合欢花黄酮类化学成分的研究

耿 红 梅

(衡水学院 化工学院，河北 衡水 053000)

合欢花黄酮类化学成分的研究

耿 红 梅

(衡水学院 化工学院，河北 衡水 053000)

合欢花用 70%乙醇提取，然后经葡聚糖凝胶、硅胶、聚酰胺柱色谱技术进行分离纯化，得到 7个黄酮类化合物，通过理化常数测定和光谱分析鉴定为槲皮苷(I)、异槲皮苷(II)、芦丁(III)、槲皮素(IV)、异鼠李素(V)、山柰酚(VI)、木犀草素(VII)．化合物V异鼠李素首次从合欢花植物中得到．

合欢花；黄酮；化学成分

合欢花是豆科植物 Albizzia julibrissin Durazz 的干燥花序，是一种分布广泛的传统中草药，性平味苦，具有解郁理气、安神活络之功效．初步药理实验表明合欢花水煎液和醇提取物均表现出显著的抗抑郁作用[1]．李作平等[2-3]报道从合欢花中分离得到了二十四烷酸和槲皮苷等 8个化合物．我们用紫外分光光度法初步测得合欢花中总黄酮含量为 3.9%，并对合欢花中的黄酮类化合物进行了研究，通过理化性质、谱学数据分析并结合文献，鉴定了化合物槲皮苷(I)、异槲皮苷(II)、芦丁(III)、槲皮素(IV)、异鼠李素(V)、山柰酚(VI)、木犀草素(VII)的结构，其中化合物V异鼠李素为首次从该植物中分离得到的已知化合物．

1 仪器与材料

1.1 仪器

X－4型显微熔点测定仪(温度未校正)(天津市分析仪器厂)；EQUINO55型红外光谱仪、GCT型质谱仪、AM－500核磁共振仪(德国Burker公司)；Agilent 1100 液相色谱(德国Agilent公司)．

1.2 试药

薄层色谱用硅胶 G、H 和 GF254及柱色谱用硅胶(青岛海洋化工厂)，Sephadex LH－20(瑞士法玛西亚公司)；柱色谱用聚酰胺、聚酰胺薄膜为浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂产品，实验所用试剂均为分析纯．

实验所用试剂均为分析纯．合欢花购于衡水市红旗大药房，经衡水市药检所主任药师蔡咏梅鉴定为豆科植物合欢花Albizzia julibrissin Durazz．

2 方法与结果

2.1 提取分离

合欢花8 kg，以体积分数70%乙醇加热回流提取3次，每次2 h，合并提取液，减压浓缩回收乙醇得浸膏，用水分散后依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取，每种溶剂萃取数次(至溶液颜色变浅)，合并各萃取液，减压浓缩至干，分别得石油醚萃取物120 g、二氯甲烷萃取物28 g、乙酸乙酯萃取物100 g、正丁醇萃取物 92 g．经过预试，发现黄酮类化合物主要分布在醋酸乙酯和正丁醇部位，因此对这两部分进行了详细分离．取醋酸乙酯萃取物，经硅胶色谱柱色谱分离，聚酰胺柱层析，二氯甲烷-甲醇系统梯度洗脱得到化合物IV～VII，分别为木犀草素(8 mg)、槲皮素(80 mg)、异鼠李素(6 mg)、山柰酚(40 mg)；取正丁醇萃取物，经AB-8大孔吸附树脂富集，聚酰胺柱、硅胶柱层析，二氯甲烷-甲醇系统梯度洗脱，Sephadex LH-20(甲醇)纯化得到化合物I～III，为槲皮苷(250 mg)、异槲皮苷(13 mg)、芦丁(20 mg)．

2.2 结构鉴定

1) 化合物 I 黄色粉末，m.p. 183～185 ℃，盐酸-镁粉反应阳性，Molish反应阳性．示为黄酮苷类化合物．用苯-甲醇(2︰1)聚酰胺板展开、氯仿-甲醇(5︰1)硅胶板展开、醋酸乙酯-正丁醇-甲酸-水(5︰4︰1︰1)展开，与槲皮苷对照品的 Rf值相同．用高效液相色谱法 HPLC检测，与槲皮苷对照品的 tR值相同，且与槲皮苷对照品的混合熔点不下降，确认化合物I为槲皮苷(quercitrin)．

2) 化合物II 黄色粉末(甲醇)，m.p. 234～236 ℃．盐酸-镁粉反应阳性，Molish反应阳性，示为黄酮苷类化合物．经过酸水解后与糖的对照品进行薄层层析实验，证明为葡萄糖．核磁共振氢谱1HNMR(400 MHz DMSO-d6, TMS, δppm)中，存在 6.17(1H，s，H-6)，6.36(1H，s，H-8)，6.81(1H，d, J=8.90 Hz, H-5′)，7.55(1H，s，H-2′), 7.53(1H, s, H-6′)，5.42(1H, d, J=6.95, H-1′)．核磁共振碳谱13CNMR(100MHz，DMSO-d6)中，存在 155.7(C-2)，132.9(C-3)，176.9(C-4)，160.8(C-5)，98.2(C-6)，163.7(C-7)，92.9(C-8)，155.8(C-9)，103.5(C-10)，120.7(C-1′)114.8(C-2′)，144.4(C-3′)，147.9(C-4′)，115.7(C-5′)，121.2(C-6′)，100.4(C-1′)，73.6(C-2′)，75.9(C-3′)，69.5(C-4′v)，77.2(C-5′)，60.5(C-6′)．以上数据与文献[4-7]中的异槲皮苷谱学数据对照基本一致，确认其结构为异槲皮苷(isoquercitrin)．

