母犬发情和适时配种的技术鉴定

潘寿文 方建强

母犬发情和适时配种的技术鉴定

潘寿文 方建强

一、外阴部检查

外阴水肿、增大、流出血性分泌物，阴门周围及尾毛湿润、粘结；发情期肿胀明显，触摸阴部和阴门时摆向一侧，后驱升高，此期后期水肿有所减退；发情结束1周～2周复原，表现为阴门小，有皱褶，具有良好的紧张度。

二、阴道检查

阴道检查法对于确定母犬的发情具有一定的说服力。此法一般在站立保定下进行，需要大小适度的犬用开膣器及专用的光源。首先用软纸将阴门周围擦干净，然后用左手的大拇指和食指把阴门口轻轻的翻开，以保证开膣器的前端直接与阴道黏膜接触。右手持已消毒完好与体温接近的开膣器，浇上一些生理盐水以保证润滑，缓缓地插入阴道。起初开膣器的方向朝上，然后水平向前推，达到一定深度后，在专用光源的帮助下，观察阴道黏膜颜色及分泌物等。检查结果与判定：判定母犬发情期的不同时期主要根据阴道黏膜的颜色变化、黏膜的肿胀情况及分泌物的多少。判定标准见表1。

表1 母犬不同发情周期时间内阴道黏膜颜色等的变化情况

三、阴道细胞学检查

阴道上皮的组织学构建受雌激素的影响很大， 间情期阴道黏膜由2层～3层非角质化的扁平上皮覆盖。在雌激素的影响下细胞层增生且表层细胞角质化，最大程度的细胞增生可以达到20层。角质化的过程发生在发情期。从发情后期开始阴道上皮逐渐退化。阴道细胞学检查的目的即在此基础上达到认识发情周期的时间、确定排卵时间及了解卵巢功能状况等。阴道细胞学检查可在做阴道检查的同时用无菌的棉拭子在阴道深处轻轻擦拭一下以采得阴道黏膜上皮(阴道前庭处的阴道黏膜上皮受雌激素的影响不大，故要在阴道深处采样)，然后在载玻片上轻轻的滚一下用帕尼科方法染色。但此法比较复杂，需要较多时间。目前德国汉诺威兽医大学繁殖医学院使用的是一种工厂化生产的专用染色剂，染色时非常方便，且效果非常好但其详细成分不清。阴道黏膜上皮亦可用姬姆萨方法染色。阴道细胞染色的判定标准主要是根据细胞的大小、形状、细胞核与细胞浆成分的比例及核内物质的存在与否。见表2。

在间情期看到的是基底细胞或副基底细胞为主，这些细胞在发情前期消失，形成中间细胞和浅层细胞。除上皮细胞之外，在发情前期还有大量的红细胞渗出并能观察到少量的白细胞。在发情前期向发情期过渡时，浅层细胞增多，且逐渐的角质化。在接近排卵时看到的几乎都是角质化的表层细胞(80%～90%)，这些细胞单个的平位于载玻片上。检验证明，大约75%的母犬在最大角质化程度后的第1天发生排卵。最大角质化程度持续1天～6天，平均2.6天。在发情期的后期表层角质层细胞几天之内逐渐脱落，阴道细胞抹片的角质化细胞相互连接。在这个再生过程中阴道黏膜层也出现了白细胞，在发情后期的2天～4天内阴道抹片上可见到大量的白细胞，同时重新出现深层细胞。在发情后期的早期做阴道细胞抹片间或可见到泡沫细胞(空泡细胞)及发情后期细胞(限制性基底细胞，其细胞浆中含有中性粒细胞)。后一种细胞为发情后期的典型特征。但在阴道炎时也有类似的现象。个别母犬在阴道黏膜的再生过程中常伴有大量的炎性细胞的产生，引起脓性细胞的排出，此点要与子宫疾病区别开来。发情周期中阴道细胞抹片不同细胞的分布情况，见表3。

表2 阴道深层上皮细胞与表层细胞的形态学区别

表3 母犬发情周期过程中阴道细胞抹片不同细胞的分布情况（%）

表4发情周期中血液中孕酮的变化

四、用腹腔镜观察子宫和卵巢的变化

有资料表明：观察母犬子宫的血管变化可以确定母犬的排卵时间。

事实上，使用腹腔镜观察卵巢上卵泡的发育情况，就可以准确地判定排卵时间，即卵泡的一部分突出于卵巢表面1.5毫米左右，其顶端透明，这预示着母犬即将排卵，此时是配种的最适时间。如果在卵巢上看到的“卵泡”是中间塌陷，颜色为肉红色，这表明排卵已经发生，当时的“卵泡”已发育成黄体。

五、孕酮测定

到目前为止，确定母犬排卵时间的范围最可靠的方法是测定孕酮。因为孕酮在发情前期即将结束时开始升高，一般在达到5ng/ml时即可排卵。临床实践中通常这样处理：母犬动情之后(开始进入了发情前期)可每2天进行一次阴道黏膜及阴道细胞学检查，只要阴道细胞角质化达到了50%，即可采血进行孕酮测定，孕酮量达到4ng/ml～5ng/ml时，即可对母犬配种。发情周期中孕酮浓度的变化，见表4。

六、口腔液镜检法

将发情母犬的口腔液置于载玻片上自然烘干，在显微镜下观察唾液结晶体的变化，当被检结果出现典型的羊齿状或松针状，主梗粗而硬，分支密而长时，为母犬最佳配种时期；但出现的羊齿或松针状不典型，主梗有弯曲，分支少而短则为可配期，可能受孕，但产仔不多，可滞1天～2天后再镜检；若出现气泡状，则不能受孕。

七、B超等方法

B型超声诊断技术亦可用于母犬的排卵鉴定，但对B超仪器的质量要求及操作人员的技术要求均很高。在德国，这种方法已经作为一种排卵时间确定的重要辅助手段，但国内尚未见有成功的报道。

（作者单位：公安部南京警犬研究所，210012）

（编辑：李 冰）