皋茶急性毒性安全性评价研究

王海燕，龙子江，袁 艺，徐 燕

（1.安徽农业大学生命科学学院，安徽合肥230036；2.合肥工业大学，安徽合肥230009；3.安徽中医学院药理教研室，安徽合肥230038；4.安徽农业大学茶与食品科技学院，安徽合肥230036）

皋茶急性毒性安全性评价研究

王海燕1，2，龙子江3，袁 艺1，徐 燕4

（1.安徽农业大学生命科学学院，安徽合肥230036；2.合肥工业大学，安徽合肥230009；3.安徽中医学院药理教研室，安徽合肥230038；4.安徽农业大学茶与食品科技学院，安徽合肥230036）

目的：通过1次大剂量给药，观察小鼠出现的毒性反应及死亡情况，考察皋茶应用的安全性。方法：依据GB15193-2003《食品安全性毒理学评价程序和方法》进行急性毒性实验，皋茶水提物小鼠灌胃给药0.4mL/10g体重，灌胃给药1次，药后正常饲养，连续观察14d。结果：皋茶水提物小鼠灌胃最大给药量为22.8g浸膏/kg，相当于临床60kg成人拟定日用量275倍。结论：皋茶水提物口服毒性低，应用较安全。

皋茶，急性毒性，安全性

1 材料与方法

1.1 实验材料

皋茶 安徽舒城提供；实验动物 昆明种小鼠，体重18～22g，雌雄各半，由河南省实验动物中心提供，合格证号SCXK（豫）2005-0001。

1.2 实验方法［4-6］

1.2.1 皋茶水提物（浸膏）制备 取皋茶样品250g，沸水三次浸提（各次茶水比为1∶20、1∶10、1∶10）；三次浸提时间分别为30、20、10min，用100目尼龙滤布挤出茶汁，脱脂棉过滤，合并三次浸提茶汤，减压浓缩至膏状。浸膏含量：2.75g生药/g；拟定人用量：5g浸膏/d（相当于13.75g生药/d）。保存：4℃冰箱冷藏备用。

表1 皋茶水提物灌胃对雌性小鼠体重的影响（n=10，s）

表1 皋茶水提物灌胃对雌性小鼠体重的影响（n=10，s）

10 / 20.25±1.27 22.80±1.18 25.25±1.14皋茶水提物组14d空白对照组组别 动物数（n） 剂量（g/kg） 体重（g）用药前 用药后7d 用药后10 62.8 20.10±1.15 22.95±1.21 25.75±1.11

表2 皋茶水提物灌胃对雄性小鼠体重的影响（n=10，s）

表2 皋茶水提物灌胃对雄性小鼠体重的影响（n=10，s）

组别 动物数（n） 剂量（g/kg） 体重（g）用药前 用药后7d 用药后14d

表3 皋茶水提物灌胃对雌性小鼠食量的影响（n=2笼，s）

表3 皋茶水提物灌胃对雌性小鼠食量的影响（n=2笼，s）

注：每笼有5只小鼠，表4同。

组别 笼数（n） 剂量（g/kg） 食量（g/笼）用药前 用药后7d 用药后14d

表4 皋茶水提物灌胃对雄性小鼠食量的影响（n=2笼s）

表4 皋茶水提物灌胃对雄性小鼠食量的影响（n=2笼s）

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1.2.2 动物实验预实验 取体重18～22g小鼠20只，雌雄各半，禁食（不禁水）8h后，将皋茶浸膏用蒸馏水配制成五种浓度分别为57%（最大浓度）、50%、45%、40%、35%的药液，每种浓度取4只小鼠进行灌胃给药1次，0.4mL/10g体重（最大给药容积），药后各组小鼠正常饲养，观察药后动物全身反应及死亡情况。

1.2.3 正式实验

1.2.3.1 动物分组 因预实验没有测出皋茶水提物小鼠灌胃给药的最小死亡量，无法测得LD50值，故改测其最大耐受量。取体重18～22g小鼠40只，雌雄各半，适应性饲养5d后，按照性别和体重均分为两组：空白对照组和药物组（皋茶水提物组），每组20只，雌雄各半。

1.2.3.2 药液的配制 临用前，用蒸馏水将皋茶水提物浸膏配制成浓度为57%的药液（相当于1.57g生药/mL）备用。

1.2.3.3 给药方法 将小鼠禁食（不禁水）8h后，药物组各鼠分别灌胃上述浓度为57%的药液（最大浓度）0.4mL/10g体重（最大容积），空白对照组灌胃等容量的蒸馏水，给药1次，药后正常饲养，连续观察14d。

