的最终归宿和死亡原因。在我国，慢性心力衰竭患者将近400万人[1]，有约50%的患者会在5年内死亡[2]。

越来越多的证据表明，炎症在心力衰竭的发生和发展中起着重要的作用[3]。研究表明，在心力衰竭的患者的血清炎性标志物如TNF-α、IL-18和CPR等均升高，且与心力衰竭的严重程度呈正相关[4]，但是到目前为止，仍然没有足够证据证明可以利用炎性标志物去指导心力衰竭的治疗[5]。该实验研究心力衰竭患者血清标志物和细胞因子与心功能的关系，旨在为心力衰竭的炎症因子变化提供科学依据，并为临床治疗疗效提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

观察组60例，其中男性32例，女生28例，平均年龄为（52.7±6.9）岁，其中NYHAⅡ级 18例 ，NYHAⅢ级23例，NYHAⅣ级19例；对照组50例，其中男性23例，女性27例，平均年龄为（54.1±7.2）岁。

1.2 纳入标准

入选的110病例分别来自某市人民医院，参照陈灏珠主译[美]《临床心脏病学》充血性心力衰竭诊断的主要标准和次要标准，并根据美国纽约心脏病学会（NYHA）分为心功能分为4级。观察组应符合慢性心力衰竭的诊断标准，NYHA心功能分级在Ⅱ～Ⅳ级，年龄介于40～80岁的患者，排除梗阻性心肌病、瓣膜病、缩窄性心包炎、大量心包积液、肺栓塞、急性心肌梗死，感染性心内膜炎，以及合并严重的肝、肾功能不全，内分泌系统、造血系统等严重原发性疾病者。对照组选择在以上医院体检的健康人，年龄介于40～80岁。

1.3 观察指标和方法

入院后当天进行对患者进行心功能分级。分别采集患者和健康人上肢肘静脉血4mL,离心分离血清，采用ELISA法检测CRP、TNF-α 和 IL-6。选择 IFN-γ/IL-4代表 Th1/Th2比值，分别采用ELISA法检测。检测程序：①加样：标准曲线设置：以一条8孔设置，每孔加入样品稀释液100μL，取样品100μL至A孔依次稀释至G孔(第7孔)，第8孔为空白对照，各孔浓度依次为：2000，1000，500，250，125，62.5，31.3，0pg/mL ， 必要时置复孔。余各孔依次加入阴性血清及待测样品各100μL。②将反应板置37℃120min。③洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤6次向滤纸上印干。④每孔加酶标抗体工作液100μL。⑤将反应板置37℃45～60min。⑥洗板：同前。⑦每孔加OPD底物工作液100μL置37℃暗处反应5～10min。⑧每孔加入50μL终止液混匀。⑨于490nm处测吸光值，换算出中因子表达量。

1.4 统计方法

2 结果

2.1 心力衰竭与健康人血清CRP、TNF-α和IL-6水平

心力衰竭患者外周血CRP、TNF-α和IL-6显著升高，且与心功能的密切相关，表现为随着心功能的恶化，上述炎性因子升高越明显。见表1。

表1 两组血清CRP、TNF-α和IL-6水平比较(±s)

表1 两组血清CRP、TNF-α和IL-6水平比较(±s)

注：* 与对照组相比，P＜0.05；△与 NYHAII级相比，P＜0.05；★与 NYHAIII级相比，P＜0.05。

组别 例数CRP(mg/L)TNF-α(ng/L) IL-6(ng/L)NYHAII级NYHAIII级NYHAIV级对照组18 23 29 50 6.21±1.89*★6.89±2.02*7.57±2.11*△3.57±1.15△★13.97±3.24*★16.23±3.59*18.55±3.61*△4.31±2.09△★19.27±4.26*★25.78±4.89*△34.44±6.12*△8.25±1.26△★

