半枝莲化学成分的分离与鉴定

余群英，张德武，戴胜军

（烟台大学药学院，山东 烟台 264005）

化学成分

半枝莲化学成分的分离与鉴定

余群英，张德武，戴胜军*

（烟台大学药学院，山东 烟台 264005）

目的：对半枝莲Scutellaria barbata D.Don全草的化学成分进行研究。方法：采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、重结晶等方法进行分离纯化，根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果：分离鉴定了 9个 化 合 物，分 别 为：β-谷 甾 醇 （β-Sitosterol，1）、5-羟 基-7，4′-二 甲氧 基 黄 酮 （5-hydroxy-7，4′-dimethoxyflavone，2）、5-羟基-7，8，4′-三甲氧基黄酮（5-hydroxy-7，8，4′-trimethoxyflavone，3）、三裂鼠尾草素（5-Hydroxy-6，7，4′-trimethoxyflavone，salvigenin，4）、汉黄芩素（5，7-dihydroxy-8-methoxyflavone，wogonin，5）、2-羟基-3-甲基蒽醌（2-hydroxy-3-methylanthraquinone，6）、反式-3-（4′-羟基苯基）丙烯酰乙酯 ［（E）-3-（4-hydroxyphenyl）acrylic acid ethyl ester，7］、对羟基苯甲酰乙酯（ethyl-4-hydroxy benzoate，8）、对羟基苯甲醛（p-hydroxybenzaldehyde，9）。结论：化合物2，3，6，7为首次从黄芩属中分离得到，化合物4为第一次从半枝莲中发现。

唇形科；黄芩属；半枝莲；化学成分

半枝莲为唇形科黄芩属半枝莲Scutellaria barbataD.Don的干燥全草［1］，别名狭叶韩信草、并头草、牙刷草等，分布于我国大部分地区。《全国中草药汇编》中记载 “味微苦，性凉，归肝、肾、肺经，具有清热解毒、活血祛瘀、消肿止痛、抗癌功效。用于肿瘤、阑尾炎、肝炎、肝硬化腹水、肺脓疡；外用治乳腺炎、痈疖肿毒、毒蛇咬伤、跌打损伤等”［2］。现代药理学研究表明，半枝莲具有抗肿瘤、抗氧化、解热保肝、抗病原微生物、免疫调节、抗致突变等作用［3-5］。为了寻找半枝莲中的生物活性成分，作者对半枝莲干燥全草的75%乙醇提取物进行了化学成分研究，共分离鉴定了9个化合物，分别为 β-谷甾醇（β-Sitosterol，1）、5-羟基-7，4′-二甲氧基黄酮（5-hydroxy-7，4′—dimethoxyflavone，2）、5-羟基-7，8，4′-三甲氧基黄酮（5-hydroxy-7，8，4′-trimethoxyflavone，3）、三裂鼠尾草素（5-Hydroxy-6，7，4′-trimethoxyflavone，Salvigenin，4）、汉黄芩素（5，7-dihydroxy-8-methoxyflavone，wogonin，5）、2-羟基-3-甲基蒽醌（2-hydroxy-3-methyl anthraquinone，6）、反式-3-（4′-羟基苯基）丙烯酰乙酯 ［（E）-3-（4-hydroxyphenyl）acrylic acid ethyl ester，7］、对羟基苯甲酰乙酯 （Ethyl-4-hydroxy benzoate，8）、对羟基苯甲醛（p-hydroxybenzaldehyde，9），化合物2～9的结构式见图1。其中化合物2，3，6，7为首次从黄芩属中分离得到，化合物4为第一次从半枝莲中发现。

图1 化合物2～9化学结构

1 仪器与试药

XT-4微型熔点测定仪（温度未校正），Autospec-Ultima ETOF型质谱仪，Varian Unity BRUKER-400型核磁共振仪，岛津UV240紫外光谱仪。Sephadex LH-20（北京金欧亚进口分装）；薄层色谱硅胶（GF254）、柱色谱硅胶（200～300目）（青岛海洋化工厂）。半枝莲药材购于山东济宁市，经烟台大学药学院生药室赵燕燕教授鉴定为半枝莲Scutellaria barbataD.Don的干燥全草，标本（YP08077）保存于烟台大学药学院标本室。

