CK17在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌组织中的表达及意义

王为民 汪建华 侯洪春

细胞角蛋白(cytokeratin，CK)是1种细胞中间丝蛋白， 具有显著的分子多样性，不同的上皮组织和细胞分化的不同阶段表达不同的CK。正常宫颈组织的各种细胞分别表达不同的CK，在正常宫颈组织向宫颈癌和癌前病变转化的过程中，一些CK的表达会发生变化，并表现出一定的规律性，因此CK有望在宫颈癌诊断和预后判断中发挥作用。本研究通过观察CK17在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌组织中的表达情况，探讨其与宫颈组织的关系及临床意义。

1 材料与方法

1.1 一般资料

收集2008年1月～2009年10月在济南市妇幼保健院行宫颈活检、环形电切术、手术切除宫颈标本89例，其中CINⅠ15例，CINⅡ17例，CINⅢ21例，宫颈癌36例。36例宫颈癌中，宫颈鳞癌28例、宫颈腺癌8例。CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈癌的标本均经病理检查确诊，病理诊断由至少两名以上资深病理科医生确定。选取因子宫肌瘤，子宫腺肌病行子宫全切术，经病理检查证实为正常宫颈组织15例标本作为对照组。患者年龄28～66岁，中位年龄41岁，所有患者术前均未做放疗、化疗，无免疫、代谢性等疾病。

1.2 方法

采用SP免疫组化方法：标本经石蜡包埋，4 μm厚切片， CK17单克隆抗体及SP试剂盒均购自福州迈新生物技术有限公司。PBS代替一抗作阴性对照。按SP试剂盒说明书操作。

1.3 结果判断标准

CK17的阳性表达部位为细胞质。在400倍光镜下随机选取8个视野，每个视野观察100个细胞，计数阳性细胞，取平均值。按阳性细胞染色数量和显色强度分为4级：阳性细胞数为0，不计分；1%～25%为1分；26%～50%为2分；51%～75%为3分；76%以上为4分；染色强度按无着色、浅黄色、棕黄色、棕褐色分别计0～3分；两项相加，0～1分为“—”，2～3分为“+”，4～5分为“++”，6～7分为“+++”，+～+++为阳性。

1.4 统计学方法

用SPSS13.0软件对所得数据进行统计学分析。数据采用χ2检验，Fisher确切概率法及相关性分析。检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 CK17在不同宫颈组织中的表达情况

CK17在正常宫颈组织中无表达、在CIN和宫颈癌中的阳性表达率分别为56.6%和83.3%，呈逐渐增高的趋势。3组相比，差异有统计学意义(χ2=30.177，P<0.05)。经χ2分割后比较(α’=0.0125)，CIN组阳性率高于正常宫颈组，差异有统计学意义(χ2=15.194，P<0.0125)；宫颈癌组阳性率高于正常宫颈组，差异有统计学意义(χ2=30.357，P<0.0125)；宫颈癌组阳性率高于CIN组，差异有统计学意义(χ2=6.973，P<0.0125)。CIN组内，从CINⅠ→CINⅡ→CINⅢ，CK17的阳性表达率分别为20.0%、64.7%和76.2%，随着病变级别的升高，阳性表达率有逐渐增高的趋势，Fisher确切概率法得出，CINⅡ组阳性率高于CINⅠ组，差异有统计学意义(P=0.016)；CINⅢ组阳性率高于CINⅠ组，差异有统计学意义(P=0.002)；CINⅡ组和CINⅢ组阳性率差异有统计学意义(P>0.05)，见表1。

2.2 CK17阳性表达率与宫颈病变程度的关系

CK17在正常宫颈、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈癌的阳性表达率分别为0、20.0%、64.7%、76.2%和83.3%。随着宫颈病变程度的加重(正常宫颈→CINⅠ→CINⅡ→CINⅢ→宫颈癌)，CK17的阳性表达率逐渐增高，其阳性表达率同宫颈病变程度呈正相关关系(γ=0.958，P<0.05)。

表1 CK17在不同宫颈组织中的表达(例)

3 讨论

宫颈癌的致病因素现在已非常明确，即HPV感染。但HPV感染正常宫颈组织后，究竟如何促使正常组织向恶性转变，目前尚不清楚。随着研究的深入，宫颈储备细胞在宫颈癌发生和发展中的作用日益受到人们的重视。研究显示，储备细胞为宫颈干细胞，是HPV感染的靶细胞[1]。当受到激素的过度刺激或某些化学毒性物质的影响，同时合并HPV的感染，这些细胞化生的过程就会受到影响，从而向癌前病变转化，并进一步向鳞癌、鳞腺癌和腺癌转化。由此可见，储备细胞在宫颈癌的形成中发挥着重要作用。而CK17为储备细胞的分子标志物[1,2]，因此研究CK17在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌中的表达无论是对于疾病的诊断还是对于疾病的进展的预测都有着重要意义。

Carrilho等[3]研究了64例患者，其中正常10例，CINⅢ10例，宫颈浸润癌44例，结果CK17在其中的阳性表达率分别为0%、40%、73.2%，说明随着病变进展，CK17的表达增高，认为CK17是宫颈恶性转变的特异标志物。Ikeda等[2]研究了134例患者，其中CINⅠ 39例，CINⅡ 31例，CINⅢ 43例，浸润癌21例，结果CK17的阳性表达率分别为33.3%、58.1%、 81.4%和 95.2%，CK17阳性同CIN级别的增高相关联，CINⅠ

虽然多数研究支持CK17的表达同CIN级别的增高有关联，但也有研究认为CK17的表达同CIN的级别无关[6]，甚至有研究显示CK17在CIN中较少表达[7]。之所以研究结果有如此大的差异，有作者认为是抗体选择的不同和免疫组化研究方法的不同造成的[2，3]。

我们的研究结果显示，从正常宫颈→CINⅠ→CINⅡ→CINⅢ→宫颈癌，随着病变程度的逐渐加重， CK17的阳性表达率逐渐增高，通过相关性分析，两者之间呈正相关关系(γ=0.958，P<0.05)，即宫颈病变程度越重， CK17的阳性表达率越高。由此可以认为，通过CK17的表达情况，可以预测宫颈病变未来的发展趋势，即表达CK17的宫颈病变，将来很有可能进一步发展，相反，不表达CK17的宫颈病变，将来进一步发展的可能性很小。

因此，我们认为CK17可作为高级别CIN和宫颈癌诊断及预测病变进展趋势的标志物。

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