化疗联合参附注射液对急性白血病患者T淋巴细胞亚群、白介素-6、肿瘤坏死因子-α的影响

于红涛，吴 涛，何锦照，张忠强

广东省河源市人民医院内二科，广东河源 517000

急件白血病是血液科的常见病、多发病，患者常出现细胞免疫功能低下，且应用各种不同的化疗方法及药物后，容易使患者的细胞免疫功能进一步降低，而化学后应用辅助药物治疗可促进患者细胞免疫功能的恢复。T淋巴细胞在细胞免疫中起着重要的调控作用，白血病患者表现为T淋巴细胞减少，T淋巴细胞亚群比例失调[1]。本研究旨在探讨化疗联合参附注射液对急性白血病患者T淋巴细胞亚群、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响，进一步分析其治疗急性白血病的免疫作用机制，为临床治疗提供进一步的指导依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2008年1月～2010年1月在我院就诊的急性白血病患者30例作为治疗组，患者年龄在36～76岁之间，平均（48.5±3.7）岁。另选同期30例急性白血病仅给予化疗治疗的患者作为对照组，患者年龄在34～73岁之间，平均（47.1±2.5）岁。两组性别、年龄、分型等一般资料经统计学分析，差异无统计学意义，具有可比性（P＞0.05）。见表1。

1.2 治疗方法

两组均采用相同的化疗方案，治疗至少两周以后评价疗效。化疗前后查血液肝肾功能、心电图、尿常规。对照组采用单一化疗方案治疗急性白血病。治疗组在停化疗时开始使用参附注射液40～60 ml加入5%GS 250 ml中静脉点滴，每日1次，连用14 d。而治疗两周后复查血常规。化疗前常规给予昂丹司琼止呕，化疗过程中给予水化、碱化。观察患者的发热，齿龈、皮肤、黏膜出血现象及其他不良反应。

1.3 检测方法

①采集两组患者的外周静脉血 3～5 ml，3000 r／min 离心10 min，取上层血清于-80℃冰箱保存待测。采用美国BD公司生产的流式细胞仪FACS Calibuv测定两组患者的T淋巴细胞亚群（CD4+T、CD8+T淋巴细胞百分比，并计算CD4+T/CD8+T比值）。②采用ELISA方法检测两组血清IL-6和TNF-α水平。检测试剂盒购于日本MBL公司，检测过程严格按试剂盒说明书操作。

1.4 观察项目

观察比较两组的疗效，两组患者治疗前后T淋巴细胞亚群水平的变化，血清IL-6、TNF-α的变化以及两组用药的安全性。

表1 两组一般资料比较（例）

1.5 疗效评判标准

根据 《血液病诊断及疗效标准》[2]评价疗效。完全缓解（CR）：临床症状消失，生活正常或接近正常；血象Hb≥100 g／L（男）或≥90 g／L（女），中性粒细胞绝对值≥1.5×109／L，PLT≥100×109／L，外周血分类无白血病细胞；骨髓像为原+幼稚淋巴细胞≤5%，或原+幼粒细胞≤5%，或原+幼稚单核细胞≤5%；红细胞和巨核细胞系列正常。部分缓解（PR）：骨髓像为原+幼稚淋巴细胞＞5%，但＜20%，或原+幼稚粒细胞＞5%，但＜20%，或原+幼稚单核细胞＞5%，但＜20%；或临床症状、血象中有一项未达CR者。未达CR或PR者为未缓解，CR和PR者之和为缓解。

1.6 统计学方法

采用SPSS 12.0软件进行统计学分析，计数资料比较采用χ2检验，计量资料采用均数标±准差（）表示，组间及组内比较采用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组治疗后临床疗效比较

治疗组总有效率为76.7%，对照组总有效率为56.7%，两组总有效率比较，差异有统计学意义（χ2=8.346，P＜0.05）。 见表2。

2.2 两组治疗前后T淋巴细胞亚群水平变化比较

治疗组和对照组治疗后的CD4+T、CD4+T/CD8+T均较治疗前明显升高。与对照组上述指标比较，治疗组改善的更明显，两组治疗后比较差异有统计学意义 （P＜0.05）。两组的CD8+T治疗后较治疗前无明显变化，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表 3。

表2 两组治疗后临床疗效比较[n（%）]

表3 两组治疗前后T淋巴细胞亚群水平变化比较（）

表3 两组治疗前后T淋巴细胞亚群水平变化比较（）

组别 例数 时间30治疗组 治疗前治疗后t值P值对照组30治疗前治疗后t值P值CD4+T（%）25.43±7.1431.30±6.256.375＜0.0526.37±6.4627.32±7.316.138＜0.05 CD8+T（%）32.76±5.6030.34±4.251.345＞0.0531.52±4.7429.25±6.181.541＞0.05 CD4+T/CD8+T 0.81±0.251.08±0.165.136＜0.050.78±0.160.96±0.295.243＜0.05