2 提取分离

干燥的半枝莲全草5kg用6倍量体积分数75%乙醇回流提取3次，每次1.5 h，提取液合并，减压浓缩得浸膏，将浸膏悬浮于适量水中，依次用石油醚、三氯甲烷、醋酸乙酯、正丁醇反复萃取。三氯甲烷部分（101 g）进行硅胶柱色谱分离，用环己烷－丙酮梯度洗脱。其中90∶5洗脱部分先上硅胶柱，环己烷－丙酮梯度洗脱，得化合物1；90∶10洗脱部分上硅胶柱，环己烷－丙酮梯度洗脱，分别得化合物2、3；90∶13洗脱部分再上硅胶柱，环己烷－丙酮梯度洗脱，配合制备薄层色谱 ［三氯甲烷－甲醇（15∶1）］，分别得化合物 4、5、6；80∶20洗脱部分同样上硅胶柱，环己烷－丙酮梯度洗脱，结合制备薄层色谱 ［（三氯甲烷－甲醇（10∶1）］，分别得化合物7、8；75∶25洗脱部分也再次上硅胶柱，环己烷－丙酮梯度洗脱，经制备薄层色谱 ［三氯甲烷－甲醇（8∶1）］，得化合物9。

3 结构鉴定

3.1 化合物1

无色针晶（石油醚 －醋酸乙酯），mp.136～137℃。喷10%硫酸－乙醇溶液显紫红色。Liebermann-Burchard反应阳性。将该化合物与对照品β-谷甾醇共薄层色谱，Rf值在多种溶剂系统中一致，故鉴定该化合物为β-谷甾醇。

3.2 化合物2

淡黄色针晶（丙酮），mp.163～165℃。盐酸－镁粉反应显阳性，提示该化合物可能为黄酮类化合物。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）谱中，δ12.91（1H，s）表明有5-OH；δ8.04（2H，d，J＝8.8 Hz，H-2′，6′），7.11（2H，d，J＝8.8 Hz，H-3′，5′）组成 AA′BB′系统；δ6.91（1H，s）为黄酮 H-3特征信号；δ6.77（1H，d，J＝2.2 Hz，H-8），6.37（1H，d，J＝2.2 Hz，H-6）表明存在间位偶合的两个芳香质子；δ3.87（3H，s），3.86（3H，s）为 2个甲氧基信号。13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz），δ 163.6（C-2），103.7（C-3），182.0（C-4），161.2（C-5），98.0（C-6），165.2（C-7），92.7（C-8），157.3（C-9），104.7（C-10），122.7（C-1′），128.4（C-2′），114.6（C-3′），162.4（C-4′），114.6（C-5′），128.4（C-6′），56.1（-OCH3），55.6（-OCH3）。该化合物的波谱数据与文献［6］报道的 5-羟基-7，4′-二甲氧基黄酮一致，故鉴定该化合物为5-羟基-7，4′-二甲氧基黄酮。

3.3 化合物3

淡黄色针晶（三氯甲烷－甲醇），mp.286～288℃。盐酸 －镁粉和 FeCl3反应呈阳性。1H-NMR（CDCl3，400 MHz）谱中，δ12.60（1H，s）为黄酮5-OH特征信号；δ7.92（2H，d，J＝9.0 Hz，H-2′，6′），7.02（2H，d，J＝9.0 Hz，H-3′，5′）构成 AA′BB′偶合系统；δ6.59（1H，s）归为H-6信号；δ6.42（1H，s）归为 H-3信号；δ3.94（3H，s），3.90（3H，s），3.85（3H，s）表明存在 3个甲氧基。13CNMR（CDCl3，100 MHz）δ163.9（C-2），103.8（C-3），182.7（C-4），157.5（C-5），95.7（C-6），158.5（C-7），128.9（C-8），149.4（C-9），104.8（C-10），123.6（C-1′），128.1（C-2′），114.6（C-3′，5′），162.7（C-4′），114.6（C-5′），128.1（C-6′），55.5（4′-OCH3），56.3（7-OCH3），61.7（8-OCH3）。该化合物的波谱数据与文献［7］报道的 5-羟基-7，8，4′-三甲氧基黄酮一致，故鉴定该化合物为5-羟基-7，8，4′-三甲氧基黄酮。