3.2 心力衰竭与健康人外周血Th1/Th2比值

心力衰竭患者外周血Th1/Th2比值明显升高，随着心功能的恶化，其升高趋势越明显，提示T细胞亚群Th1/Th2比值与心功能关系密切，与心功能的恶化程度呈正相关。见表2。

表2 两组外周血Th1/Th2比值比较（±s）

表2 两组外周血Th1/Th2比值比较（±s）

注：* 与对照组相比，P＜0.05；△与 NYHAII级相比，P＜0.05；★与 NYHAIII级相比，P＜0.05。

组别 例数IFN-γ(pg/mL)IL-4(pgL/mL) IFN-γ/IL-4 NYHAII级NYHAIII级NYHAIV级对照组18 23 29 50 68.63±8.24*★73.91±10.14*82.44±11.58*△48.21±7.52△★39.57±5.88★35.31±5.47*34.56±4.92*△45.11±6.97△★1.73±1.26*★2.09±1.31*2.38±1.40*△1.07±0.12△★

3 讨论

Th1，Th2型细胞是CD4+T辅助细胞的两个亚群。Th1细胞主要分泌细胞因子IL-2，IFN-γ等，具有免疫杀伤作用。Th2细胞主要分泌细胞因子 IL-4，IL-5，IL-6，IL-9，IL-10 及 IL-18，具有免疫抑制作用[6]。正常情况下，Th1/Th2细胞因子相互介导，相互抑制，处于平衡状态，当两者之间的比例失衡时往往会引起多种疾病的发生。Th1及其分泌的细胞因子代表促炎作用，Th2及其分泌的细胞因子代表抑炎作用[7]。

炎症与心力衰竭的发生发展密切相关[8]，该实验的结果亦表明，心力衰竭的患者外周血清中一些常见的炎性因子水平明显升高，且与心功能的恶化程度呈正相关。Th1/Th2的失衡也就是机体促炎作用和抑炎作用的失衡，当Th1/Th2的比值上升时，促炎作用大于抑炎作用，机体呈现出明显的炎症状态。在该实验的观察中，心力衰竭患者Th1/Th2比值上升，说明患者机体内炎症活动明显，炎症的发生与心衰两者相互影响，相互促进。

在临床治疗中，监测血清炎症因子如CRP、IL-6和TNF-α等的变化，以及Th1/Th2细胞的改变，对于判断心衰患者的病情发展和严重程度均有重要的参考价值，然而，目前临床上仍然没有足够证据证明可以利用炎性标志物去指导心力衰竭的治疗[5]。

[1]何文俊,张涛,蒋学俊,等.炎症因子与慢性心力衰竭[J].中华临床医师杂志：电子版，2011，5（2）：457-460.

[2]顾东风,黄广勇,何江,等.中国心力衰竭流行病学调查及其患病率[J].中华心血管病杂志,2003,31(1):3-6.

[3]Wrigley Benjamin J,Lip Gregory YH,Shantsila Eduard.The role of monocytes and inflammation in the pathophysiology of heart failure[J].European Journal of Heart Failure,2011,13(11):1161-1171.

[4]周素平.炎症和心力衰竭[J].心血管病学进展，2007，28(3):493-496.

[5]Biykem Bozkurt,Douglas L,Mann,et al.Biomarkers of inflammation in heart failure[J].Heart Failure Reviews,2010,15(4):331-341.

[6]Ismail Tabasum,Shafi Syed,Gupta Amit,et al.Study of the adjuvanticity of lysine lipopeptides;carbamate analogs elicit strong Th1 and Th2 response to ovalbumin in mice[J].International Immunopharmacology,2011,11(11):1855-1863.

[7]Yang Xia,Qian Feng,He Hai-Yang,et al.Effect of thymosin alpha-1 on subpopulations of Th1,Th2,Th17,and regulatory T cells(Tregs)in vitro[J].Brazilian Journal of Medical and Biological Research，2012,45(1):25-32.

[8]于荣波,徐伟丽,曹磊.心力衰竭患者血清炎症因子变化与心功能的关系[J].山东医药，2009，49（33）：67-68.