恒温摇摆式水浴箱制备冷沉淀的优势

孙森，谭帮财，杜滨

青岛市中心血站 业务科；山东 青岛266071

恒温摇摆式水浴箱制备冷沉淀的优势

孙森，谭帮财，杜滨

青岛市中心血站 业务科；山东 青岛266071

目的研究恒温摇摆式水浴箱制备冷沉淀的优势及影响因素。方法随机取24袋新鲜冰冻血浆（200±20）mL，随机分为第1组和第2组，每组12袋，分别用恒温摇摆式回收率。结果第1组冷沉淀FⅧ的回收率为（47.63±4.06）%，第2组冷沉淀FⅧ的回收率为（64.17±5.96）%，前者平均用时2.5h，而后者平均用时仅为1.0h。结论使用恒温摇摆式水浴箱 （CT-4T.6C型）制备冷沉淀其优势在于能够有效控制虹吸法制备冷沉淀的关键控制点，即精确控制水浴温度和融化速度。

水浴箱；冷沉淀；恒温摇摆式；凝血因子；回收率

随着现代输血医学的不断发展，冷沉淀制剂（内含凝血因子FⅧ、纤维蛋白原Fbg等）的临床应用越来越广泛，该制剂对儿童及成人甲型血友病、血管性血友病、纤维蛋白原缺乏症及产妇大出血等均有明显疗效[1]。但不同的制备工艺所制备的冷沉淀，其质量存在较大差异。虹吸法制备冷沉淀会使FⅧ、Fbg的回收率明显提高，而专业的融化设备和制备技术是保证冷沉淀质量的重要因素。因此，笔者分别采用普通水浴箱（KJX-Ⅲ型）和恒温摇摆式水浴箱（CT-4T.6C型）制备冷沉淀并进行质量比较，分析虹吸法制备冷沉淀的关键点与人为因素。现报告如下。

1 材料和方法

1.1 材料与仪器

大容量离心机（CR-7型），日本日立公司生产；速冻冰箱（MODF-U460B型），美国Themofoma公司生产；冷冻冰箱（BP-375型），中国Haier公司生产；普通水浴箱（KJX-Ⅲ型），苏州医用仪器厂生产；低温水浴箱（CT-4T.6C型自动摇摆式），美国Cytotherm公司生产；四通道凝血因子分析仪（CA-50），日本SYSMEX公司生产；热合机（SE-50），国产。

1.2 冷沉淀原料浆制备

选用苏州莱士公司生产的密闭三联袋，在采集400mL全血后6～8h内离心分离制得血浆24袋（200±20mL），混匀后每袋留取2mL样本备用。后血浆迅速置于-80°C速冻冰箱内速冻，冻结后置于-30°C冰箱保存备用。

1.3 制备冷沉淀

取24袋备用血浆在室温中放置5min，待塑料管道变软后，随机分为第1组和第2组，每组12袋。

步骤一：将第1组放入设定温度为4°C的普通水浴箱中。血浆逐渐融化虹吸到空卫星袋中，剩余白色絮状物附着于冰块上约（25±5）mL，即冷沉淀。

步骤二：将第2组固定于恒温摇摆式水浴箱的血袋夹中，并垂直浸没于恒温（6°C）的循环水浴中。水浴箱自动摇摆，血浆融化，上清液虹吸流入空袋，底部剩余白色絮状物，制得冷沉淀（25±5）mL。

1.4 取样检测

将冷沉淀及FFP样本置入37°C水浴中，冷沉淀融化后取2mL样本与FFP样本一起检测Ⅷ活性，并计算其回收率。Ⅷ回收率（%）=冷沉淀FVIII获得量（IU）/原料血浆FⅧ总量（IU）×100%[2-4]。

1.5 统计学处理

采用t检验，两组制备冷沉淀所得FⅧ回收率比较如表 1。

表1 两组制备冷沉淀所得FVIII回收率比较 （n=12，x±s）

2 结 果

从表1中可以看出，两组设备制备的冷沉淀，其FⅧ含量均符合国家卫生部制订的《血站基本标准》的质量要求。但恒温摇摆式（CT-4T.6C型）制备冷沉淀所需时间短，仅为1h，并且该设备所制备的FⅧ回收率明显高于普通水浴箱制备的冷沉淀（t=27.232，P<0.01）。