3.4 化合物4

淡黄色针晶（丙酮），mp.191～192℃盐酸－镁粉反应呈阳性，提示该化合物可能为黄酮类化合物。ESI-MSm／z329.1［M＋H］＋。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）谱中，δ12.88（1H，s）为黄酮5-OH特征信号；δ8.05（2H，d，J＝9.0 Hz，H-2′，6′），7.11（2H，d，J＝9.0 Hz，H-3′，5′）构成 AA′BB′偶合系统；δ6.93（1H，s）为黄酮 H-3特征信号；δ6.91（1H，s）为 H-8信号；δ3.93（3H，s），3.87（3H，s），3.75（3H，s）归为 3个甲氧基信号。13CNMR（DMSO-d6，100 MHz），δ163.5（C-2），103.2（C-3），182.1（C-4），152.0（C-5），131.8（C-6），158.6（C-7），91.5（C-8），152.5（C-9），105.0（C-10），122.6（C-1′），128.2（C-2′，6′），114.5（C-3′，5′），162.3（C-4′），59.9（6-OCH3），56.3（7-OCH3），55.5（4′-OCH3）。该化合物的波谱数据与文献［8］报道的三裂鼠尾草素一致，故鉴定该化合物为三裂鼠尾草素。

3.5 化合物5

黄色针晶（三氯甲烷），mp.203～204℃。盐酸－镁粉反应呈红色，提示该化合物可能为黄酮类化合物。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）谱中，δ 12.51（1H，s）为黄酮5-OH质子特征信号；δ10.82（1H，s）归为 7-OH质子信号；δ8.09（2H，m），7.60（3H，m）归属为B环上5个质子信号；δ6.99（1H，s）表明存在 H-3；δ6.32（1H，s）为 H-6信号；δ3.87（3H，s）归为甲氧基质子信号。13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）：δ163.0（C-2），105.0（C-3），182.0（C-4），156.2（C-5），99.1（C-6），157.4（C-7），127.8（C-8），149.8（C-9），103.7（C-10），130.8（C-1′），129.2（C-2′，6′），126.2（C-3′，5′），122.0（C-4′），61.0（-OCH3）。该化合物的波谱数据与文献［9］报道的汉黄芩素一致，故鉴定该化合物为汉黄芩素。

3.6 化合物6

黄色粉末（丙酮），mp.302～304℃。UV（CH3OH）λmax（nm）：244，276为蒽醌类化合物的特征吸收。ESI-MSm／z237.4［M＋H］＋。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）谱中：δ11.0（1H，s，C2-OH）表明存在 β-酚羟基；δ8.11（2H，m，H-5，8），7.86（2H，m，H-6，7）分别为蒽醌母核一个芳环上α位和β位上质子信号；δ7.91（1H，s，H-4），7.52（1H，s，H-1）为蒽醌母核一个芳环上α位上的两个质子信号；δ2.27（3H，s，C3-CH3）归为 β-CH3质子信号。13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）：δ111.2（C-1），161.2（C-2），131.8（C-3），129.8（C-4），124.9（C-4a），126.4（C-5），134.3（C-6），133.8（C-7），126.4（C-8），133.1（C-8a），182.4（C-9），133.0（C-9a），181.5（C-10），133.1（C-10a），16.1（CH3）。该化合物的波谱数据与文献［10］报道的2-羟基-3-甲基蒽醌一致，故鉴定该化合物为2-羟基-3-甲基蒽醌。

