晚期肿瘤患者淋巴细胞亚群特点及临床意义

郑淑君 贾喜花 王运良 郭建美

[摘要] 目的：通过观察晚期肿瘤患者外周血淋巴细胞亚群特点，探讨其免疫功能状况及临床意义。方法：应用流式细胞仪检测56例晚期肿瘤患者（肿瘤组）及42例健康体检者（健康组）外周血淋巴细胞亚群计数，并对其作比较。结果：肿瘤组较健康组T细胞亚群CD8+比值上升，CD4+、CD4+/CD8+比值下降，差值有统计学意义（P＜0.05），CD3+比值升高，差异无统计学意义（P＞0.05），B细胞亚群下降，差异有统计学意义（P＜0.05），NK比值下降，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：晚期肿瘤患者的细胞免疫及体液免疫功能均低于健康人，其中体液免疫下降较明显，对临床应用提高免疫力药物也具有指导意义。

[关键词] 淋巴细胞亚群；免疫功能；流式细胞术

[中图分类号] R730.43 [文献标识码] B[文章编号]1673-7210（2011）11（c）-094-02

Clinical characteristics and significance of lymphocyte subsets in patients with advanced cancer

ZHENG Shujun1, JIA Xihua2, WANG Yunliang2, GUO Jianmei2

1.Chengde Medical College, Hebei Province, Chengde 067000, China; 2.Department of Medical Oncology, the First Central Hospital of Baoding City, Hebei Province, Baoding 071000, China

[Abstract] Objective: To observe the clinical characteristics of lymphocyte subsets in the peripheral blood of patients with advanced cancer in order to evaluate immune function and clinical significance of lymphocyte subsets. Methods: Lymphocyte subsets counted in peripheral blood of 56 patients with advanced cancer and 42 cases of healthy people were compared by the flow cytometry. Results: CD8+ ratio of patients with advanced cancer was significantly higher than that of the healthy people, CD4+, CD4+/CD8+ ratio and B cell subgroup were significantly lower in cancer patients than that of the healthy people (all P<0.05). CD3+ ratio was higher in cancer patients and NK ratio was lower, but the differences were not statistically significant (P>0.05). Conclusion: Cellular immune function and humoral immune function of patients with advanced cancer are lower than that of healthy people, and the humoral immune function dropped significantly, this finding is instructive on how to improve the clinical application of immunity drugs.

[Key words] Lymphocyte subsets; Immune function; Flow cytometry

近年来，肿瘤发病率逐年增加，研究表明恶性肿瘤患者普遍存在免疫功能低下[1]，其发生是多因素、多阶段的，与机体免疫系统间的相互作用机制十分复杂[2]，本文运用流式细胞术的方法，检测并分析恶性肿瘤患者和健康人淋巴细胞亚群的特点，探讨肿瘤对患者免疫功能的影响，对临床具有指导作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2009年1月～2010年12月我院健康体检者和肿瘤患者，总共98例。其中，健康体检者（健康组）42例，男24例，女18例；年龄45~64岁，平均53.2岁。肿瘤患者（肿瘤组）56例，均经过病理或细胞学确诊且临床分期为Ⅳ期；其中，男30例，女26例；年龄43~67岁，平均54.5岁；肺癌22例，大肠癌18例，乳腺癌14例，其他2例。两组一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 试剂和仪器

美国Beckman Coulter 公司四色数字化流式细胞仪及其相应配套试剂。

1.3 标记和检测

采集肿瘤患者及健康体检者血标本，取标记抗体各10 μl 分别加入TruCOUNT试管管底，然后加入乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝血100 μl，充分混匀，室温避光染色20 min，再加入溶血素500 μl，充分混匀，室温避光15 min，再加500 μl的磷酸盐缓冲液（PBS），室温避光10 min，后进行流式细胞术分析。

1.4 统计学方法

全部数据用SPSS 11.5统计软件处理。计量资料采用均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用t检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组T淋巴细胞亚群表达水平比较

肿瘤组与健康组比较，T淋巴细胞亚群中CD3+比值升高，但差异无统计学意义（P＞0.05），CD8+比值上升，CD4+、CD4+/CD8+比值下降，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。见表1。

2.2 两组B细胞亚群与NK细胞表达水平比较

肿瘤组与健康组比较，B细胞亚群比值下降，差异有统计学意义（P＜0.05），NK细胞活性下降，但差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

