采用超前免疫、大剂量疫苗治疗非典型猪瘟的试验

侯锐 王冠杰 张侠 （河南省濮阳市畜牧局 457000）



采用超前免疫、大剂量疫苗治疗非典型猪瘟的试验

侯锐 王冠杰 张侠 （河南省濮阳市畜牧局 457000）

通过对濮阳地区某猪场一起疫情的情况和临床症状以及病理剖检、实验室检验等确诊为非典型猪瘟，并进行超前免疫、大剂量猪瘟疫苗的紧急免疫接种和治疗等方法的探讨试验，结果表明，此诊断和防治方法效果良好、疫情得到控制。

非典型猪瘟 诊断 防治

2009年4月濮阳地区某猪场发生一起大的疫情，笔者对此疫情进行了诊断和防治。

1 材料与方法

1.1 材料

病猪来自濮阳地区某猪场。普通肉汤与普通琼脂等培养基均自行配制。ELISA检测试剂盒购于华中农业大学。试验用兔购于河南农业大学牧医工程学院动物房。

1.2 方法

按常规的流行病学、临床症状、病理变化进行综合判断。实验室诊断：（1）触片镜检：无菌采取刚病死仔猪心、肝、肺、血液等病料直接触片，革兰氏和瑞氏染色镜检。（2）细菌培养：无菌采取具非典型猪瘟症状仔猪脾和淋巴结接种普通琼脂、普通肉汤培养基后置37℃恒温箱培养24h涂片观察。（3）血清学检验按照试剂盒操作说明应用ELISA检测病猪抗凝血中的猪瘟病原，步骤如下：①取抗凝血10ml，3000转离心30min。②取白血球加裂解液(50μl裂解液+450μl蒸馏水)裂解1h。③离心5min抽取上清液。④加上清液75μl再加25μl单抗过夜。⑤洗涤5遍每次间隔3~5min，倒掉液体拍干。⑥加二抗(1μl二抗+99μl二抗稀释液)作用1h。⑦洗涤同⑤。⑧加底物100μl避光显色15min。⑨加终止液100μl，15min内测定结果(定性判定：蓝色为阳性，无色为阴性)。测病原必须免疫半月以上的猪。（4）兔体交叉免疫试验：采取3头病死猪和重型病猪淋巴结和脾脏，分别研磨用生理盐水制成1:10悬液，加青、链霉素各2000IU/ml，置4℃冰箱4h，吸取上清液，每份材料肌肉注射于2只健康家兔5ml/只。5d后再取健康家兔2只作对照，分别静脉注射1:10稀释的猪瘟兔弱毒冻干疫苗1ml 。以后每隔6h测温1次，共5d。按《兽医生物药品制造及检验规程》的标准判定热型。

2 结果

2.1 常规检查结果

2.1.1 流行病学 该病首先在一窝25日龄仔猪中发生，病猪体温升高，排黄色或绿色稀粪，不食或少食，迅速消瘦，后又传至其他圈舍。经用多种抗生素及杀菌药物治疗无效。整个流行期间主要为45日龄左右仔猪，发病率和病死率分别为52.7%和84.8%。

2.1.2 临床症状 病猪精神萎顿，拱背寒颤，背毛粗乱无光；体温39.5~41℃左右，食欲减退至废绝；病猪下痢，呈黄绿色，恶臭；用体温计测量时发现体温计抽出后附有坏死的肠黏膜；多以伏卧为主，勉强赶起后摇晃欲倒，极度消瘦；病猪在耳尖、四肢内侧有出血点；小公猪阴茎红肿，包皮积尿，有浑浊物挤出；部分猪出现强直性抽搐，发出嘶哑的叫声；病程几天到1个月，其中育肥猪症状没仔猪明显。

2.1.3 病理变化 扁桃体轻度水肿，充血；淋巴结出血性水肿，切面多汁，甚至向外流滴；肾表面有极少量出血点，呈土黄色；少数病例脾边缘出血性梗死；有的腹腔有大理石样变和周边出血；回肠、育肠及直肠粘膜有数量不变的出血点；个别猪回盲瓣处有浅浅的溃疡灶。

2.2 实验室检验结果

2.2.1 触片镜检 无菌采取刚病死仔猪心、肝、肺、血液等病料直接触片，革兰氏和瑞氏染色镜检，未发现细菌。

2.2.2 细菌培养 无菌采取具非典型猪瘟症状仔猪脾和淋巴结接种普通琼脂、普通肉汤培养基后置37℃恒温箱培养24h涂片观察，均未发现细菌生长。

2.2.3 酶联免疫吸附试验(ELISA)抗原测定结果

附表 抗原测定结果

待检血液12345678阳性阴性 结果+++++++++++++++++++++++++-

2.2.4 兔体交叉免疫试验 3份被检病料接种呈定型热反应，据此判定被检3头猪的病料中均含有猪瘟病毒。根据流行病学、临床症状、病理变化及实验室诊断等进行综合判断。确诊为非典型性猪瘟。

