张 梅,武青青,杜鹃花
(延安大学附属医院,陕西 延安 716000)
相差显微镜尿红细胞形态检查在血尿定位诊断中的应用
张 梅,武青青,杜鹃花
(延安大学附属医院,陕西 延安 716000)
目的探讨相差显微镜下尿红细胞形态变化对于临床鉴别肾性及非肾性血尿的应用价值。方法利用相差显微镜通过对96例临床血尿患者的尿液标本中红细胞形态的观察和百分率的计算进行结果分析。结果在相差显微镜下,肾性与非肾性血尿患者尿液中的红细胞形态存在着明显的差异。结论可为临床鉴别血尿来源提供依据。
相差显微镜;血尿;红细胞形态
血尿是泌尿系统疾病常见的一种临床症状,明确泌尿系统出血的具体位置,对于肾小球性和非肾小球性疾病的临床诊断和治疗方案的确定,有着非常重要的意义。肾性血尿是累及肾脏实质的病变,进一步的确定检查往往都会存在费用较高,耗时较长的弊端,并且有些检查还会对患者造成一定的损伤。血尿的相差显微镜检查是通过对新鲜尿中红细胞的形态,大小,数量,血红蛋白的含量及分布情况的检查,从而对肾小球源性血尿和非肾小球源性血尿的鉴别,提供一些重要的实验依据;也可做为肾病患者疗效观察的一个指标。是一种非常简便有效的无创性检查方法,且结果也非常直观可靠。为进一步了解相差显微镜下尿液红细胞形态学改变在血尿定位诊断中的应用价值,对延安大学附属医院2009~2010年96例出现血尿症状的患者进行尿液红细胞形态分析,结果与最终的确诊结论符合率非常高,为临床的进一步的确诊检查起到了指导性的作用,具体报道如下:
1.1 一般资料
2009~2010年我院有血尿症状的患者96例,男56例,女40例,年龄在6~65岁,平均29.5岁。尿沉渣镜下红细胞数每高倍镜视野在3个以上,符合诊断血尿的标准。其中:经肾脏活检已确诊为肾小球性疾病的有66例,通过询问病史,以及一些相关的辅助检查(如血液和尿液检验,影像学检查等)被确诊为非肾小球性疾病的有30例。
1.2 方法
受检者于检查前一天晚上的10点以后禁止大量饮水,次日清晨清洁尿道口,于安静状态留取中段晨尿立即送检,取混匀10 ml尿液于离心管内,以RCF378 g(1500 r/min)离心5 min,弃去上清液,留取沉渣0.2 ml,混匀后取20ul于载玻片上,加18 mm×18 mm盖玻片覆盖,静置1 min待有形成分自然下沉后,在Nikon ECLIps E80i相差显微镜下观察红细胞形态,并计数100个红细胞,分别记录各种畸形红细胞的个数,最后计算出畸形红细胞百分率,同时需注意是否有管型,肾小管上皮细胞等,这些有形成分均可作为肾性疾病诊断的重要依据。
1.3 分类标准
参照参考文献[1]尿液有形成份显微镜检查。
66例肾小球性血尿中,畸形型红细胞阳性率为89.4%(59/66),混合性阳性率占9.1%(6/66);30例非肾小球性血尿中均一型为93.3%(28/30),混合型为3.3%(1/30)。肾性组患者尿液红细胞形态以非均一形红细胞为主,红细胞畸形改变明显,形态变化多样,以影细胞,芽孢样红细胞,棘形红细胞,面圈样红细胞,以及一些大体积细胞为多见;而非肾性组患者以均一形红细胞为主,以新鲜或皱缩形为多见。以上结果表明肾性与非肾性血尿患者尿液中的红细胞在形态上存在着比较明显的差异,可为血尿的定位诊断提供依据。(P<0.01)结果见表1。
表1 病变种类与尿红细胞形态改变的关系