3 讨论

肿瘤的发生和发展是一个非常复杂的过程，研究表明，肿瘤的发生和发展与机体免疫功能具有密切的关系，免疫力低下的人群肿瘤发生率高，而肿瘤发生后又能产生免疫抑制因子抑制宿主的免疫功能[3]。肿瘤发生后机体抗肿瘤免疫的效应机制以由T淋巴细胞介导的细胞免疫为主，根据是否表达CD4或CD8分子，T细胞可分为CD4+ T细胞或CD8+ T细胞，CD4+ T淋巴细胞具有细胞毒性作用及辅助B细胞产生抗体等作用，CD8+ T淋巴细胞可特异性杀伤靶细胞。本实验晚期肿瘤患者T细胞亚群中CD8+比值上升，CD4+、CD4+/CD8+比值下降，T 淋巴细胞亚群比例失调，可以说明晚期恶性肿瘤患者的细胞免疫在一定程度上受到抑制，与相关报道一致[4]，机体通过T淋巴细胞调节蛋白质抗原引起的免疫应答及清除细胞表面抗原或细胞内微生物的效应作用减弱。

近年来，关于肿瘤患者的体液免疫实验报道不一，对B淋巴细胞亚群的研究也较少[5]，肿瘤的体液免疫是B细胞及抗体依赖的杀伤作用，同时诱导T细胞对肿瘤的应答，发挥抗肿瘤作用。本实验通过肿瘤患者及健康体检者比较可以看出肿瘤患者B细胞亚群明显下降，差异具有统计学意义（P＜0.05），可以提示晚期肿瘤患者的体液免疫功能受到抑制，使其通过激活补体系统溶解肿瘤细胞，抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用、抗体的调理作用等减弱，从而使机体免疫功能下降，同时，T淋巴细胞和B淋巴细胞在免疫过程中是相互影响、相互制约的，但B细胞亚群有可能较T细胞亚群更加灵敏地反映机体的免疫功能状况。

NK细胞是正常机体中对肿瘤细胞具有高度细胞毒性作用的淋巴样细胞，主要通过穿孔素依赖和穿孔素非依赖的机制控制肿瘤生长及其转移。NK细胞又是不同于T、B淋巴细胞的淋巴细胞群。它们在体内相对较少，来源于骨髓的大颗粒细胞。它们不需预先致敏即能分泌细胞毒因子，从而杀伤肿瘤细胞[6]，在抗肿瘤免疫中发挥着重要作用。大量研究工作已证实，宿主对机体内发生的肿瘤组织有自发性抵抗现象[7]，而生物应答调节剂可逆转肿瘤诱导的对NK细胞的抑制作用。但在本实验结果中，NK活性没有统计学意义，尚不能体现晚期肿瘤患者机体NK细胞发挥杀伤肿瘤细胞作用。

结合本研究，晚期肿瘤患者细胞免疫和体液免疫均受到不同程度的抑制，与相关报道结果一致[8]，体液免疫较细胞免疫下降明显，提示B细胞亚群有可能较T细胞亚群更早地反映机体的免疫功能状况，晚期肿瘤患者体液免疫可能优于细胞免疫显示患者的免疫功能状况。同时，恶性肿瘤患者免疫功能如果能够提高，可能有利于肿瘤的控制，这也给临床医生应用提高免疫力药物提供了依据。由于本研究病例数少，笔者将增加样本进一步深入研究。

[参考文献]

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[2]王桂芝,秦文华.化疗对肿瘤患者淋巴细胞亚群的影响[J].中华全科医学,2009,7(12):1307-1308.

[3]Yo Koyama WM. Natural kill cell receptors specific for major histocompatibilty complex.Class I moleculesproc [J]. Natl Acad Sci USA,1995,(92):3081.

[4]齐红,石虹,刘玉侠,等.253 例恶性肿瘤患者外周血T 细胞亚群的检测及其临床意义分析[J].中国实验诊断学,2009,13(11):1589-1590.

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[6]肖刚,赵则.结直肠癌患者外周血中CD4+、CD45、RA+和CD4+、CD43、RO+ T细胞的变化意义[J].中华肿瘤杂志,2003,25(4):362-364.

[7]Maehara Y, Tomisaki S, Oda S, et al. Lymph node metastasis and relation to tumor growth potential and local immune response in advanced gastric cancer [J]. Cancer,1997,74(2):224.

[8]乌兰图雅,王士勇,杜微丽,等.晚期肺癌患者免疫功能的系统评价及临床意义[J].中国肺癌杂志,2010,13(4):331-336.

（收稿日期：2011-07-26）

[作者简介] 郑淑君（1984-），女，硕士，医师，主要从事肿瘤内科的诊断和治疗。