3 讨 论

冷沉淀主要富含有FⅧ、Fbg、XIII等活性物质，是FFP在2～6°C缓慢解冻后，产生的一种附着于冰块的白色絮状物。FⅧ是一种性质不稳定的凝血因子，在2～6°C的水浴中制备回收率较高，在8°C以上产生自融，所以制备冷沉淀对融化温度、融化时间及操作方法有较高的要求[5]。

美国Cytotherm公司生产的CT-4T.6C型恒温水浴融化箱，具有微电脑系统，可精确控制水浴温度保持在设定温度；拥有血袋固定装置，保证血袋垂直浸没于水浴中，保证受温均匀、完全；自动水浴箱摇摆及循环水，保证血袋间温度均匀，融化速度均一、快速，所制备的冷沉淀质量均一，回收率较高。该设备制备的冷沉淀之所以质量高，品质好，是因为其把握住制备过程中的关键控制点。温度控制点，精确的水浴温度控制，可以保证良好的融化环境，特别是初始水温恒定在6°C时，冷沉淀中凝血因子FⅧ回收率最高[2-4]，并能保证凝血因子不会产生复溶；速度控制点，新鲜血浆在-30°C以下储存才能保证FⅧ的活性，在制备冷沉淀时，加快融化速度能够确保更高的凝血因子回收率，所以较高的水浴温度（6°C），充分的循环水，以及摇摆运动，能够加速血浆的融化。据国内报道，在1h内融化完成所制备的冷沉淀质量最好[6]。

此外，围绕温度和速度控制点，操作过程中人为因素亦不可忽视，如制备原料血浆时，排空血袋中的空气，可以保证虹吸作用充分，提高融化速度；固定于浸没水浴中，不仅可以确保血袋受温均匀，也可以防止血袋与空气接触并产生部分凝血因子复溶；另外，垂直放置，有利于白色絮状物沉淀于血袋底部的冰块上，防止被虹吸到卫星袋中。

[1]江朝富,崔徐江,汪传喜.现代成分输血与临床[M].天津:天津科学技术出版社,2003:241-242.

[2]张国清,杨玉发.两种融化方法制备冷沉淀比较[J].广州医药,2006,37(3):58-59.

[3]杜晓明,金振良,陈冬芬.冷沉淀中纤维结合蛋白的检测方法比较[J].中国输血杂志,2004,(3):36.

[4]李锡兰,禹晓彬.制备冷沉淀的两种方法比较[J].实用预防医学,2010,(3):174-175.

[5]高峰.临床输血与检验[M].北京:人民卫生出版社,2003:139-140.

[6]杨绍明.冷沉淀制备的关键控制点[J].赣南医学院学报,2005,26.

[7]朱雅轩,陈敏.医用恒温水浴锅的数控化革新[J].医疗卫生装备,2006,(10):100.

[8]李雪梅,鲍自谦,伍秀英,等.不同方法制备冷沉淀的质量评估[J].现代检验医学杂志,2006,(2):22-23.

Advantages of Producing Cold Precipitation from Thermostatic Rock Water Bath Box

SUN Sen,TAN Bang-cai, DU Bin
Service Department, Qingdao Blood Center, Qingdao Shandong 266071, China

R554, TH788+.4

B

10.3969/j.issn.1674-1633.2011.01.040

1674-1633(2011)01-0107-02

2010-07-30

作者邮箱：sunsen1999@163.com

Abstract:ObjectiveTo study the advantages and impact factors of producing cold precipitation from thermostatic rock water bath box.MethodsObtained 24 bags of fresh frozen plasma (200mL±10%)and divided them into two groups of 12 bags.Produced cold precipitation by thermostatic rock water bath box and common water bath box.Measured the coagulation factor FⅧ and rate of recovery.ResultsThe rate of recovery of group 1 was （47.63±4.06）%, and the finish time was 2.5h, while the rate of recovery of group 2 was （64.17±5.96）%, and the finish time was 1h.ConclusionThe thermostatic rock water bath box has advantages of effectively controlling the temperature of water bath and the thawing speed.

Key words:water bath box; cold precipitation; thermostatic rock; coagulation factor; rate of recovery