泌尿系统由肾脏、膀胱、输尿管和尿道组成,主要功能是排除机体在代谢过程中所产生的废物,肾脏是泌尿系统中最为重要的脏器,而肾小球性疾病又是泌尿系统疾病的重要部分。血尿通常是作为泌尿系统疾病常见的一种临床症状出现,所以对于临床来说,明确血尿的来源(即泌尿系统出血的具体部位的确定)对于肾小球性和非肾小球性疾病的临床诊断和治疗,以及疗效观察就显得尤为重要。血尿一直以来都是临床比较重视的一个症状,它虽然从泌尿系统排出,但关于血尿的来源、形成的部位和原因却是非常的广泛和复杂,引起血尿的疾病也比较繁多[2]。血尿的来源尽管可以通过肾穿刺活检确定出血的具体部位、发病原因及病理变化,但会给患者带来一定的创伤,其他的检查比如CT、膀胱镜以及肾功能的检查等也会给病人造成不同程度的痛苦并且费用也较高,新鲜尿液中红细胞的形态对于鉴别肾源性和非肾源性血尿有重要的价值,我们使用相差显微镜不仅可以了解红细胞的数量,而且可以对尿红细胞形态作出具体的分析,从细胞的水平为血尿的定位提供一些可靠的依据。该方法简便快捷,费用低、标本易于留取、结果客观准确、病人容易接受,更重要的是用位相显微镜检测的可靠性已为许多学者所肯定[3],本方法是将新鲜尿标本离心以后直接置于显微镜下观察,尿液标本没有经过特殊处理和染色,在新鲜、自然、活动的状态下观察红细胞的各种形态,所看到的是活体细胞的立体形态,结果直观可靠,反映了疾病过程中自然真实的病理变化。相差显微镜应用了光的衍射和干涉现象照射标本,产生明暗不同的反差,便于细胞形态的识别[1],更加有利于透明与半透明有形成分的轮廓的识别。它主要用于新鲜液体标本中细胞和微生物的检查[4]。尤其是对用普通光学显微镜容易漏检的透明管型和影形红细胞有非常好的识别效果。近年来,国内外相继使用相差显微镜观察尿红细胞形态来鉴别血尿的来源,为血尿的定位提供大量实验依据,有利于可疑及已确诊的肾病患者作动态观察。
通过在相差显微镜下对96例患者血尿标本中RBC形态的检测,结果表明,66例肾小球性血尿中,畸形型红细胞阳性率89.4%(59/66),30例非肾小球性血尿中均一型为93.3%(28/30)。RBC形态畸形与多型性改变的病理机理还有待探讨,目前认为是由于肾小管内膜渗透压变化,特别是享利氏袢上行支低渗透压(<100 mosm/kg H2O)所致[5]。但也有报道认为,无论渗透压高低,肾炎病人的RBC均呈多型性,可能还与受损的肾小球滤过膜对RBC的挤压作用有关。相差显微镜可直观,准确的观察红细胞的形态,。且特异度较好,可为临床确定血尿的来源及定位提供一些准确可信的实验数据,值得临床推广应用,但是也存在一定的误差,例如操作过程中的混和不均和涂片时的厚薄差异以及操作人员自身存在的主观性,这些都影响着相差显微镜敏感度的提高。作为我们检验工作者除了要注意正规操作,还要提高认真程度,更重要的是要加强对显微镜下各种细胞形态的识辨能力,尽量满足临床的需求。
[1]熊立凡,李树仁.临床检验基础[M].北京:人民卫生出版社,2003:1611.
[2]中山医学院《内科疾病鉴别诊断学》编写组.内科疾病鉴别诊断学[M].成都:人民卫生出版社,1979:588.
[3]De santo NC,Nassi F,Capodi casa G,et al.Phuse contrast microcopg of the urine sediment for the cliagnosis of glomerular and now glomerular bleeding[J].Nephren,1987,45(3):35-39.
[4]朱晓辉,朱忠勇1.相差显微镜的原理、结构和临床应用[J].临床检验杂志,2007,25(4):308-309.
[5]张景红,黎磊石,周虹,等.尿沉渣多样型RBC的发生机理及意义[J].中华内科杂志,1986,25(2):85-88.
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A
1672-2639(2011)03-0032-02
2011-05-18;责任编辑徐文梅]