狗脊饮片不同炮制品中原儿茶酸的含量测定

陈 征，李文莉，童 珂

（湖南省药品检验所，湖南 长沙 410001）

狗脊为常用中药，始载于《神农本草经》，列为中品[1]。《中华人民共和国药典》一部各版均有收载。具有祛风湿，补肝肾，强腰膝的功能。用于风湿痹痛，腰膝酸软，下肢无力[2]。中医临床运用确有疗效。除药材狗脊片外，主要炮制品有烫狗脊、蒸狗脊[3]。其主成分为原儿茶酸。为了探讨狗脊饮片不同炮制品的内在质量，笔者收集了深圳、长沙、邵东、亳州四个地区使用的部分狗脊饮片，按检验顺序编号，参照《中华人民共和国药典》2010年版一部狗脊饮片质量标准，逐一进行含量测定。现将实验方法及结果报道如下。

1 实验材料

1.1 仪器

高效液相色谱仪：Agilent1100系列四元梯度泵、Agilent1100手动进样器、Agilent1100系列二极管阵列检测器、万分之一电子分析天平（Adventurer）。

1.2 试药

乙腈为色谱纯，水为注射用水；其余试剂均为分析纯。原儿茶酸对照品 （由中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用，110809-200604），对照药材（由中国药品生物制品检定所提供供鉴别用，121071-200602）。

1.3 狗脊样品

分别从深圳、长沙、邵东、亳州当地中药饮片公司或中药店购入，经周新蓓副主任药师鉴定为蚌壳蕨科植物金毛狗脊Cibofium barooomet(L.)j.Sm.的干燥根茎。

2 炮制方法[3]

狗脊片：取原药材，除去杂质，洗净，润透，切厚片，干燥，筛去碎屑。

烫狗脊片：取砂子置锅内，武火炒至油砂滑利时，投入狗脊片，照烫法 （《湖南省中药饮片炮制规范》2010 年版附录 1）［3］烫至鼓起，取出，筛去砂子，摊凉，除去残存绒毛。

蒸狗脊片：取净狗脊片，加酒拌匀，照蒸法（《湖南省中药饮片炮制规范》附录1）蒸4～6 h，闷6～8 h，取出，干燥。每100 kg狗脊，用黄酒15 kg。

3 含量测定

3.1 色谱条件

色谱柱：Hypersil ODS C18（4.6 mm×100 mm，5 μm）；流动相：乙腈-1%冰醋酸溶液(5∶95)，检测波长：260 nm；柱温：25 ℃；流速：1.0 mL/min。

3.2 对照品溶液的制备

取原儿茶酸对照品约6 mg，精密称定，加甲醇-1%冰醋酸溶液(70∶30)混合溶液制成每1 mL含60.1μg的溶液，即得。

3.3 供试品溶液的制备

取狗脊药材与狗脊不同炮制品粉末（过三号筛）各1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-1%冰醋酸溶液(70∶30)混合溶液25 mL，称定质量，超声处理30 min，放冷，再称定质量，用甲醇-1%冰醋酸溶液(70∶30)混合溶液补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

3.4 样品的测定

分别精密吸取原儿茶酸对照品与狗脊供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪中，按上述色谱条件测定。测定结果见图1及表1。

图1 狗脊不同炮制品高效液相色谱图

表1 15个批次狗脊饮片中原儿茶酸含量测定结果 ，n=5）

表1 15个批次狗脊饮片中原儿茶酸含量测定结果 ，n=5）

注：与狗脊片组相比 *P＜0.05，**P＜0.01；与烫狗脊片组相比△P＜0.05。

样品编号样品来源湖南长沙批号20100109 20101020 20101027 20110107 20110228 20100110 20110309 20100922 20101021 20101215 20101223 20101224 20100824 20101227 20110108狗脊片mg/g RSD(%)烫狗脊片mg/g RSD(%)蒸狗脊片mg/g RSD(%)湖南邵东安徽亳州1234567891 0广东深圳11 12 13 14 15 0.031 0.026 0.028 0.027 0.030 0.022 0.025 0.031 0.030 0.033 0.028 0.026 0.028 0.024 0.026 1.05 0.71 0.80 0.77 0.81 0.97 0.74 1.09 0.75 0.72 0.94 0.86 1.02 0.87 0.71 0.045 0.038 0.040 0.048 0.042 0.032 0.038 0.044 0.040 0.047 0.035 0.042 0.037 0.033 0.034 0.68 0.91 1.13 0.72 0.84 1.03 0.75 0.93 0.81 0.73 0.79 0.87 0.88 0.92 0.96 0.055 0.051 0.053 0.057 0.050 0.041 0.045 0.056 0.053 0.057 0.047 0.052 0.052 0.046 0.049 0.81 0.97 0.74 1.04 0.91 0.82 0.96 0.93 0.71 0.83 0.98 1.05 1.01 0.76 0.87

4 统计学分析

采用SPSS 15.0软件进行统计，方差齐者，两组比较用t检验，多组样本间比较用单因素方差分析，组间比较用LSD法检验；方差不齐者用近似检验（t’检验）。

5 讨论

试验结果表明，狗脊片、烫狗脊片、蒸狗脊片中原儿茶酸的含量 (平均值)分别为0.028%、0.040%、0.051%，从高到低依次为：蒸狗脊片＞烫狗脊片＞狗脊片。与狗脊片组相比，另外两组均高于狗脊片组（P＜0.05，P＜0.01），说明炮制后可提高原儿茶酸的含量；与烫狗脊片组相比，蒸法原儿茶酸含量高于烫法（P＜0.05），说明蒸法与烫法差异有统计学意义，蒸法优于烫法。

本实验15个批次的狗脊饮片原儿茶酸的含量差异，不仅是不同炮制品中有差异，同一炮制品中也存在差异。如：狗脊片中原儿茶酸高者0.033%,低者0.022%；烫狗脊片中原儿茶酸高者0.048%,低者0.032%；蒸狗脊片中原儿茶酸高者0.057%,低者0.041%。因素分析：（1）狗脊亘货药材本身存在质量差异；（2）饮片在加工炮制与贮藏保管方面存在差异。通过对15个批次的狗脊饮片中原儿茶酸的含量测定，笔者认为：中药人员在中药饮片炮制操作过程中，要严格遵守中药炮制操作规程，尽可能减少中药材主成分或中药有效成分的损失；中药库房应全面做好中药饮片保管工作，确保中药饮片质量。

[1]肖培根.新编中药志[M].北京：化学工业出版社,2002：611-614.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京：中国医药科技出版社,2010：209.

[3]湖南省食品药品监督管理局.湖南省中药饮片炮制规范[M].长沙：湖南科技出版社，2010：45.