差示分光光度法测定盐酸异丙嗪糖浆中盐酸异丙嗪含量

王 芳，宋光伟，刘晓方，曹 健

(第三军医大学新桥医院药学部，重庆 400037)

盐酸异丙嗪糖浆为我院的自制制剂，具有抗组胺与安定作用，用于治疗荨麻疹以及支气管哮喘等过敏性疾病。处方组成中的附加剂对盐酸异丙嗪的质量控制干扰大。采用紫外分光光度法[1]测定盐酸异丙嗪的含量时，以处方中附加剂组成的空白糖浆同法稀释作为空白对照消除其干扰，但在缺少空白糖浆的情况下(如该制剂留样考察其含量)，此方法存在缺陷。为此，笔者参考文献[2－4]，建立差示分光光度法以测定该制剂中盐酸异丙嗪的含量，可消除干扰，且结果满意，现报道如下。

1 仪器与试药

UV－2501型分光光度计(日本岛津);电子天平(德国Sartorius)。盐酸异丙嗪对照品(东港市宏达药业有限公司，含量为99.54%，批号为060606);盐酸异丙嗪糖浆(本院药剂科自制，批号分别为100730，101130，101220);其他辅料均符合2005年版《中国药典(二部)》的规定;30%过氧化氢、冰醋酸均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 处方

盐酸异丙嗪2 g，焦亚硫酸钠1 g，维生素C 1 g，5%对羟基苯甲酸乙酯醇溶液10 mL，水200 mL，单糖浆加至1000 mL。

2.2 溶液制备

精密称取盐酸异丙嗪对照品50.2 mg，置25 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。取本院自制的盐酸异丙嗪糖浆(批号为101130)，作为供试品溶液。按处方量称取其余原料，制成不含盐酸异丙嗪的阴性对照品溶液。取30%过氧化氢溶液2 mL，加冰醋酸200 mL，制成过氧醋酸溶液作为氧化剂，室温放置过夜或70℃加热1 h后使用，避光保存。

2.3 测定波长确定

精取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照品溶液各2份1.5 mL，分别置100 mL量瓶中，一份加水至刻度;另一份加5 mL过氧乙酸溶液，再加水至刻度，摇匀。以水为参比溶液，前者3种溶液为样品溶液，于250～400 nm波长范围内进行扫描，得零阶光谱图(见图1 A)。若以前者3种溶液为参比溶液，后者3种溶液为样品溶液进行扫描，得差示光谱图(见图1 B)。从图1可见，处方中的附加剂在盐酸异丙嗪最大吸收波长处也有吸收，不能直接用紫外分光光度法测定;图2显示，盐酸异丙嗪在336.5 nm波长处有最大差示吸收度值，而其余原料经氧化后在此波长处的差示吸收度值几乎等于零，不干扰盐酸异丙嗪的含量测定。故本试验选用336.5 nm作为盐酸异丙嗪的测定波长。

图1 紫外光谱图

2.4 氧化剂影响

氧化剂加入量:精密吸取对照品溶液1.5 mL，共5份，分别置100 mL 量瓶中，分别加入 0，2，5，10，15 mL 氧化剂(过氧醋酸溶液)，加水至刻度，摇匀，放置30 min。将第一份不加氧化剂的溶液作为参比溶液，其余各溶液依次作为样品溶液，于336.5 nm波长处分别测定各溶液的差示吸收度(ΔA)值。结果表明，氧化剂加入量在5 mL以上时，其差示吸收度值基本一致，故氧化剂选用5 mL即可。

氧化时间:精密吸取对照品溶液1.5 mL共2份，分别置100 mL量瓶中，一份加水至刻度，另一份加5mL过氧醋酸溶液，再加水至刻度，摇匀，放置不同时间(5，15，30，45，60 min)，将前者作为参比溶液，后者作为样品溶液，于336.5 nm波长处测定差示吸收度值(ΔA)。结果显示，室温条件下放置30 min后，其差示吸收度值基本稳定，故氧化时间选用30 min。

