TORCH感染的血清学筛查

江婷，刘成程，陈冬梅

(1.沈阳医学院2009级医学检验专业，辽宁 沈阳 110034;2.基础医学院病原生物学教研室)

TORCH，TO(Toxoplasma)即弓形虫，R(Rubella virus)即风疹病毒，C(Cytomegalovirus)即巨细胞病毒，H(Herpes simplex virus)即单纯疱疹病毒，4种病原体的缩写形式，是目前已知的最主要的先天性致畸微生物［1］。TORCH综合征患者引起孕妇流产、死胎，患儿勉强出生后有严重的智力障碍，生活不能自理，并伴有复杂的心血管病，需要家人的长期照顾，给家庭造成极大的精神及经济负担。同时对优生优育与人口素质也构成极大的威胁，因此它的感染诊治工作已引起医护人员的普遍关注。尽管孕期TORCH血清学筛查结果阳性并不代表一定需要终止妊娠，但能够提示其危险性，提早采取措施，以避免新生儿各种先天性疾病的发生，对优生优育具有重大意义。

国内习惯使用TORCH 4项的IgM进行筛查，但IgM抗体试验影响因素较多，且国内人群TORCH各项目IgM阳性率都不高，单纯使用IgM筛查容易出现假阳性。IgG试验对于排除IgM试验假阳性有极大帮助［2］。另外，进年来随着生活方式的多样化，HSVⅠ生殖道感染的比例在逐年增加，英美等国家HSVⅠ的感染率占生殖器疱疹的20%以上。而不加区分HSVⅠ和HSVⅡ的筛查方法极易造成孕妇围产期未经鉴别的HSV感染，给新生儿造成潜在严重危害。因此，为获得更加准确可靠的结果，同时进行10项TORCH筛查是必要 的，包 括 TOX－IgM/IgG、RV－IgM/IgG、CMVIgM/IgG、HSVⅠ－IgM/IgG、HSVⅡ－IgM/IgG。

1 对象与方法

1.1 研究对象 2011年1月至2月，在杭州市迪安医学检验中心做10项TORCH检测的孕妇800例。

1.2 标本采集及检验方法 各合作医院采集待检妇女静脉血2 ml，分离其血清，于－20℃冰箱保存，于第2日在本检验中心检测。采用迈康准TMTORCH－IgM/IgG酶联免疫试剂盒 (美国 Trinity Biotech公司生产)进行检测。

1.3 检测步骤 (1)稀释：IgG，样本、标准品与稀释液1：20稀释;IgM，样本、标准品与稀释液1：80稀释。 (2)洗液配制：将浓缩冲洗液(50ml)用去离子化水稀释为1.0 L冲洗液，摇匀。(3)加样：每项设2孔校准品，在相应微孔中加入100 μl稀释后的校正剂及孕妇血清标本，室温避光孵育 (25±5)min。(4)洗涤：全自动洗板机清洗5次 (洗液自配)，拍干;(5)加反应物：每孔加酶结合物100 μl室温避光 (25±5)min，洗涤;每孔加底物液100 μl室温避光 (10±5)min;每孔加终止液100 μl。(6)读取：用全自动酶标仪在450/620 nm读OD值。

1.4 结果计算 平均校正OD值=两个校正OD值之和/2;矫正因子：标于校正品瓶外用于平衡因温度及计时所造成的误差。临界值=平均校正OD值×矫正因子。ISR值=孕妇标本OD值/临界值。ISR值≤0.90(－);0.91～1.09可疑;≥1.10(+)。

1.5 统计学方法 根据测定结果采用统计学处理，计算各项阳性率。

2 结果

2.1 800例孕妇血清标本TORCH 10项阳性率(表1)

表1 TORCH10项阳性率比较

2.2 TORCH 10项检查存在4种筛查结果 (表2)

表2 TORCH10项检查4种筛查结果的比较

3 讨论

TORCH感染在围生医学中称为TORCH综合征，其感染呈世界性分布。妇女妊娠期间由于内分泌的改变及免疫功能下降，T淋巴细胞免疫功能减弱而易发生原发感染，同时既往受过感染的孕妇体内潜伏的病毒也易被激活而导致复发感染，造成流产、死胎及胎儿缺陷等系列临床不良症状［3］。血清中的IgM抗体在感染早期 (感染后4～7 d)出现，存在约2～3个月，故IgM抗体阳性表明正在发生感染;而血清中IgG抗体出现较晚(＞14 d)，在血清中可存在数年至数十年。

