复方环丙沙星乳剂的研制及体外抑菌试验

李孝文，董 伟，陈小军，，许朝爱，孙志良，2

（1.湖南农业大学动物医学院，湖南 长沙410128；2.湖南省兽药工程技术研究中心，湖南 长沙410311；3.湖南五指峰生化有限公司，湖南 浏阳411216）

近年来，国内外兽药工作者开展多方向的新制剂的研究与实践，其中长效制剂可明显减少用药次数和剂量，有效降低药物毒副作用的优势是当前研究一个热点［1－2］。环丙沙星具有脂溶性高、抗菌后效应长等多种优点被广泛应用于兽医临床［3］。鉴于环丙沙星半衰期较短的不足［4］，课题组研制了复方环丙沙星长效乳剂，为充分发挥环丙沙星的药理作用及兽用长效制剂方面提供试验依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料 乳酸环丙沙星（98.3%）、乳酸甲氧苄啶（99.1%），7#白油，Span－80，Tween－80，硬脂酸铝，营养琼脂，5%复方环丙沙星注射液（实验室自制）；胶体磨，超净工作台，冷冻离心机，光学显微镜；大肠埃希菌（C83901）、巴氏杆菌（Kober－6）、沙门菌（C77－31）、金黄色葡萄球菌（C56023）、链球菌（C55138），均购自中国兽医药品监察所。

1.2 复方环丙沙星乳剂的制备［5－6］采用单因素法筛选水相和油相中表面活性剂及其他辅料的配比，同时确定二者的比例。使油相∶水相（O∶W）容量按1∶1、2∶1、3∶1、3∶2四种方式进行乳化：先缓速混合，在慢速搅拌油相的同进，缓慢倾入水相混合，然后再通过高速运转的胶体磨充分乳化。

1.3 乳剂性状的检测 观察每个批次复方环丙沙星乳剂的颜色和性状，测定pH值，显微镜观察乳剂颗粒并拍照，用Nikon编辑软件测定乳剂颗粒直径大小。37℃贮存10d加速老化法和3 000r／min离心15min加速分层法，考察是否破乳；以内口直径为1.2mm的吸管，25℃条件下吸满1mL垂直放出0.4mL计时考察黏度，t≤5s为合格。

1.4 体外抑菌试验［7－8］采用试管二倍稀释法和平皿菌落计数法测定乳剂和注射液的MIC和MBC，重复3次，求平均值。所得试验数据通过SAS 8.1进行平均数、标准差和组间方差分析，以P＜0.01为差异极显著，P＜0.05为差异显著。

2 结果与分析

2.1 乳剂的性状

2.1.1 物理性状 复方环丙沙星乳剂为淡黄色油乳状，其pH值为6.3～6.6。乳剂颗粒直径平均大小7.6μm，符合兽用注射乳剂质量标准［9］。

2.1.2 稳定性及黏度结果 O∶W 按1∶1、2∶1、3∶1、3∶2四种容量比的复方环丙沙星乳剂稳定性及黏度结果见表1，结果表明，O∶W按2∶1容量比的乳剂为最佳配比。

表1 4种复方环丙沙星乳剂的稳定性及黏度结果

2.2 体外抑菌试验结果 复方环丙沙星乳剂和注射液对5种不同细菌的MIC和MBC试验结果。见表2和表3。

表2 复方环丙沙星乳剂和注射液对5种不同细菌的平均MIC值 （μg／mL）

表3 复方环丙沙星乳剂和注射液对5种不同细菌的平均MBC值 （μg／mL）

上述试验数据经统计处理表明，复方环丙沙星乳剂对5种细菌的MIC和MBC均极显著优于复方环丙沙星注射液（P＜0.01）。

3 讨论

3.1 本乳剂制作工艺是借鉴油乳剂灭活疫苗抗原缓释技术与抗菌药物乳剂制备技术相结合的制备方法，通过反复的试验与摸索，筛选出了针对复方环丙沙星乳剂以O∶W为2∶1的配比方式。筛选O∶W为2∶1的配比方式可以将药溶液的水相充分包裹达到油包水结构，不仅能有效的保持乳剂的稳定性和通针性，并且相对于O∶W为3∶1的方式还减少了白油的用量，降低了对机体的刺激。

3.2 复方环丙沙星乳剂和复方环丙沙星注射液对5种菌都表现了较强的体外抑菌效果。统计显示：复方环丙沙星乳剂对5种细菌的MIC和MBC极显著强于复方环丙沙星注射液（P＜0.01），说明复方环丙沙星通过剂型的改变其体外抑菌效果发生了显著的提升。抗菌药物在油包水的剂型状态下形成“药物团”，其表层脂溶性与细菌具有亲和力易与细菌结合，随而增强了对细菌的作用，显著提升了抑菌能力，故此乳剂的抑菌效果强于注射液。抗菌药物被捕获在油相形成的微结构中，使药物形成一个储存而缓慢释放的“抗菌药物库”，只要1次注射，就可达到连续释放药物的目的［6］，从而延长了药物的半衰期，起到了长效作用。

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