2.5 方法学考察

标准曲线绘制:精密称取105℃干燥至恒重的盐酸异丙嗪对照品100.5 mg，置50 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。精密吸取上述溶液 0.5，1.0，1.5，2.0，2.5 mL 各 2 份，分别置 100 mL量瓶中，一份加水至刻度，摇匀，另一份加过氧醋酸溶液5 mL，再加水至刻度，摇匀，静置30 min，前者为参比溶液，后者为样品溶液，于336.5 nm波长处测定各对溶液的差示吸收度值(ΔA)。结果表明，盐酸异丙嗪检测质量浓度在10.00～50.02 μg/mL范围内与差示吸光度值(ΔA)线性关系良好，回归方程为 ΔA=0.0154 C－0.0033，r=0.9999。

回收率试验:精密称取105℃干燥至恒重的盐酸异丙嗪适量，按处方比例制成模拟样品溶液;另精密称取盐酸异丙嗪对照品100.5 mg，置50 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取上述溶液1.5 mL，各2份，分别置100 mL量瓶中，按标准曲线绘制项下方法操作，在336.5 nm波长处测定差示吸收度值(ΔA)计算。结果见表1。

稳定性试验:取回收率试验项下含盐酸异丙嗪30.06 μg/mL的模拟样品溶液，立即测定或每隔15 min测定1次差示吸收度值(ΔA)。结果室温放置30 min后，其差示吸收度值(ΔA)基本稳定，且在2 h内测定结果无明显变化，RSD=0.21%。

表1 回收率试验结果(n=6)

精密度试验:取标准曲线绘制项下的高、中、低质量浓度的对照品溶液，即含盐酸异丙嗪 50.02，30.01，10.00 μg/mL 的溶液，分别连续测定 3次。结果的 RSD 分别为 0.20%，0.13%，0.38%(n=3)，表明仪器的精密度良好。

重现性试验:取同一批供试品溶液3份，按样品含量测定方法测定，计算含量。结果的 RSD=0.34%(n=3)，表明方法重现性良好。

2.6 样品含量测定

称取105℃干燥至恒重的盐酸异丙嗪对照品约50 mg，精密称定，置25 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液;另取盐酸异丙嗪糖浆3批，作为供试品溶液。精密吸取上述溶液1.5 mL，各2份，分别置100 mL量瓶中，按回收率试验项下方法，于336.5 nm波长处测定差示吸收度值(ΔA)，计算其样品中盐酸异丙嗪的含量，并与紫外分光光度法[1]测定结果对照。结果批号为100730，101130，101220的3批样品，以差示分光光度法测定的含量分别为标示量的99.4%，102.8%，100.8%，以紫外分光光度法测定的含量分别为标示量的100.4%，102.6%，101.3%。

3 讨论

利用吩噻嗪类药物易被氧化的性质，采用过氧醋酸氧化吩噻嗪环中的硫为亚砜化合物。以未经氧化处理的溶液作为对照，测定吩噻嗪类药物亚砜化合物溶液的差示吸收光谱。选择最大差示吸收波长，求得 ΔA值。

笔者建立的差示分光光度法，排除了处方中的附加剂对其含量测定的干扰，解决了在没有空白糖浆的情形下对该制剂中盐酸异丙嗪的质量控制问题。

紫外分光光度法的测定方法是，精取本品2.5 mL，置100 mL量瓶中，加0.01 mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀;处分中附加剂组成的空白糖浆同法稀释作为参比溶液，摇匀。用紫外分光光度仪，于299 nm波长处测定吸收度值(A)，=108。

从样品含量测定结果看出，两种测定方法测出的盐酸异丙嗪含量基本一致。因此，在没有空白糖浆的情形下，可以用差示分光光度法测定其含量。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].北京:化学工业出版社，2005:512－513.

[2]安登魁.药物分析[M].第3版.北京:人民卫生出版社，1993:134.

[3]莫明秀，谭瑞威.差示分光光度法测定复方盐酸异丙嗪糖浆中盐酸异丙嗪的含量[J].广东药学院学报，1998，14(1):50－51.

[4]殷建忠.差示分光光度法测定伤风止咳糖浆中盐酸异丙嗪的含量[J].江苏药学与临床研究，2003，11(6):26－28.