贵州省猪乙型脑炎血清流行病学调查＊

程振涛，陈军义，岳 筠，周碧君，文 明，王开功，隆 华，李敬丹

2.贵州省动物疫病研究室，贵阳 550025；

3.贵州省农业委员会，贵阳 550025

猪乙型脑炎（Japanese encephalitis JE）俗称日本乙脑，是由乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus JEV）引起的一种以妊娠母猪流产、产死胎，公猪睾丸肿大，少数有神经症状为主要特征的蚊媒人兽共患传染病［1－2］。乙型脑炎是一种自然疫源性疫病，大约60余种动物及人类均可感染JEV，成年动物和人往往呈隐性感染的带毒状态。病畜及隐性感染的人畜在病毒血症阶段都可成为传染源，其中猪是主要的传染源，同时也是人类感染传播循环重要的环节，而鸟和蝙蝠也可能是重要的传染源［3－7］。猪乙型脑炎的流行和暴发不仅会给养猪业带来巨大经济损失，而且会严重危害人类健康，对公共卫生安全构成巨大威胁。为掌握贵州省猪群目前JEV隐性感染情况及疫苗免疫效果，在2010年4－11月间采集了贵州省6个地州市6个种猪场、6个规模养猪场和12个养殖小区的血清样本720份，检测猪乙型脑炎抗体状况，分析检测结果，以期为贵州省猪群及易感人群的乙型脑炎防控提供理论参考依据。

1 材料与方法

1.1 血清样本 非免疫猪群血清样本采自贵州省贵阳市、遵义市、凯里市、毕节市、六盘水市和黔东南州等贵州省6个地（州、市）的6个种猪场、6个规模养猪场和12个养殖小区，共计592份。免疫猪群血清样本来自4个地区，隐性感染抗体检测阴性的猪群于采样前1个月按照疫苗说明书肌肉注射疫苗，共采集血清样本104份。

1.2 试剂 猪乙型脑炎病毒ELISA抗体检测试剂盒（生产批号：100508），购自武汉科前动物生物制品有限责任公司。

1.3 疫 苗 种 类 猪 乙 型 脑 炎 活 疫 苗 （SA14－14－2株），购自武汉科前动物生物制品有限责任公司。

1.4 猪乙型脑炎血清抗体检测 参照检测试剂盒说明书进行。在酶标仪上测各孔OD630值。试验成立的条件为：阳性对照孔平均OD630值≥1.0，阴性对照孔平均OD630值必须＜0.3。判定标准为：样品OD630值＞0.42，判为阳性；样品 OD630值在0.38－0.42之间，判为可疑；样品 OD630值＜0.38，判为阴性。

2 结 果

2.1 未免疫感染猪群的JEV抗体检测结果 采集贵州省贵阳、遵义、凯里、毕节、六盘水、黔南等市、州未免疫猪乙型脑炎病毒疫苗猪群血清共592份，应用猪乙型脑炎病毒ELISA抗体检测试剂盒对上述猪血清进行JEV隐性感染抗体水平检测，结果见表1。

表1 猪群JEV抗体检测结果Tab.1 Detection of JEV antibody from swinery in different cities

由表1数据可见，6个地区的JEV抗体阳性率分别为41.8%、54.5%、73.7%、70.8%、70.4%和48.5%，抗体阳性率平均达到59.97%（355/592）。结果可见，贵州省6个地区猪群乙型脑炎病毒隐性感染情况普遍较严重，但存在一定的差异。

2.2 不同饲养方式未免疫猪群隐性感染水平 将上述血清样本猪乙型脑炎病毒ELISA抗体检测结果按照种猪场、规模养猪场和养殖小区3种不同饲养方式进行JEV隐性感染抗体水平统计，结果见表2。

表2 不同饲养方式猪群JEV抗体检测结果Tab.2 Detection of JEV antibody from swinery bred with different styles

由表2结果可见，种猪场、规模养猪场和养殖小区的JEV 隐性感染抗体分别为36.8%（46/125）、56.3%（142/252）和77.7%（167/215）。结果显示，规模养猪场和养殖小区的JEV隐性感染率明显高于种猪场，且以养殖小区的隐性感染率最高。