3.7 化合物7

油状物（丙酮），与 FeCl3-K3［Fe（CN）6］试剂显蓝色，说明存在酚羟基。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）谱中共有12个质子信号：δ10.0（1H，br.s，4′-OH）为酚羟基信号；δ7.62（1H，d，J＝16.0 Hz，H-2），6.35（1H，d，J＝16.0 Hz，H-2）为一典型反式双键的两个质子信号；δ7.51（2H，d，J＝8.5 Hz，H-2′，6′），6.81（2H，d，J＝8.5 Hz，H-3′，5′）为苯环上的 AA′BB′偶合系统质子信号；δ4.17（2H，q，J＝7.1 Hz），1.28（3H，t，J＝7.1 Hz）表明有-O-CH2CH3片段；13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）δ：167.8（-C＝O），116.0（C-2），114.6（C-3），144.9（C-1′），129.9（2C-2′，6′），126.0（2C-3′，5′），159.1（C-4′），60.3（-CH2），14.2（-CH3）。以上数据与参考文献［11］对照一致，故鉴定该化合物为反式-3-（4′-羟基苯基）丙烯酰乙酯［（E）-3-（4-hydroxyphenyl）acrylic acid ethyl ester］。

3.8 化合物8

无色结晶（石油醚 －醋酸乙酯），mp.117～118℃。与FeCl3-K3［Fe（CN）6］试剂显蓝色，示有酚羟基存在。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）谱中共有10个质子信号：δ10.35（1H，br.s，4′-OH）为酚羟基质子信号；δ7.83（2H，d，J＝8.6 Hz，H-2′，6′），6.87（2H，d，J＝8.5 Hz，H-3′，5′）处出现的双质子双峰构成一个AA′BB′偶合系统；δ4.26（2H，q，J＝7.0 Hz），1.31（3H，t，J＝7.0 Hz）说明结构中有-O-CH2CH3片段。以上数据与参考文献［12］对照一致，故鉴定该化合物为对羟基苯甲酰乙酯（Ethyl-4-hydroxy benzoate）。

3.9 化合物9

无色针晶（石油醚－醋酸乙酯），mp.111～113℃。与FeCl3-K3［Fe（CN）6］试剂显蓝色，示有酚羟基存在。1H-NMR（DMSO-d6，400MHz）谱中共有6个质子信号：δ10.64（1H，br.s，-OH）为酚羟基信号；δ9.80（1H，s，-CHO）为醛基质子信号；δ7.78（2H，d，J＝8.5 Hz，H-2′，6′），6.95（2H，d，J＝8.5 Hz，H-3′，5′），说明有一个AA′BB′偶合系统的苯环。以上数据与参考文献［13］对照一致，故鉴定该化合物为对羟基苯甲醛（p-hydroxybenzaldehyde）。

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Isolation and Identification of Chem ical Constituents from the W hole Herb of Scutellaria Barbata

YU Qun-ying，ZHANG De-wu，DAI Sheng-jun
（School of Pharmaceutical Science，Yantai University，Yantai 264005，China）

Objective：To investigate the chemical constituents of the whole herb of Scutellaria barbata D.Don.Methods：The compounds were isolated by silica gel column chromatography and purified by Sephadex LH-20 column chromatography and recrystallization.The structures were elucidated on the basis of physicochemical properties and spectroscopic analyses.Results：Nine compounds were separated and identified as：β-sitosterol（1），5-hydroxy-7，4′-dimethoxyflavone（2），5-hydroxy-7，8，4′-trimethoxyflavone（3），5-hydroxy-6，7，4′-trimethoxyflavone，salvigenin（4），5，7-dihydroxy-8-methoxyflavone（wogonin，5），2-hydroxy-3-methylanthraquinone（6），（E）-3-（4-hydroxyphenyl）acrylic acid ethyl ester（7）；ethyl-4-hydroxybenzoate（8），p-hydroxybenzaldehyde（9）.Conclusion：compounds 2，3，6，7 were isolated from the genus Scutellaria for the first time，and compound 4 was obtained from S．barbata.

Lamiaceae；Scutellaria；Scutellaria barbata；Chemical constituents

*戴胜军，Tel：（0535）6706025，E-mail：sjdai8616＠sina.com

2010-10-20）