2.3 两组治疗前后血清白介素-6、肿瘤坏死因子-α变化比较

治疗组和对照组治疗后两组的IL-6和TNF-α均较治疗前明显降低，差异有高度统计学意义（P＜0.01），且与对照组治疗后比较，治疗组降低的更明显，两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。 见表 4。

2.4 两组不良反应比较

两组在治疗期间未见明显不良反应发生，肾功能均正常，出现肝损害患者经对症处理均好转。

3 讨论

急性白血病患者本身免疫功能低下，化疗是临床治疗白血病的常规手段，但是化疗对细胞的免疫功能有明显的抑制作用。因此，在化疗结束后应用辅助药物可以使患者的细胞免疫功能有明显的改善[3]。

表4 两组治疗前后血清IL-6、TNF-α变化比较（）

表4 两组治疗前后血清IL-6、TNF-α变化比较（）

治疗组组别 例数30时间治疗前治疗后t值P值对照组30治疗前治疗后t值P值IL-6（ng/L）295.98±84.69107.22±63.4315.18＜0.01307.97±82.52156.33±71.6921.41＜0.01 TNF-α（μg/L）1138.91±147.89160.08±78.4146.15＜0.011122.13±145.64191.02±74.9648.16＜0.01

急性白血病患者 T淋巴细胞亚群 CD4+、CD8+、CD4+/CD8+的水平，能直接反映患者细胞的免疫功能。CD4+是辅助性T细胞的代表，CD8+是抑制性T细胞的代表。CD4+/CD8+值是机体免疫调控网络的重要枢纽，生理状态下CD4+和CD8+之间始终保持动态平衡，调节机体的免疫状态[4]。TNF-a主要由脂多糖（LPS）或卡介苗（BCG）活化的单核巨噬细胞产生，具有抗肿瘤、抗病毒的作用，也是重要的免疫调节分子和致炎因子[5]。IL-6通常以Th2细胞、单核巨噬细胞、成纤维细胞产生为主，可以促进B细胞分化成熟，还可以刺激造血干细胞增生分化，参与炎症反应。化疗后急性白血病患者IL-6分泌水平明显降低，说明化疗后白血病患者处于免疫功能抑制状态。因此，积极寻找有选择性杀伤及免疫调节药物成为治疗白血病研究的重要课题[6]。

参附注射液由人参、附子的提取物组成，有调中益气、实卫固脱的作用，益肺健脾，补气养血，激活骨髓造血功能，减少细胞破坏作用，能减轻化疗对骨髓功能的抑制，使白细胞恢复时间缩短，降低白细胞、血小板减轻程度[7]。

本组资料结果显示，治疗组30例急性白血病患者在化疗的同时应用参附注射液后，治疗组和对照组治疗后的CD4+T、CD4+T/CD8+T均较治疗前明显升高，且治疗组上述指标改善较对照组更明显，说明其能改善急性白血病患者的免疫功能；同时，治疗组和对照组治疗后IL-6、TNF-α水平明显降低，且治疗组降低程度明显低于对照组，说明参附注射液可通过影响急性白血病患者体内IL-6、TNF-α的表达水平，进一步干预二者对造血干细胞和白血病细胞增殖和分化的调控作用，从而达到治疗的目的，与魏影非等[8]所报道的研究结果基本一致，但由于样本量过小，对其机制仍需要扩大样本量进一步研究。

[1]徐丽华.小儿急性白血病患者血清VEGF水平和外周血B细胞及T淋巴细胞亚群水平检测的临床意义[J].淮海医药,2008,26(1):7-8.

[2]张之南,沈悌.血液病诊断及疗效标准[M].北京:科学出版社,2007:33.

[3]Brune M,Castaigne S,Catalano J,et al.Improved leukemia free survival after postconsolidation immunotherapy with histamine dihydro and chloride and interleukin-2 in acute myeloid leukemia:results of a randomized phase3 trial[J].Blood,2006,108(32):88-96.

[4]Angulo DG,Yuen C,Palla SL,et al.Absolute lymphocyte count is a novel prognostic indicator in AL and AML:implications for risk stratification and future studies[J].Cancer,2008,112(2):407-415.

[5]李辉,吴雨洁,仇海荣.T淋巴细胞亚群结合遗传学检测在初发急性白血病中的相关研究[J].现代检验医学杂志,2010,25(2):84-85.

[6]吴朝阳,吴雅荣,王法春,等.急性白血病患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞水平检测及临床意义[J].江苏大学学报:医学版,2008,18(5):432-433.

[7]谭琳,聂波,谢瑜.急性白血病患者化疗后应用白介素-2对T淋巴细胞亚群的影响[J].中国医学创新,2010,7(2):17-18.

[8]魏影非,杜惠兰,王素云,等.参附注射液配合化疗治疗急性白血病疗效及对细胞免疫、血清IL-6和TNF-α水平的影响[J].中国中西医结合杂志,2003,23(4):258-259.