2.3 防治结果

2.3.1 超前免疫 母源抗体水平在不同日龄、不同个体的分布是不平衡的，这就决定首免日期的不一致。仔猪哺乳前注射猪瘟疫苗可避免首免日期的差异，避免母源抗体的影响，接种1~2h后吃母乳，可使仔猪获得坚强免疫力。进行2组试验：一组为22头新生仔猪(共2窝)，进行超免；另一组24头(2窝)，在20日龄首免。实验结果超免获得成功，只有1头发病；20日龄首免的，有4头在注苗前就已发病，注苗后又有8头发病。

2.3.2 大剂量疫苗 大剂量疫苗可以中和一定的抗体而起到强化免疫作用，同时诱生一定量的干扰素，促进病猪耐过。进行2组试验。一组16头20日龄仔猪，体温正常，注射5头份疫苗进行了强化免疫，结果没有1头发病死亡；一组16头体温超过正常范围，刚发病仔猪，注射10头份疫苗进行治疗，同时配合青、链霉素和丁胺卡那霉素，结果痊愈4头，死亡5头，4头成为僵猪。由此可见，应用大剂量疫苗进行强化免疫和初期紧急治疗有一定效果，这一点正好符合免疫学有关原理。

基于上面2个试验，笔者开始对仔猪全部实行超前免疫，对尚未发病猪实行6头份紧急接种，对发病期短的猪只进行10头份的大剂量疫苗治疗，同时配合抗菌素；对濒临死亡和已死亡的猪采用深埋办法，全场同时用2%~ 3%火碱大面积消毒。此后，疫情很快得到控制。

3 讨论

3.1 发病原因分析

3.1.1 母源抗体的干扰 初生仔猪通过初乳获得母源抗体，形成被动免疫，这对新生仔猪抵抗猪瘟病毒的感染具有重要作用。该场仔猪20d进行首免，这时有些仔猪母源抗体低下，致使未接种就已感染甚至发病；而有的仔猪母源抗体过高，母抗抑制注入疫苗的应答，所有这些为典型猪瘟的感染创造了条件。

3.1.2 仔猪的胎盘感染 每年春秋的定时注苗，使得有些母猪在妊娠早期接种，这样可引起胎盘感染。胎盘感染存活的仔猪往往构成持续性感染者(亚临床感染)，但在外界因素突变(如气候异常)，引起猪抵抗力下降，则表现出临床症状，但多不典型。本场发病时，天气阴雨、寒冷，这为非典型猪瘟发生的诱因。

3.1.3 疫苗使用不当 种畜场兽医人员的业务水平不高，注射疫苗时常不按比例稀释疫苗；注射不严密，各猪剂量常不均匀；疫苗使用前未作毒价测定等，致使猪体注苗后不能产生足够的猪瘟抗体。这是育肥猪发生非典型猪瘟的主要原因。

3.2 非典型性

部分猪具有典型猪瘟症状，即淋巴结切面的大理石样变，大肠的纽扣状溃疡等。这主要是由于低毒力猪瘟病毒感染引起的。而低毒力株猪瘟病毒的存在，主要又与其所处环境有密切的关系：猪瘟病毒在抑制环境下(有一定抗体)，连续继代，其毒力逐渐减弱；反之，在非抑制环境(无中和抗体)，弱毒又会逐渐增强。如果个体的中和抗体水平不足抵抗猪瘟病毒的感染，就会呈现出一种不完全免疫状态，形成病毒的抑制环境，一旦病原入侵，与宿主原有抗体产生中和作用，其致病力必定减弱，多表现非典型。

3.3 抗原与抗体

猪瘟的确诊与净化的依据不是猪瘟抗体的实验室诊断，而是猪瘟抗原(带毒猪)的实验室诊断。根据研究，猪瘟抗原抗体之间存在一定的微妙关系。同一头猪同一时间可能存在强毒抗原(即带毒)，但不一定存在强毒抗体，存在强毒抗体时不一定存在强毒抗原。净化的依据应该是抗原阳性的那些带毒猪，而不是猪瘟强毒抗体阳性猪。

3.4 超前免疫

超前免疫在实际操作中有一定的困难，如母猪分娩过程可能拖长或者母猪晚上产仔，仔猪出生后已吮吸了初乳，疫苗稀释后保存时间过长等，都会导致免疫失败。

[1]卢中华, 崔保安, 罗国琦等. 动物微生物学[M]. 北京: 中国科学技术出版社, 1999.

[2]吴增坚, 养猪场猪病防治[M]. 修订版. 北京: 金盾出版社, 2008.

[3]荆所义, 高献用, 胡迎利. 新编猪病防治技术手册[M], 郑州: 中原农民出版社, 2004.

[4]方在治. 非典型猪瘟的发生与防制[J]. 中国兽医杂志, 2003, 51-52.

[5]蔡宝祥. 家畜传染病学[M]. 第4版. 北京: 中国农业出版社, 2001.

（2011–04–19）

S858.28

A

1007-1733(2011)06-0006-02