波叶山蚂蝗化学成分研究

张 龙， 张前军，*， 康文艺， 刘 超， 卢永仲

(1.贵州大学精细化工研究开发中心，贵州贵阳550025;2.贵州大学化学与化工学院，贵州贵阳550025;3.河南大学中药研究所，河南开封475004.)

波叶山蚂蝗Desmodium sequax Wall为豆科Leguminosae山蚂蝗属植物，又名瓦子草，野豆子，牛巴嘴，山蚂蝗，过路黄，檀草，长波叶山蚂蝗。本品生于海拔为1300～2800 m的山地草坡或林地，分布于我国四川、湖北、贵州、云南、台湾等地。波叶山蚂蝗味微苦、涩，性平。据现代资料记载，有清热泻火、活血祛瘀、敛疮、润肺止咳、驱虫之功效。主治风热目赤，胞衣不下，血瘀经闭，烧伤，盗汗，烧虫病等［1-3］。该属植物的主要成分有生物碱类、酚类、三萜类及黄酮类等化合物。据文献查阅，目前尚无该植物的化学成分报道。为了阐明波叶山蚂蝗的有效成分，了解其药用基础，本实验利用贵州省丰富的波叶山蚂蝗植物资源，对波叶山蚂蝗的化学成分进行了深入研究，首次从该植物中分离得到7个化合物。

1 仪器与材料

JOEL—ECX500型500 MHZ核磁共振仪 (TMS内标);HPMS5976质谱仪;Sephadex LH-20(美国GE公司);Bio-Rad型傅立叶红外光谱仪(4000～400 cm－1，美国);X—4数字显示显微熔点测定仪 (温度未校正，北京泰克仪器有限公司)。柱色谱用硅胶及高效硅胶薄层板均为青岛海洋化工厂出品。所用石油醚、乙酸乙酯、三氯甲烷、丙酮、甲醇为工业试剂经重蒸处理，其余均为分析纯试剂。

波叶山蚂蝗全草采自贵州省安顺市，经贵阳中医学院陈德媛教授鉴定为豆科山蚂蝗属植物波叶山蚂蝗 Desmodium sequax Wall.。

2 提取与分离

将干燥波叶山蚂蝗全草进行粉碎，粉碎后得25 kg，留样3 kg，将剩余的22 kg每次用70 L 75%的乙醇冷浸提取7 d，提取3次，将所得乙醇提取液合并，减压浓缩回收溶剂，得乙醇提取物1800 g。将其用水分散后，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，减压浓缩回收溶剂，得石油醚部分 (60 g)、乙酸乙酯部分 (89 g)和正丁醇部分(335 g)。

将石油醚部分用水分散，用40～60目拌样硅胶拌样后用200～300目硅胶进行柱色谱分离，为对其中各组分进行有效分离，以石油醚-乙酸乙酯(50∶1～0∶1)为洗脱剂进行梯度洗脱，洗脱液减压回收溶剂后经TLC检测，将相同成分合并，得4个组分，分别命名为F1、F2、F3、F4。组分F2经200～300目硅胶柱色谱，石油醚-乙酸乙酯(10∶1)分离得到化合物1(3.2 g)。将组分F3经200～300目硅胶柱色谱，石油醚－乙酸乙酯(3∶1)分离和重结晶纯化得到化合物2(2.8 g)。

乙酸乙酯浸膏，经石油醚-乙酸乙酯(50∶1～0∶1)后三氯甲烷-甲醇 (30∶1～0∶1)为溶剂体系进行梯度洗脱，洗脱液减压回收溶剂后经TLC检测，将相同成分合并，得9个组分分别命名为R1～R9，组分R1经200～300目硅胶柱色谱，石油醚-乙酸乙酯 (30∶1)分离和重结晶得化合物4(49 mg)，5(4.9 g)，组分R2经200～300目硅胶柱色谱，石油醚-乙酸乙酯 (1∶1)分离和Sephedex LH-20柱色谱反复纯化得到化合物6(35 mg)，组分R4经硅胶柱色谱，三氯甲烷-甲醇(30∶1)后经重结晶得到化合物3(2.71 g)，组分R6经硅胶柱色谱三氯甲烷-甲醇 (1∶1)洗脱后经重结晶得化合物7(80 mg)。

3 结构鉴定

化合物1:白色粉末 (石油醚-乙酸乙酯)，mp 197～199 ℃。EI-MS(m/z):426［M］+，411，218，203，189。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ:5.18(1H，t，J=4.8 Hz，H-12)，3.22(1H，t，J=6.9 Hz，H-3)，1.13(3H，s，H-27)，1.07(3H，s，H-23)，1.00(3H，s，H-25)，0.97(3H，s，H-24)，0.94(3H，s，H-29)，0.87(3H，s，H-30)，0.83(3H，s，H-28)，0.79(3H，s，H-26)。13C-NMR(125 MHz，CDCl3)δ:38.2(C-1)，28.3(C-2)，78.6(C-3)，38.6(C-4)，51.1(C-5)，19.2(C-6)，31.3(C-7)，39.8(C-8)，46.7(C-9)，38.5(C-10)，24.8(C-11)，123.6(C-12)，141.7(C-13)，43.6(C-14)，28.3(C-15)，28.0(C-16)，32.3(C-17)，37.0(C-18)，36.5(C-19)，32.2(C-20)，35.7(C-21)，36.2(C-22)，27.1(C-23)，16.5(C-24)，16.5(C-25)，17.7(C-26)，28.9(C-27)，28.7(C-28)，33.4(C-29)，24.6(C-30)。以上数据与文献 ［4］报道的β-香树脂醇的数据一致。