3) 化合物 III 黄绿色粉末，m.p. 173～174 ℃，盐酸-镁粉反应阳性，Molish反应阳性，示为黄酮苷类化合物．用TLC(3种不同的展开系统)和HPLC检测，与芦丁对照品的Rf值和tR值相同，且与芦丁对照品的混合熔点不下降，确认化合物III为芦丁(rutin)．

4) 化合物 IV 黄色粉末(甲醇)，m.p. 312～316 ℃，盐酸-镁粉反应阳性，Molish反应阴性．用 TLC 和HPLC检测，与槲皮素对照品的Rf值和tR值相同，且与槲皮素对照品的混合熔点不下降，确认化合物IV为槲皮素(quercetin)．

5) 化合物V 黄色粉末(甲醇)，m.p. 303～305 ℃，盐酸-镁粉反应阳性，Molish反应阴性，提示可能为黄酮类苷元．用TLC和HPLC检测，与异鼠李素对照品的Rf值和tR值值相同，且与异鼠李素对照品的混合熔点不下降，确认化合物V为异鼠李素(isorhamnetin)．

6) 化合物 VI 黄色粉末(甲醇)，m.p. 276～278 ℃，盐酸-镁粉反应阳性，Molish反应阴性，用三氯化铝显色后荧光增强，提示可能为黄酮类苷元．用TLC和HPLC检测，与山柰酚对照品的Rf值和tR值相同，确认化合物VI为山柰酚(kaempferol)．

7) 化合物VII 黄色粉末(甲醇)，m.p. 346～350 ℃，盐酸-镁粉反应阳性，Molish反应阴性．核磁共振氢谱1H-NMR(300 MHz, DMSO-d6)中，存在δ12.98(1H, s, 5-OH)、7.42 (1H, dd, J=8.1 Hz, H-6′)、7.40 (1H, d, J=2.0 Hz, H-2′)、6.89(d, J=8.1 Hz, H-5′)、6.68(1H, s, H-3)、6.44(1H, d, J=1.8 Hz, H-8)、6.18(1H, d, J=1.8 Hz, H-6)质子信号．核磁共振碳谱13C-NMR(75 MHz,DMSO-d6), 存在δ182.1(C-4)、165.2(C-2)、164.3(C-7)、161.9(C-5)、157.9(C-9)、 150.6(C-3′)、 146.3(C-4′)、 121.8(C-1′)、 119.3(C-6′)、 116.5(C-2′)、 113.9(C-5′)、 104.0(C-10)、103.2(C-3)、99.6(C-6)、94.5(C-8)碳信号．上述数据与文献[8]中的木犀草素谱学数据对照基本一致，故鉴定化合物VII为木犀草素(luteolin)．

[1] 李作平,赵丁,任雷鸣,等.合欢花抗抑郁作用的药理实验研究初探[J].河北医科大学学报,2003,24(4):214.

[2] 李作平,郜嵩,郝存书,等.合欢花化学成分的研究[J].中国中药杂志,2000,25(2):103.

[3] 李作平,张曼丽,刘伟娜,等.合欢花化学成分的研究(II) [J].天然产物研究与开发,2000,17(5):585.

[4] 滑艳,汪汉卿.白茎绢蒿黄酮类化合物的研究[J].中国中药杂志,2006,31(10):820.

[5] 叶冠,范明松,黄成钢.芨芨草中的黄酮类化学成分的分离与鉴定[J].中草药,2006,37(6):821.

[6] 董建勇,贾忠建.赶山鞭中黄酮类化学成分研究[J].中国药学杂志,2005,40(12):898.

[7] 凌云,鲍燕燕,郭秀芳.蒲公英中两个黄酮甙的分离鉴定[J].中国中药杂志,1999,24(4):620.

[8] 李勇军,何迅,刘丽娜,等.荭草化学成分的研究[J].中国中药杂志,2005,30(6):444.

Abstract:FLOS ALBIZIAE was extracted in 70% acetone solution. Seven components were isolated by Sephadex LH-20,polyamide and silica gel column chromatography. Based on physico-chemical constants and spectral analysis, they were identified as quercitrin (I), isoquercitrin (II), rutin (III), quercetin(IV), isorhamnetin(V), kaempferol (VI), luteolin (VII). Compounds V are isolated from this plant for the first time.

Key words:FLOS ALBIZIAE; Flavonoids; chemical constituents

(责任编校：李建明英文校对：李玉玲)

Study on Flavonoids of FLOS ALBIZIAE

GENG Hong-mei
(College of Chemical Engineering, Hengshui University, Hengshui, Hebei 053000, China)

R284.1

A

1673-2065(2011)01-0028-02

2010-09-15

耿红梅(1968-),女,河北景县人,衡水学院应用化学系教授,医学博士.