外阴洗剂薄层色谱鉴别方法

李义梅，王 明

(1.延安市药品检验所，陕西 延安 716000;2.吴起县人民医院，陕西 吴起 717600)

外阴洗剂是一种医院制剂，由黄连、蛇床子、苦参、黄柏、生百部、枯矾六味药组成，具有清热燥湿，除带止痒的功效。用于各种原因引起的外阴炎、阴道炎、宫颈炎及外阴瘙痒等症。为有效地控制其质量，保证其临床疗效的稳定，本实验采用薄层色谱法(TLC)对制剂中蛇床子、黄连、黄柏、苦参四味药进行了鉴别，现报道如下。

1 仪器与试药

紫外光灯(365 nm);黄连对照药材、黄柏对照药材，蛇床子素对照品、盐酸小檗碱对照品、苦参碱对照品(中国药品生物制品检定所);外阴洗剂(延安市中医医院制剂室，批号为091013、091103、091225);阴性样品均依据处方规定除去所缺药材制得(延安市中医医院制剂室);硅胶G(青岛海洋化工厂);其他化学试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 蛇床子的TLC鉴别

取本品50 ml，加乙醚振摇提取2次，每次30 ml，合并乙醚液，挥干，残渣加1 ml使溶解，作为供试品溶液。另取蛇床子素对照品加乙醇制成每1 ml含1 mg的溶液，作为对照品溶液。再取缺蛇床子的阴性对照样品同法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录ⅥB)试验[1]，吸取供试品溶液和阴性对照溶液各10 ul，对照品溶液2 ul，分别点于同一硅胶G板上，以苯 －乙酸乙酯 －(30∶1)[2]为展开剂，展开，取出，晾干。置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点，阴性对照品溶液在相应的位置上无此荧光斑点。(见图1)

图1

2.2 黄连、黄柏的TLC鉴别

取本品10 ml，蒸干，残渣加甲醇5 ml使溶解，滤过，滤液浓缩至1 ml，作为供试品溶液。另取黄连对照药材0.1 g、黄柏对照药材0.2 g加甲醇10 ml超声处理20 min，滤过，滤液作为对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1 ml含1 mg的溶液，作为对照品溶液。再取缺黄连、黄柏的阴性对照样品同法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述5种溶液各5 ul，分别点于同一硅胶G板上，以苯－乙酸乙酯－异丙醇－甲醇 － 浓氨试液(12∶6∶3∶3∶1)[3]为展开剂，置氨蒸气预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液色谱及对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照溶液在相应的位置上无此荧光斑点。(见图2)

图2

2.3 苦参的TLC鉴别

取本品10 ml，加浓氨试液调PH值至10，振摇10 min，用氯仿提取2次，每次20 ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加氯仿1ml使溶解，作为供试品溶液。另取苦参碱对照品，加氯仿制成每1 ml含1 mg的溶液，作为对照品溶液。再取缺苦参的阴性对照样品同法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录ⅥB)试验，吸取供试品溶液和阴性对照溶液各10 ul，对照品溶液5 ul，分别点于同一硅胶G板上，以氯仿－甲醇－浓氨试液(5∶1∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品溶液色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照溶液在相应的位置上不显示斑点。(见图3)

图3

3 讨论

以对照药材和对照品作为阳性对照，以缺主药的样品作为阴性对照。结果表明，方法简便，斑点清晰，重现性好，专属性强，阴性试验无干扰，具有可操作性，可定性控制该制剂的质量。

笔者曾采用取本品20 ml蒸干，残渣加乙醇10 ml，置水浴上充分搅拌，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2 ml使溶解，作为供试品溶液。结果薄层色谱分离不好，主斑点不明显。改用本实验方法获得了满意的效果。

处方中黄连、黄柏都含盐酸小檗碱，所以分别用黄连、黄柏对照药材作为阳性对照把黄连、黄柏用同一薄层方法鉴别。展开时应注意温度控制在20～30℃范围内，温度太高或太低，均使整个色谱的Rf值偏高;相对湿度控制在47%以下为好[3]。氨蒸气预饱和时最好用新鲜浓氨试液配制展开剂预饱和层析缸，足够的氨蒸气是分离质量的关键因素之一。

[1]国家药典委员会中华人民共和国药典2005年版一部，北京:化学工业出版社，2005;141，附录VIB.

[2]国家药品监督管理局.国家中成药标准汇编(皮肤科分册).2002:342.

[3]卫生部药典委员会.中华人民共和国中药薄层色谱彩色图集.广东科技出版社，1993:55，149.