TOX病是一种人畜共患性寄生虫病，也是一种常见的胎儿宫内感染性疾病，其主要临床表现为无脑儿、脑积水、脑内钙化，脉络膜视网膜炎等［4］。弓形虫的主要宿主为猫、犬等。世界上不同国家和地区TOX感染率有很大的差别，其感染率与卫生条件、生活条件、职业等因素有关［5］。我国各地孕妇感染率为4%～10%，但近年来，由于我国家庭饲养宠物数目的增多，感染率呈现上升的趋势，在妊娠早、中、晚期孕妇感染率分别为17%、25%和65%［6］。而在我们的调研中，杭州及周边城市孕妇的既往感染率为1%，新近感染率为0.13%，均明显低于全国平均感染率水平。

RV感染是一种经呼吸道传播、临床症状轻微、预后良好、易被忽视的急性病毒性传染病。妊娠初期罹患RV感染，母体血液中的病毒可通过胎盘感染胎儿，常导致新生儿白内障、小眼球症、重听、心脏病和小头症等先天性异常，如在孕初16周内感染RV，则发病率达80%［7］。妇女RV再感染也可引起胎儿的先天性风疹综合征 (Congenital rubella syndrome，CRS)，但十分少见。杭州及周边地区RV的既往感染率为85.75%，新近感染率为1.13%。孕早期感染RV对胎儿影响很大：在孕8周内，CRS发生率为85%，9～12周为52%，而20周以后就很罕见［8］，因此，须早期诊断及干预。美国自从风疹疫苗被广泛应用以来，CRS已降为每100万活产婴只有1例［9］。建议对RV－IgG阴性妇女 (易感者)进行婚前风疹疫苗接种，以预防新生儿CRS。

CMV是最常见的先天性宫内感染的因素，人是CMV的惟一宿主。它是引起围产期感染较重、较常见的病原体，发生率占全部活产儿的1.0%［10］。成人的感染率＞90%，绝大多数为隐性感染，只有婴幼儿感染者易发病。我国孕妇CMV的既往感染率普遍高于发达国家，沈阳、上海和武汉分别为96.7%、91.4%和79.5%［11］，我们的统计结果表明杭州地区既往感染率为98.25%，新近感染率为0.38%，这说明CMV感染与地区、生活习惯及人口密度不同等有较大关系，而孕妇在妊娠前存在的CMV特异性IgG抗体仅能够提供部分保护作用。

HSV分为Ⅰ型和Ⅱ型。Ⅰ型多见于原发感染，有20～40%患者发生唇疱疹，由口腔、呼吸道途径传播。我们的调查结果显示：杭州及周边地区Ⅰ型的既往感染率为97.5%，新近感染率为0.5%;Ⅱ型可引起继发性感染，主要感染生殖器和腰以下皮肤黏膜，以性接触为主要传播途径。我们的调查结果显示：杭州及周边地区Ⅱ型的既往感染率为12.13%，新近感染率为0.13%。由以上可见孕妇容易发生Ⅰ型感染。Ⅰ型感染多见于原发性，可引起婴儿眼角膜结膜炎和皮肤水疱并且感染后增加了围生儿死亡率［12］。

针对TORCH10项检查有4种筛查结果及解释：(1)IgG(+)IgM(－)：曾经感染过或接种过疫苗，已产生免疫力，胎儿感染的可能性很小。危险性低，无需进一步处理。(2)IgG(－)IgM(－)：孕妇为易感人群。妊娠期最好重复IgG检查，观察是否阳转。 (3)IgG(+)IgM(+)：孕妇可能为原发性感染或再感染，危险性高。应同时采取其它检测方法 (如PCR)来进一步确诊，若其他方法检测结果显示近期感染指标仍旧为阳性、B超显示胎儿情况不佳，应终止妊娠。 (4)IgG(－)IgM(+)：近期感染过或为急性感染，也可能是其它干扰因素造成的IgM假阳性，需2周后复查，如IgG阳转，为急性感染，否则判断为假阳性。我们的调查结果显示：对于 RV、CMV、HSV三项中IgM阳性的孕妇IgG结果大多阳性，应建议随访定期复查;对于IgG(－)IgM(+)也应建议随访，定期复查，排除假阳性的可能。

TORCH检测中单纯检测IgM，往往会忽略感染者到底是原发性还是复发期和恢复期，由于感染阶段不同，治疗手段也有很大的差异，因此，同时检测IgM和IgG非常必要。

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