手足口病患儿细胞免疫功能的改变及其临床意义

张玉兰,刘小慧

(江西省儿童医院功能科,南昌 330006)

手足口病是(Hand,foot and mouth disease,HFMD)是由多种肠道病毒感染引起的小儿传染病。临床表现轻重不一,轻者只有皮疹,重者病情进展迅速,短期内出现生命危险。细胞免疫机制在病毒感染性疾病的发生、发展中起着较为重要的作用。因此笔者对HFMD患儿细胞免疫功能状况作了初步探讨,现报告如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

观察186例 HFMD患儿均为2008年6月至2009年6月在江西省儿童医院住院HFMD患者,年龄范围4个月～6岁,平均年龄(2.87±0.74)岁,男102例,女84例。均符合2008年5月卫生部公布的《手足口病预防控制指南(2008年)》的诊断标准[1]。根据病情分为普通组和重症组。重症病例诊断标准为有肌阵挛、脑炎、急性弛缓性麻痹、心肺衰竭、肺水肿等症状。普通病例122例、重症病例64例作为观察组。另据EV71检测结果分为EV71阳性组和EV71阴性组,其中阳性组107例,阴性组79例。选取同期健康体检的正常儿童140例作为健康对照组,男78例,女62例,平均年龄(2.6±0.71)岁。观察组和健康对照组年龄和性别经检验差异无统计学意义。所有检测对象均常规采集咽拭子标本,观察组和健康对照组均清晨空腹采集EDTA.K3抗凝静脉血2 mL。

1.2 检测方法

用流式细胞仪测定外周血T细胞亚群T淋巴细胞(CD3+)、Th 细胞(CD4+)、T s细胞(CD8+)、CD16+,计算其占淋巴细胞的百分比,并计算CD4+/CD8+比值。咽拭子标本送江西省疾病预防控制中心实验室,用RT-PCR法检测肠道病毒EV71。

1.3 统计学方法

两均数比较采用t检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

所有患儿病原检测EV71阳性率为57.8%(107/186)。观察组和健康对照组CD3+、CD4+、CD16+、CD8+,CD4+/CD8+比较见表1。

表1 观察组和对照组T细胞亚群、NK细胞结果比较 ±s,%

表1 观察组和对照组T细胞亚群、NK细胞结果比较 ±s,%

组别 n CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/CD8+ CD16+观察组 186 63.36±7.61 34.26±6.92 24.87±6.21 1.37±0.48 18.46±5.28健康组 140 69.87±8.36 39.28±7.65 25.53±7.72 1.53±0.56 21.37±6.39 P＜0.05 ＜0.05 ＞0.05 ＜0.05 ＜0.05

重症组 CD3+、CD4+、CD16+、CD4+/CD8+和普通组的比较,见表2。

表2 重症组与普通组T细胞亚群及NK细胞结果比较 ±s,%

表2 重症组与普通组T细胞亚群及NK细胞结果比较 ±s,%

组别 n CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/CD8+ CD16+普通组 122 65.36±7.61 36.26±6.92 25.39±5.8 1 1.42±0.51 21.87±6.2 1重症组 64 58.49±6.84 28.78±5.71 24.67±5.24 1.17±0.26 17.32±4.68 P＜0.05 ＜0.01 ＞0.05 ＜0.01 ＜0.05

EV71阳性组和 EV71阴性组 CD3+、CD4+、 CD16+、CD4+/CD8+的比较,见表3。

表3 EV71阳性与阴性患儿T细胞亚群及NK细胞结果比较 ±s,分

表3 EV71阳性与阴性患儿T细胞亚群及NK细胞结果比较 ±s,分

组别 n CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/CD8+ CD16+EV71阳性组 107 59.48±7.82 29.91±6.26 25.23±6.14 1.18±0.29 16.79±4.36 EV71阴性组 79 66.57±8.13 36.86±7.04 24.53±5.47 1.50±0.58 22.46±6.49 P＜0.05 ＜0.01 ＞0.05 ＜0.01 ＜0.05

3 讨论

细胞免疫在机体的免疫应答中起着至关重要的作用,是机体防病抗病的主要免疫屏障之一。细胞免疫主要由NK细胞、T淋巴细胞承担。NK细胞可以直接杀灭肿瘤细胞或病毒感染的细胞;T细胞分CD8+细胞和CD4+细胞。其中CD4+细胞既可通过细胞毒作用及分泌细胞因子,直接清除异己抗原(包括突变的肿瘤细胞、入侵的微生物等),又可通过介导体液免疫应答清除异己抗原。而CD8+细胞能则通过抑制CD4+细胞活性,从而间接抑制B细胞的分化和TC杀伤功能,对体液免疫和细胞免疫起负向调节作用,以保持机体免疫平衡[2]。许多病毒(如HIV病毒)入侵后可以直接破坏机体的细胞免疫体系,致使机体免疫力下降,而无法有效清除病毒,导致疾病的发展。

HFMD的病原是EV71和COXA16等肠道病毒感染,其中最主要是EV71,本组样本的检出率为57.8%与文献[3]报道结果相近。研究发现HFMD患儿细胞免疫功能显著下降,主要表现为T细胞总数、CD4+细胞、及NK细胞下降;CD8+细胞变化不显著;CD4+/CD8+下降。重症组上述改变尤其明显,与文献报道的结果相似。表明患儿细胞免疫功能受损。主要是 T细胞总数、CD4+细胞及NK细胞数量下降,CD4+/CD8+比值降低,从而导致免疫清除功能下降。

重症HFMD进展快、死亡率高。常在短期内死于神经源性肺水肿、肺出血。重症病例几乎(90%)均发生在EV71感染的患儿。有学者在研究脑膜炎患儿免疫应答时发现,特定的细胞毒T细胞相关抗原4(CTLA-4)免疫应答的改变与EV71感染性脑膜炎相关[4]。本研究亦发现上述T细胞免疫的改变主要发生在EV71感染阴性组而阴性组不明显,表明EV71更易损伤机体的细胞免疫系统。可能这就是为什么EV71感染更多导致重症病例的原因之一。

综上所述,HFMD患儿T细胞总数、CD4+细胞及NK细胞数量降低,T细胞总数、CD4+细胞及NK细胞数量下降,CD4+/CD8+比值降低,免疫清除功能下降。重症病例降低尤其严重。患儿细胞免疫功能可作为一个判断病情严重程度的重要指标。

[1] 卫生部.手足口病预防控制指南(2008年版)[EB/OI。].(2008-05-03)[2009-11-25].http:∥WWW.gov.cn/gzdt/2008-05/03/content_960347.htm.

[2] 熊仁秋.细胞毒T细胞的杀伤机制及其生理意义[J].国外医学:免疫学分册,2002,25(3):152.

[3] 吴亦栋,尚世强,陈志敏,等.手足口病病原体流行特征分析及临床意义[J].中华儿科杂志,2010,48(7):537-539.

[4] Yang K D,Yang M Y,Li C C,et al.Altered cellular but not humoralreactions in children with complicated enterovirus 71 infections inTaiwan[J].J Infect Dis,2001,183(6):850-856.