博卡病毒的感染状况

2012-01-26 12:05韩庆彦贺奋义高生智尚立宏姚奕蕾
中国兽医杂志 2012年11期
关键词:热病猪群断奶

韩庆彦,贺奋义,高生智,尚立宏,周 峰,姚奕蕾,王 佳

(甘肃省动物疫病预防控制中心,甘肃 兰州730046)

自2005年从幼儿检测到博卡病毒(Boca virus)以来,包括中国在内的很多国家报道了人的博卡病毒感染和研究情况,自2009年从猪群中检测到博卡病毒以来,包括从临床健康猪、断奶多系统衰竭综合征、高热病和具有腹泻症状的猪群中检测到博卡病毒的报道也陆续增多。但其致病性研究还不够,进一步研究博卡病毒具有重要的现实意义。

1 病毒

博卡病毒(Boca virus)是细小病毒科、细小病毒亚科、博卡病毒属的成员。包括人博卡病毒(Human Boca virus,HBoV)、猪博卡病毒(Porcine Boca virus,PboV)。PboV 与犬小病毒(Canine minute virus,MVC)和牛细小病毒(Bovine parvovirus,BPV)同源性较高。

博卡病毒是单股线状DNA病毒,其基因组全长约为4.8kb~5.2kb,包括3个开放性阅读框(ORFs),其中ORF1编码非结构蛋白NS1,ORF2编码结构蛋白VP1/VP2,ORF3位于基因组的中间,编码磷酸化的非结构蛋白 NP1[1-2]。

研究发现,博卡病毒的非结构蛋白(NS1)较为保守,而两个衣壳蛋白(VP1/VP2)较易发生突变,这提示不稳定的VP1/VP2基因突变可能是导致新种群产生和病毒逃逸免疫监视的重要原因和机制,而稳定的NS1基因则可能成为制备疫苗和药物作用的靶点[3]。

基于ORF3基因序列,将曾经报道的6个PBoV分为四种类:PoBoV1(猪博卡病毒,简称PBoV1),PoBoV2(猪细小病毒 4,简称 PPV4),PoBoV3(PBoV1/PBoV2)和 PoBoV4(6V/7V),PoBoV3和PoBoV4分别包括2个基因型[4]。

通过对PBoV全长基因组的测序与分析,发现我国所流行的PBoV与瑞典的毒株同源性非常高,PBoV基因序列与犬小病毒(CMV)的亲缘关系更为接近,而与引起猪繁殖障碍的猪细小病毒的基因组同源性为52%~53%。

2 感染状况

HBoV最早于2005年,在一位患下呼吸道疾病的瑞典儿童体内被发现[5]。已有许多国家报道了HBoV的流行[6]。2006年中国疾病预防控制中心也检出HBoV[7]。迄今来自五大洲的数据均发现,HBoV常从患急性呼吸道疾病(喘气、咳嗽、流鼻涕和发烧等)的病人(大多数来自儿童)体内检测到,而且有呼吸道症状儿童的病毒载量高于发热惊厥或没有显著呼吸道发现物的儿童。HboV也可从急性腹泻的婴儿粪便中检测出,在西班牙,患有急性腹泻儿童的527份粪标本中有48份检测到HBoV;目前临床尚无 HBoV感染的特效治疗方法[8]。HBoV感染可以单独存在,也可与其他病毒混合感染,其混合感染率为7%~50%[9-10],最常见的是与呼吸道合胞病毒共同感染,其次是与甲型流感病毒的共同感染。所报道病例的流行率从加拿大病人的1.5%到约旦呼吸道感染儿童的18%[11]。

2009年,瑞典科研人员利用宿主DNA清除、随机多重置换扩增方法(random multiple displacement amplification,MDA),在患仔猪断奶后多系统衰竭综合征的猪淋巴结中检测到博卡病毒,命名为猪博卡病毒(Porcine Boca virus,PBoV)[12]。文献报道的中国健康猪群PBoV阳性率为7.3%~16.7%,断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪高热病、仔猪腹泻等发病猪群 PBoV 的 阳 性率为 30% ~100%[13-16、19],断奶仔猪的感染率明显高于哺乳仔猪。暗示其对猪有一定的致病性,但未能按照“科赫法则”进一步证实PBoV是致病性病原。自2006年我国暴发猪高热病以来,其主要病原被确定为猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株,但在猪繁殖与呼吸综合征病毒阳性的病料中也频繁地检出猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病病毒及猪瘟病毒等[17-18]。对2009年中国部分省市猪场的191份疑似患高热病的病料(组织108份、血清76份及精液7份)检测发现,PBoV的总阳性率为39.3%(75/191),组织59.3%(64/108)、血清14.5%(11/76)、精液0%(0/7),其中阳性率大于70% 以上样品(来自北京、河北、安徽、新疆)所在猪场有着高的发病率和死亡率[19]。

自2011年年初至今,国内很多猪场陆续暴发了传染病性腹泻病,主要集中在产房哺乳仔猪,哺乳仔猪死亡率在20%~85%,抗生素治疗和疫苗免疫均未取得好的效果,疑似为新的病毒病,同时有些科研单位也报道,从腹泻仔猪的粪便中检测出PboV[13];也有研究认为,猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus.PEDV)所致[20-21],但传统的流行性腹泻和传染性胃肠炎弱毒苗、灭活苗反复免疫,效果不明显[13],死亡率可达 100%[21],仅9.52%(2/21)的猪场没有发病,而且有66.67%(14/21)以上的猪场首次发病后20~60d左右再次发病。本次猪腹泻疫情中,PboV的致病情况怎么样,还需进一步研究。

3 检测

目前国内尚未见到成功分离病毒的报道。

HBoV检测方面的研究工作均采用PCR扩增和实时荧光定量PCR扩增技术,科学家正在建立ELISA、DFA、IFA、Western Blot等[5、9]多种检测方法,用于HBoV的临床诊断,并为进一步研究提供基础。

已报道的PBoV检测方法主要是根据Gen-Bank上递交的猪博卡病毒核苷酸序列(登录号:FJ872544、GU902967-GU902971)设计特异性引物,建立的PCR检测方法,并将NP1基因克隆、原核表达,据报道已经建立的PCR方法特异性强、敏感度高、重复性好,表达的NP1蛋白具有良好的反应原性[19、22]。

4 小结和前景

博卡病毒作为一种新发现的病毒,是对人呼吸道感染病毒的重要补充。在猪群中,断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪高热病、猪腹泻病例以及健康猪群中均检测出了该病毒。目前,HBoV和PBoV的分子生物学和流行病学研究方面已取得一定的成就,但其检测方法需要进一步的改进,致病性等问题需进一步研究,特别是PBoV在2011年年初以来国内猪群腹泻病中的致病作用,以便指导HBoV和PBoV引起疾病的防治。

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