青风藤提取物对小鼠非特异性免疫功能的影响

董永和 邱敏 庞海 刘欣媛 武海军 杨玉梅

青风藤来源于防己科植物青藤及毛青藤的干燥藤茎[1，2]，含有清风藤碱甲等多种生物碱，能祛风通络，治疗风湿骨痛，气微，味苦[3，4]。以往研究已证实青风藤制剂具有祛风除湿、活血化瘀、温经止痛、免疫调节等作用，且毒性小，副作用少等优点，但对其免疫调节功能文献报道较少。本文主要观察了青风藤对小鼠非特异性免疫功能的影响，以期进一步为青风藤开发提供科学依据。

1 材料和方法

1.1 药品与试剂青风藤提取物(每克提取物相当于生药1.4 g):青风藤，加水煎煮二次，煎液滤过，滤液合并，静置使沉淀，滤过，滤液浓缩，干燥。临用时用蒸馏水配成所需浓度。醋酸地塞米松片，新乡市常乐制药有限责任公司生产，批号070114。

1.2 实验方法

1.2.1 青风藤对非特异性免疫功能的影响-碳粒廓清法检测小鼠单核巨噬细胞吞噬功能小鼠50只，雌雄各半，体重18～22 g，随机分为5组:第1组，生理盐水组;第2组，阳性对照组，地塞米松0.004 g/kg;第3～5组，青风藤大、中、小剂量组，分别为0.9 g/kg(相当于生药量1.26 g)、0.45 g/kg(相当于生药量0.63 g)、0.225 g/kg(相当于生药量0.315 g)。各组皆灌胃给药，0.2 ml/10 g，1次/d，连续灌胃7 d。末次给药1 h后，各组小鼠均尾静脉注射印度墨汁(按1∶5稀释)，立即计时，注射2 min、20 min用玻璃毛细吸管分别从眼眶内眦静脉丛准确取血20 μl。将取得的血液加到2 ml的0.1%碳酸钠溶液中，用721B型分光光度计在650 nm波长处测定光密度(A值)，取0.1%碳酸钠溶液校正零点。取血完毕，用颈椎脱臼法处死小鼠，剖开小鼠腹腔，取其肝脏和脾脏，用滤纸吸干脏器血污，称重，计算廓清指数K和吞噬指数α，以吞噬指数α值表示小鼠MΦ的吞噬功能。K=(lgA1-lgA2)/(t1-t2)(A1、A2分别代表注射墨汁2 min和20 min时的A值;t为采血时间)α=(K1/3)(W/WLS)(W是体重，WLS是肝脾和重)。

1.2.2 统计学方法数据资料应用SPSS 11.5进行统计学处理，实验数据均以均数±标准差(±s)表示，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 实验结果

青风藤提取物大剂量组能够明显抑制腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数，而中、低剂量组具有降低趋势但无统计学意义，(P＜0.05，＊＊P＜0.01)(见表1)。

表1 青风藤提取物对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响(±s，n=15)

表1 青风藤提取物对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响(±s，n=15)

注:与对照组比较*P＜0.05，＊＊P＜0.01

分组剂量(g/kg)廓清指数(K)吞噬指数(α)生理盐水组0.03±0.015.67±1.09地塞米松组0.0040.01±0.01＊＊4.03±2.40*青风藤提取物小剂量组0.90.02±0.015.40±0.85青风藤提取物中剂量组0.450.02±0.014.95±1.39青风藤提取物大剂量组0.2250.01±0.01＊＊4.38±2.23-*

3 讨论

青风藤是常用中药，该药药理功效明确，化学成分稳定，提取方法简单，临床应用广泛，是一个很有医用价值和开发前景的中药。目前对于青风藤药理作用的研究多集中在中枢神经系统、免疫系统[5]和心血管系统。此外，青风藤及青藤碱是很有研究价值和前景的天然戒毒药物，它们对阿片类戒断综合征疗效确切，而药物本身无成瘾性。对其抗吗啡依赖作用及机理的深入研究，将有助于全面评价青风藤和青藤碱在戒毒方面的应用[6，7]。随着对青风藤有效成分提取分离、含量检测以及药理机制的深入研究，青风藤及其有效成分在临床将会得到更广泛的应用。

巨噬细胞的吞噬作用是机体维持内环境稳定的重要因素，是构成非特异性免疫的关键环节，也是机体产生特异性免疫应答的基础。大多数抗原经巨噬细胞处理后，免疫原性会大大增强，从而刺激机体产生良好的免疫应答[8]。青风藤提取物能降低小鼠的单核-腹腔巨噬细胞吞噬和碳廓清能力。结果提示:青风藤提取物具有降低小鼠非特异性免疫功能的作用。

[1]黄筑艳，张援虎，周岚.青风藤化学成分的研究(Ⅱ).中草药，2009，40(2):193-196.

[2]中国药典[S].一部.化学工业出版社，2005.

[3]曹吉慧，赵桂森，冯延江.青风藤的化学成分与药理作用.国外医药·植物药分册，2008，23(2):62-66.

[4]王晓玉，齐新.青风藤抑制补体活化在心肌梗死中的保护作用.中西医结合心脑血管病杂志，2007:5(10):973-974.

[5]方勇飞，张莹，王勇.青藤碱对类风湿关节炎患者滑膜细胞凋亡细胞周期及bal-2蛋白的影响.中国药物与临床，2008，8(4):261-264.

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[7]张国梅，莫志贤，王彩云.青风藤醇提液及其有效成分防治吗啡戒断症状的实验研究.中药材，2009，32(9):1414-1418.

[8]柳翰凌，康小红.灌胃双歧杆菌BB1对免疫低下小鼠非特异性免疫功能的影响.实验动物科学，2008，25(1):6-7.