化合物2:白色针晶 (石油醚-乙酸乙酯)，mp 138～141℃。EI-MS(m/z):414［M］+，396，381，329，303，255，213，145，55与文献报道的β-谷甾醇EI-MS数据一致［5］，在薄层色谱多种展开系统中与对照品β-谷甾醇Rf值均相同，与对照品β-谷甾醇混合熔点不下降，确定为β-谷甾醇。

化合物3:白色粉末 (甲醇)，mp 298～300℃。EI-MS(m/z):414(M+-162)，396，382，329，315，303，275，255，229，213，199，185，173，161，145，133，121，105，85，69，57，43。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ:5.32(1H，brs，H-6)，4.21(1H，d，J=8.1 Hz，H-1')，3.64(1H，ddd，J=1.9，5.5，11.5 Hz，H-6'a)，3.46(1H，m，H-3)，3.41(1H，m，H-5')，3.08(1H，ddd，J=4.6，8.8，8.8 Hz，H-3')，3.05(1H，ddd，J=1.8，6.0，11.5 Hz，H-6'b)，3.01(1H，ddd，J=5.0，8.8，9.2 Hz，H-4')，2.8(1H，ddd，J=4.6，7.8，8.8 Hz，H-2')，0.95(3H，s，H-19)，0.90(3H，d，J=6.9 Hz，H-26)，0.82(3H，t，J=6.3 Hz，H-29)，0.80(3H，d，J=6.9 Hz，H-21)，0.79(3H，d，J=6.9 Hz，H-27)，0.65(3H，s，H-18)。EI-MS和1H-NMR数据与文献［6-7］报道基本一致，故确定为胡萝卜苷。

化合物4:无色针晶 (石油醚-乙酸乙酯)，mp 168～170 ℃。EI-MS(m/z):424［M］+，409，314，245，218，205，124，109。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ:4.69(1H，d，J=2.3 Hz，H-20a)，4.57(1H，d，J=1.1 Hz，H-20b)，2.40(1H，m，H-19)，1.68(3H，s，H-30)，1.31(3H，s，H-28)，1.02(3H，s，H-27)，0.96(3H，s，H-26)，0.93(3H，s，H-25)，0.87(3H，s，H-24)，0.84(3H，s，H-23)。13C-NMR(125 MHz，CDCl3)δ:38.8(C-1)，35.1(C-2)，215.7(C-3)，47.3(C-4)，57.0(C-5)，20.1(C-6)，32.7(C-7)，43.8(C-8)，48.9(C-9)，37.9(C-10)，23.0(C-11)，24.5(C-12)，38.9(C-13)，43.0(C-14)，28.1(C-15)，35.1(C-16)，43.2(C-17)，49.2(C-18)，47.0(C-19)，147.0(C-20)，28.7(C-21)，42.3(C-22)，27.9(C-23)，22.3(C-24)，17.7(C-25)，17.0(C-26)，16.3(C-27)，17.4(C-28)，112.0(C-29)，18.9(C-30)。以上数据与文献 ［8］报道羽扇20(29)-烯-3-酮的数据一致。

化合物5:黄色液体 (石油醚-乙酸乙酯)，EIMS(m/z)292 ［M］+，261，163，149，135，121，108，95，79，67，55，41。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ:0.97(3H，t，J=7.6 Hz，CH3，C18-H)，1.26～1.34(12H，m，CH2，C3-7-H)，2.04-2.29(4H，m，CH2-C=，C8，17-H)，2.80(4H，t，J=6.0 Hz， =C-CH2-C= ，C11，14-H)，3.63(3H，s，-OCH3)，5.34-5.35(6H，m，CH=)。13C-NMR(125 MHz，CDCl3)δ:174.2(C-1)，34.1(C-2)，25.0(C-3)，28.9(C-4)，29.1(C-5)，29.4(C-6)，29.7(C-7)，27.0(C-8)，130.2(C-9)，127.7(C-10)，25.6(C-11)，128.3(C-12)，128.3(C-13)，25.5(C-14)，127.1(C-15)，131.9(C-16)，20.6(C-17)，14.3(C-18)，51.4(-OCH)。以上数据与文献 ［9-10］基本一致，故鉴定该化合物为 (Z，Z，Z)-9，12，15-十八三烯酸甲酯。

化合物6:浅黄色针晶 (石油醚-乙酸乙酯)，mp 298～300℃。EI-MS(m/z):270［M］+，241，213，153，135，118，89，69，51。1H-NMR(500 MHz，CD3COCD3)δ:8.16(1H，s，H-2)，7.46(2H，d，J=8.0 Hz，H-2'，6')，6.89(2H，d，J=8.0 Hz，H-3'，5')，6.41(1H，brs，H-8)，6.28(1H，brs，H-6)。13C-NMR(125 MHz，CD3COCD3)δ:182.4(C-4)，166.8(C-7)，164.1(C-5)，159.9(C-4')，159.2(C-C-8a)，154.8(C-2)，131.7(2C，C-2'，6')，124.6(C-1')，123.5(C-3)，116.3(2C，C-3'，5')，106.3(C-4a)，100.5(C-6)，95.0(C-8)。以上数据与文献 ［11-12］基本一致，故鉴定该化合物为4'，5，7-三羟基异黄酮。

化合物7:白色粉末 (甲醇)，mp 234～235℃。EI-MS(m/z):130(100，M+-CO)，115，87，70，60，44。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ:10.54(1H，brs，NH-1)，8.06(1H，s，NH-3)，5.25(1H，d，J=8.5 Hz，H-4)，6.89(1H，d，J=8.5 Hz，NH-6)，5.80(2H， s， NH2-8)。13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ:157.2(C-2)，62.9(C-4)，174.1(C-5)，157.8(C-7)。根据以上数据及文献［13］，鉴定该化合物为尿囊素。

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