刘来正 高宝益
山银花为忍冬科植物灰毡毛忍冬(Lonicera macranthoides Hand.-Mazz)、红腺忍冬(Lonicera hypoglauca Miq).华南忍冬(Lonicera confusa DC).或黄褐毛忍冬(Lonicera fulvotomentosa Hsu et S.C.Cheng)的干燥花蕾或带初开的花[1],主流品种为灰毡毛忍冬。而我院购进的“山银花”,其来源为忍冬科植物华西忍冬(Lonicera webbiana Wall.ex DC.)的干燥花蕾[2,3]。为了更加简便快速地鉴别真伪,确保药材质量,作者在以前研究[4]的基础上,又对灰毡毛忍冬与华西忍冬进行了紫外谱线组法鉴别研究,为山银花的真伪鉴别提供新的科学方法和依据。
1.1 TU-1901双光束紫外可见光分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司),参数:原阶紫外光谱,波长范围190~400 nm,狭缝1.0 nm;中速扫描,量程范围 0~3 ABS。METTLER TOLEDO ABS135-S十万分之一电子天平。
1.2 灰毡毛忍冬(购自湖南隆回金银花科技开发公司,经刘来正副教授鉴定),华西忍冬(我院2007年从安徽某中药饮片有限公司购进,批号为061022,产地为山西省)。
1.3 无水乙醇、氯仿、石油醚(60℃ ~90℃)为分析纯,双蒸水(自制)。
2.1 方法 取山银花和华西忍冬粉末(过20目筛)各4份,每份2.00 g,置20 ml具塞锥形瓶中,分别加入双蒸水、无水乙醇、氯仿、石油醚(60℃ ~90℃)各20.0 ml,密塞,室温放置,浸泡12 h,滤过,得供试液。供试液置1 cm石英比色皿中上机扫描测试,以相应溶剂为空白,若吸收度上限超过3.000时,将供试液以相同溶剂稀释后再上机测试。根据测试情况,将滤液作一定稀释(水提取液含原药材约为0.4 mg/ml,无水乙醇提取液含原药材约为4 mg/ml,氯仿提取液含原药材约为10 mg/ml,石油醚提取液含原药材约为20 mg/ml),置1 cm石英比色皿中,以相应溶剂空白为对照,在紫外可见光分光光度计扫描。
2.2 结果 山银花和华西忍冬紫外谱线组谱线最大吸收峰数目及峰位值(见图1~4)。它们在4种溶剂浸液紫外谱线组图谱峰位值见表1。
图1 水浸液紫外光谱图
图2 无水乙醇浸液紫外光谱图
图3 氯仿浸液紫外光谱图
图4 石油醚浸液紫外光谱图
表1 山银花和华西忍冬紫外谱线组图谱峰位值
袁久荣教授首创的紫外谱线组法,在单一紫外谱线法鉴别中药及其中药复方制剂的基础上,从中医用药作用的的整体观出发,着眼于中药内所含化学成分的总体宏观效应,改单一溶剂为4种固定溶剂,改单一紫外谱线为4条谱线组,是对中药材和中药制剂进行鉴别的一种新方法[5-6]。紫外谱线组法对来源于不同科不同属的药材的真伪鉴别有较好的鉴别效果[7-8],而对很多同科同属[9-11]、甚至是同一种药材的不同炮制品[12-13]、同一品种不同产地[14-16]的药材,由于它们亲缘关系很近,所含化学成分类似,但通过紫外谱线组图谱方法,综合比较其图谱差异,仍然可以获得较好的鉴别效果。
纵观本实验紫外谱线组全貌,山银花与其伪品华西忍冬水提取液和石油醚提取液中紫外吸收的峰形、最大吸收峰及其峰位值差别明显;乙醇提取液和氯仿提取液中虽然最大吸收峰峰位值相同,但峰形不同,乙醇提取液中山银花次高峰出现在297 nm处,在327 nm处山银花第3峰明显,而华西忍冬次高峰则出现在291 nm处,第3峰不明显;氯仿提取液中华西忍冬在284 nm处次高峰明显,而山银花不明显。实验结果证实,山银花与华西忍冬的中药紫外谱线组法图像及吸收峰均具有显著差异,可以作为鉴定山银花与其伪品华西忍冬的主要依据之一。因此,采用4种固定溶剂紫外光谱组法鉴别山银花与华西忍冬,在一定程度上丰富了中药山银花的鉴别方法。
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