神经型钙黏附蛋白在大肠腺癌组织中的表达及意义

韩黎丽，刘 宇 ，邓文英，陈小兵，李 宁，罗素霞

(1郑州大学基础医学院，郑州 450000;2郑州大学附属肿瘤医院)

cadherin家族是由一系列结构和功能相似的单链跨膜糖蛋白组成，按其最初来源分为上皮型、神经型和胎盘型3种，主要参与介导钙离子依赖的同型细胞间的黏附。研究发现，神经型钙黏附蛋白(N-cadherin)可促使癌细胞从癌组织块上脱离及癌细胞与内皮或基质成分黏附，在肿瘤形成的过程中有助于血管形成及上皮细胞—间质细胞的迁移，从而使肿瘤细胞更加富于侵袭性，易于转移［1～3］。2001～2005年，我们采用免疫组织化学的方法检测了98例大肠腺癌组织以及10份癌旁组织中N-cadherin表达情况，并分析其表达与临床病理的关系。

1 材料与方法

1.1 临床资料 98份大肠癌组织标本(观察组)，患者男63例，女35例;年龄32～76岁，平均56.3岁。均经手术病理检查证实诊断。组织学分级:Ⅰ级(高分化)34例，Ⅱ级(中等分化)38例，Ⅲ级(低分化)26例。根据2003版美国肿瘤联合会(AJCC)和国际抗癌联盟(UICC)大肠癌TNM临床分期标准，Ⅰ期15例，Ⅱ期49例，Ⅲ期34例。术前均未接受放、化疗或其它特殊治疗。对照组为10例正常大肠上皮组织(取自手术切除标本的两残端，距癌组织3 cm以上)，经病理证实为分化良好的腺上皮及少量固有层成分。

1.2 N-cadherin检测 N-cadherin鼠抗人单克隆抗体均购自美国Abcam公司，工作浓度均为1∶110;PV-9000二步法免疫组织化学检测试剂盒、DAB显色增强剂购自北京中杉生物技术有限公司。两组标本甲醛固定，石蜡包埋，行HE染色。用已知表达N-cadherin的精原细胞瘤组织切片作阳性对照;以未经免疫的鼠IgG代替一抗作为阴性对照;以PBS代替一抗作为空白对照。染色结果由3名医师双盲评价，每例至少评价5个高倍镜视野，每个视野观察细胞数不少于200个。将胞质着色判为阳性，按阳性细胞所占百分比及着色深浅判定结果。细胞染色:细胞无着色为0分，浅黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。按阳性细胞数百分比评分:0分，无阳性细胞;1分，阳性细胞＜10%;2分，阳性细胞为10% ～50%;3分，阳性细胞＞50%。取两项评分的乘积作为终评分:0分为阴性或弱阳性，1分为中度阳性，2分为强阳性，≥1分为阳性。

1.4 统计学方法 采用SPSS16.0统计软件。两个有序变量之间的联系用Spearman相关分析;分类变量之间的比较用χ2检验。检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 N-cadherin表达 观察组N-cadherin阳性率为71.4%，对照组未见N-cadherin表达(P＜0.01)。

2.2 N-cadherin的表达与大肠腺癌临床病理特征的关系 见表1。

表1 N-cadherin表达与大肠腺癌临床病理特征的关系

3 讨论

N-Cadherin 基因定位于 18q11.2［4］，表达相对分子质量约120 kD的单链跨膜糖蛋白。研究发现，N-cadherin蛋白在胚胎的发育以及多种生物学过程(消化道形成、神经突触的形成以及调节垂体后叶的活动)中起重要作用［5～7］，被认为是一种潜在的促癌基因。

本研究发现，N-cadherin在大肠腺癌细胞的胞质均有不同程度表达。其表达水平与大肠腺癌患者年龄、性别、肿瘤位置、肿瘤大小、浸润深度以及淋巴结转移情况无关，但与肿瘤的TNM分期以及组织学分级呈正相关，即肿瘤的临床分期越高，肿瘤细胞的分化程度越低，N-cadherin的表达越高。其促进肿瘤侵袭及转移的可能机制:①使表皮生长因子受体(EGFR)的作用持续增强［8］。EGFR是一种具有酪氨酸激酶特性的生长因子受体，当表皮生长因子与之结合后可刺激细胞的分裂和增殖，从而促进肿瘤形成。②直接作用于成纤维细胞生长因子受体，调节肿瘤细胞的侵袭和转移［9］。③增加恶性T细胞瘤对上皮细胞的黏附力，使其更容易发生转移［10］。④激活MAPKERK信号转导系统，诱导MMP-9表达，促进肿瘤血管的形成，使肿瘤易于生长和转移。

综上所述，N-cadherin参与了大肠腺癌的浸润和转移，有望成为大肠癌治疗的新靶点。

［1］Suyama K，Shapiro I，Guttman M，et al.A signaling pathway leading to metastasis is controlled by N-cadherin and the FGF receptor［J］.Cancer cell，2002，2(4):301-314.

［2］Jaggi M，Nazemi T，Abrahams NA，et al.N-cadherin switching occurs in high Gleason grade prostate cancer［J］.The Prostate，2006，66(2):193-199.

［3］Nagi C，Guttman M，Jaffer S，et al.N-cadherin expression in breast cancer:correlation with an aggressive histologic variant--invasive micropapillary carcinoma［J］.Breast Cancer Res Treat，2005，94(3):225-235.

［4］Tran NL，Nagle RB，Cress AE，et al.N-cadherin expression in human prostate carcinoma cell lines.An epithelial-mesenchymal transformation mediating adhesion with stromal cells［J］.Am J Pathol，1999，155(3):787-798.

［5］Garcia-Castro MI，Vielmetter E，Bronner-Fraser M.N-cadherin，A cell adhesion molecule involved in establishment of embryonic left right asymmetry［J］.Science，2000，288(5468):1047-1051.

［6］Tanaka H，Shan W，Phillips G，et al.Molecular modification of N-cadherin in response to synaptic activity［J］.Neuron，2000，25(13):93-107.

［7］Rubinek T，Yu R，Hadani M，et al.The cell adhesion molecules N-cadherin and neural cell adhesion molecule regulate human growth hormone:a novel mechanism for regulating pituitary hormone secretion［J］.J Clin Endocrinol Met，2003，88(8):3724-3730.

［8］Suyama K，Shapiro I，Guttman M，et al.A signaling pathway leading to metastasis is controlled by N-cadherin and the FGF receptor［J］.Cancer Cell，2002，2(7):301-314.

［9］Wheelock MJ，Johnson KR.Cadherin-mediated cellular signaling［J］.Curr Opin Cell Biol，2003，15(5):509-514.

［10］Makagiansar IT，Yusuf-Makagiansar H，Ikesue A，et al.N-cadherin involvement in the heterotypic adherence of malignant Tcells to epithelia［J］.Mol Cell Biochem，2002，233(1-2):1-8.