2.3 不同月份未免疫猪群JEV隐性感染水平 将上述血清样本猪乙型脑炎病毒ELISA抗体检测结果按照不同月份采集进行数据统计，结果见表3。

表3 不同月份猪乙型脑炎隐性感染猪群JEV抗体水平检测结果Tab.3 Detection of JEV antibody from swinery in different months

由表3数据可见，4－10月份猪群JEV隐性感染抗体阳性率呈上升趋势，其中10月份达到高峰，11月份出现下降。不同月份猪群JEV隐性感染抗体阳性率差异明显，7－10月份为2010为一年中隐性感染高峰期。

2.4 JEV疫苗免疫猪群的抗体水平 采集自贵州省4市免疫乙型脑炎病毒疫苗猪群的血清104份，应用猪乙型脑炎病毒ELISA抗体检测试剂盒对其进行JEV免疫抗体水平监测，结果见表4。

表4 四市免疫猪群JEV抗体检测结果Tab.4 Detection of JEV antibody from swinery in four cities

据表4试验结果分析，隐性感染抗体阴性猪群在免疫JEV疫苗1个月后，4个地区的猪群乙型脑炎平均抗体阳性率达到81.7%（85/104），其中贵阳市、毕节地区和六盘水市免疫猪群乙型脑炎抗体阳性率均达到94%以上，仅黔东南州的抗体水平较低，仅为41.4%（12/29）。试验结果说明，疫苗免疫猪群的整体免疫效果较好，JEV疫苗免疫能刺激猪群产生较高的免疫保护抗体。

3 讨 论

乙型脑炎病是一种重要的人兽共患病，而猪是人类感染该病传播途径里重要的环节，也是主要的传染源，因而了解不同猪群的JEV隐性带毒和疫苗免疫效果情况，不仅关系到养猪场的安全生产，同时对人群乙型脑炎的控制也具有一定的指导意义［8－10］。本研究采集了贵阳市、遵义市等6市的6个种猪场、6个规模养猪场和12个养殖小区的未免疫猪群592份血清样本，通过猪乙型脑炎病毒ELISA抗体检测试验监测了不同地区的JEV隐性感染情况，结果显示隐性感染抗体阳性率平均为59.97%（355/592），这与2009年陆朝国等［11］调查结果相似，与沈冰［12］等调查上海市的感染规律相似，但高峰值低于上海市。对所采集血清来源、采集时间、养殖方式进行数据分析发现，JEV隐性感染率在养殖方式上呈现养殖小区＞规模养猪场＞种猪场；在时间上呈现4－10月份为逐渐增长的趋势，11月份出现下降；在来源上呈现不同城市JEV隐性感染率不尽相同，但差异不明显，上述数据表明，贵州省猪群存在着较为严重的JEV隐性感染情况。本研究还对104份血清样本进行了疫苗免疫效果评价，结果显示疫苗免疫抗体阳性率平均为81.7%（85/104），疫苗免疫能刺激猪群机体产生较高水平的保护抗体，因此对本病的防控应坚持疫苗预防为主。

多年研究已经证实，自然界中JEV在蚊－猪－蚊中循环繁殖，其中三带喙库蚊是猪乙型脑炎病毒的主要传播媒介，猪是主要的扩散宿主。而根据贵州省志·地理志报道［13］，贵州省的蚊虫种类多，数量大，其中以三带喙库蚊为优势蚊种。本研究对未免疫JEV疫苗的猪群隐性感染抗体检测结果也呈现出与蚊繁殖季节、繁殖区域之间的相关性。贵州省湿润、温和等特殊的气候条件，极易蚊群的繁殖，尤其在5－10月间更是贵州省蚊群高繁殖期，这与本研究7－10月份猪群呈现最高的JEV隐性感染率存在直接关系。而各城市之间气候存在较大差异，不同饲养方式的猪场环境、灭蚊措施（优异程度呈现种猪场＞规模养猪场＞养殖小区）也存在较大差异，这直接决定了JEV隐性感染率在城市之间、饲养方式之间产生的差异。综合分析不难看出贵州省养猪场JEV隐性感染与其传播媒介三带喙库蚊存在着明显的相关性。而蚊亦是人乙型脑炎的重要传播媒介，如此高的猪群隐性感染率也直接威胁着各地居民的人身健康。

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［13］贵州省地方志编辑委员会.贵州省志.地理志下册［M］.贵阳：贵州人民出版社，1998：177－178.