离子色谱法测定磺丁基醚-β-环糊精中4-羟基丁磺酸

王 伟， 项素云， 孙文芳， 严拯宇， 相秉仁

(1.中国药科大学分析化学教研室，江苏南京211198;2.南京师范大学生命科学学院，江苏南京210046;3.中国药科大学分析测试中心，江苏南京210009)

磺丁基醚-β-环糊精(SBE-β-CD，1)是阴离子型高水溶性环糊精衍生物，能很好地与药物分子包合形成非共价复合物，从而提高药物的稳定性、水溶性和安全性，同时具有降低肾毒性、缓和药物溶血性、控制药物释放速率及掩盖不良气味等特性，其在欧美已被批准用作注射剂的辅料［1-3］。

SBE-β-CD的合成原料之一为1，4-丁基磺酸内酯，其水解产物4-羟基丁磺酸(2)有可能作为杂质存在于SBE-β-CD产品中。为保证SBE-β-CD的产品质量，需建立SBE-β-CD中4-羟基丁磺酸含量的有效检测方法，对其进行限量(初步定为0.1%)检查。

现国内外对SBE-β-CD中4-羟基丁磺酸的检测尚未见报道。由于4-羟基丁磺酸为离子型化合物，在反相色谱柱中没有保留，因此本文参考相关文献［4-7］，采用离子色谱法对其进行检测。

1 仪器与试剂

DIONEX ICS-90型离子色谱仪(美国戴安公司);Chromeleon6.60色谱工作站。

4-羟基丁磺酸对照品(南京巨环医药科技有限公司，批号:20100405);SBE-β-CD样品(南京巨环医药科技有限公司，批号:090508、090513、090520)。NaHCO3为分析纯;实验用水为电阻率是18.3 MΩ· cm的去离子水(Millipore纯水机制备)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:IonPac AS23阴离子分析柱(250 mm×4 mm)，IonPac AG23阴离子保护柱(50 mm×4 mm);柱温:25℃;ASRS300(4 mm)阴离子抑制器，其再生模式为外加水电抑制，抑制电流:30 mA;淋洗液:7 mmol·L－1NaHCO3水溶液;流速:1.0 mL· min－1;检测器:电导检测器;进样量:10μL。

2.2 溶液的配制

对照品溶液的配制:取4-羟基丁磺酸对照品100 mg，精密称定，置100 mL容量瓶中，用去离子水定容，得到1 g·L－1对照品溶液;再精密移取此对照品溶液0.5 mL至50 mL容量瓶中，用去离子水定容，即得10 mg·L－1对照品溶液。

样品溶液的配制:取SBE-β-CD样品500 mg，精密称定，置50 mL容量瓶中，用去离子水定容，即得10 g·L－1样品溶液。

2.3 线性范围和检测限、定量限

取“2.2”项下配制的1 g·L－1对照品溶液，以去离子水逐级稀释，得到质量浓度分别为2、5、10、15、20 mg·L－1的4-羟基丁磺酸标准溶液系列，并按“2.1”项下色谱条件，分别进样，记录色谱图，每个浓度平行2次。以峰面积(A)对浓度(C)进行线性回归，得回归方程:A=0.010 2 C+0.000 7，r= 0.999 8。结果表明，4-羟基丁磺酸的质量浓度在2～20 mg·L－1范围内线性良好。

取上述标准溶液用去离子水稀释，进样测得:信噪比为10∶1时，定量限为5 ng;信噪比为3∶1时，检测限为2 ng。

2.4 稳定性试验

取“2.2”项下配制的10 mg·L－1对照品溶液，分别于0、2、4、6、8 h进样，记录色谱图。结果测得4-羟基丁磺酸峰面积的RSD为1.8%(n=5)，表明对照品溶液在8 h内稳定性良好。

2.5 加样回收率

按“2.2”项下方法配制已知4-羟基丁磺酸含量的样品溶液，取适量，分别加入限量值的80%、100%和120%的4-羟基丁磺酸对照品，混匀，制得含不同质量浓度对照品的样品溶液，每个浓度平行3份，进样测定。结果，测得4-羟基丁磺酸的平均回收率为100.2%(RSD=1.3%，n=9)。

2.6 样品测定

分别精密称取3批次样品，按“2.2”项下方法配制样品溶液，每批次样品平行3份，进样测定，结果见表1。

表1 样品测定结果Table1 Results of sample determination

3 讨论

4-羟基丁磺酸是一价有机酸，在离子色谱淋洗液中呈阴离子形态。因此，本文选用了对阴离子有一定保留能力的IonPac AS23阴离子柱和适用于阴离子测定的ASRS300阴离子抑制器以及对阴离子有选择洗脱能力的NaHCO3淋洗液。

笔者曾考察了在离子色谱分析中，采用具不同混合比例和不同浓度的Na2CO3-NaHCO3混合溶液作淋洗液时，SBE-β-CD样品中4-羟基丁磺酸与相邻杂质的分离效果。结果发现，随着淋洗液浓度或其中Na2CO3比例的降低，4-羟基丁磺酸根离子的保留值有所增大，且与相邻杂质的分离度也增大:当以0.5 mmol·L－1Na2CO3-6.0 mmol·L－1NaHCO3混合溶液为淋洗液时，两者分离度达1.55，但分离效果仍不理想;由于CO对酸根离子的洗脱能力远大于HCO，且4-羟基丁磺酸作为有机酸，其柱保留较弱，故其更易被CO洗脱，而采用7 mmol·L－1NaHCO3水溶液作为淋洗液时，其与相邻杂质分离良好，分离度可达2.05，杂质离子不干扰4-羟基丁磺酸的测定，4-羟基丁磺酸根离子保留时间也较为合适(约 10.9 min)(见图1)。所以，最终选择7 mmol·L－1NaHCO3水溶液为淋洗液。

本文建立的离子色谱法操作简便，分析结果准确、可靠，可以保证SBE-β-CD样品中4-羟基丁磺酸与其他离子型杂质的基线分离，适用于SBE-β-CD中4-羟基丁磺酸的限量检查。

图1 4-羟基丁磺酸对照品及SBE-β-CD样品的离子色谱图Table1 ion chromatograms of 4-hydroxy-1-butanesulfonic acid and SBE-β-CD sample

［1］ 谷福根，高永良，崔福德.磺丁基醚-β-环糊精及其在药剂学中的应用［J］.中国新药杂志，2004，13(1):15-19.

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［5］ 李偲文，于泓，张欣.离子色谱同时分离测定三氟甲烷磺酸根，氟硼酸根及常见无机阴离子［J］.分析化学，2010，38(11):1665-1669.

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