1.2.3.4 观察指标 体重和耗食量：用药前及药后7、14d称各鼠体重及日食量一次；毒性症状观察：观察小鼠的外观（a.毛发色泽，是否平顺或耸毛；b.皮肤颜色，是否有红肿、瘀紫、皮疹；c.眼、鼻、口腔是否有异样分泌物或呕吐物；d.呼吸道反应，是否有咳嗽、喷嚏或哮喘）、行为活动（a.镇静或兴奋；b.四肢活动；c.是否有抽搐、强直或扭体反应）、粪便性状（a.颜色；b.成形、半成形或稀便）等全身反应状况及死亡情况。

2 结果与分析

2.1 预实验结果

经1.2.2预实验，结果发现：小鼠连续观察7d，无任何异常反应和死亡现象。

2.2 正式实验结果

药后及停药观察期间，各组小鼠进食、饮水均正常，体重呈增长趋势，与空白对照组比较无明显差异（P＞0.05），详见表1～表4。各组小鼠外观特征基本正常，毛发色泽正常，有少数动物出现耸毛现象，皮肤颜色粉红正常，耳、眼、口、鼻未见异样分泌物，呼吸道反应正常，未见咳嗽、哮喘及喷嚏现象，四肢活动、步态正常，灌胃后24h内，药物组多数动物排出棕黑色软粪便，24h以后粪便逐渐恢复正常，呈灰褐色，颗粒状成形粪便，无一动物死亡，详见表5和表6。

3 结论

皋茶水提物小鼠灌胃最大给药量为22.8g浸膏/kg，相当于62.8g生药/kg（按照公斤体重折算，相当于临床60kg成人拟定日用量（5g浸膏/d，相当于13.75g生药/d）的275倍；按照体表面积折算，相当于临床成人日用量的35倍）；实验结果表明：皋茶水提物口服给药毒性较低，应用较安全。

［1］方文培.中国植物志［M］.第46卷.北京：科学出版社，1981.

［2］方文培.中国槭树科的修订［J］.植物分类学报，1966，11（2）：139.

［3］徐延志.槭树科的地理分布［J］.云南植物研究，1996，18（1）：43-50.

［4］李仪奎.中药药理实验方法学［M］.第二版.上海：上海科学技术出版社，2006：1001-1007.

［5］陈奇.中药药理研究方法学［M］.北京：人民卫生出版社，2000：1131.

［6］中华人民共和国卫生部GB111593-94.食品安全毒理学评价程序和方法［S］.北京：中国标准出版社，1995.

Acute toxicity evaluation of Gaocha

WANG Hai-yan1，2，LONG Zi-jiang3，YUAN Yi1，XU Yan4
（1.College of Life Science，Anhui Agricultural University，Hefei 230036，China；2.Hefei University of Technology，Hefei 230009，China；3.Anhui University of Traditional Chinese Medicine，Hefei 230038，China；4.College of Tea&Food Science and Technology，Anhui Agricultural University，Hefei 230036，China）

Objective：Through once large dose feeding Gaocha and observing the rapid toxicity effect on the mice， the safety of Gaocha was studied.Methods：The test of acute toxicity according to GB15193-2003（Appraisal process and Methods of Toxicity of Food Safety）was carried out to research the toxicology of food of the Gaocha. The mice were feed Gaocha with 0.4mL/10g each time，after that were feed normal.Then observed and recorded in the next 14d.Results：There was no evident poisoning symptom or any death for animals after test on the young mice of different sex which had eaten the Gaocha with 22.8g/kg.Be equivalent to that 275 times of adult drink amounts a day.Conclusion：It is concluded that the Gaocha is highly safe for drinking.

Gaocha；acute toxicity；safety

TS201.4

A

1002-0306（2011）02-0316-03

皋茶是苦茶槭嫩芽叶经一系列加工后，制成的一种代茶饮料。苦茶槭（苦条槭）（Acer.Ginnala. Maxim），属植物界被子植物亚门（Angiosperms），双子叶植物纲（Dicotyledoneae），槭树科（Aceraceae），槭属（AcerL），落叶小乔木或灌木，是我国广大林区一种有重要经济价值的野生药用植物资源。它既是良好的庭园和街道观赏树木、优质纤维树种、栲胶原料、黑色染料，又是具有治病健身之药效的新型保健茶饮料皋茶的原料［1-3］。近年来，皋茶以其独特的品质和保健功能作为一种非茶属天然植物饮料逐渐在国内市场上走俏，在现代商品市场上崭露头角。皋茶资源极为丰富，因基础研究不足，限制了其开发力度，目前对皋茶的药理功能研究甚少，且迄今未见其毒理学研究报告，本文对皋茶急性毒性进行了研究，为进一步研究开发新型保健饮料提供了基础研究依据，同时为皋茶的资源开发利用（食品和医药领域）奠定初步基础研究，潜在经济效益、社会效益明显。

2010-08-13

王海燕（1977-），女，讲师，研究方向：植物学教学科研及天然产物开发与研究。

高校省级优秀青年人才基金重点项目（2010SQRL061ZD）。

表6 皋茶水提物灌胃对小鼠死亡情况的影响